Aislamiento de monocitos de sangre total por selección inmunomagnética negativa

Resumen

Fuente: Plaisance-Bonstaff, K., et al. Aislamiento, transfección y cultivo de monocitos humanos primarios. J. Vis. Exp. (2019)

En este video, demostramos el aislamiento de monocitos de sangre humana completa mediante separación inmunomagnética negativa. Los monocitos aislados se pueden utilizar para análisis posteriores.

Protocolo

Todos los procedimientos que involucran participantes humanos se han realizado de acuerdo con las directrices institucionales, nacionales e internacionales para el bienestar humano y han sido revisados por la junta de revisión institucional local.

1. Aislamiento de monocitos humanos primarios por selección inmunomagnética negativa

1. Recoja 40 mL de sangre entera humana fresca (ya sea de un paciente VIH⁺ o de un control sano) en cuatro tubos de vacío de 10 mL de ácido etilendiaminotetraacético (EDTA) (10 mL de sangre por tubo). Utilizando técnicas estériles bajo una cabina de bioseguridad, transfiera los....

Materiales

Lista de materiales utilizados en este artículo

Nombre	Empresa	Número de catálogo	Comentarios
0,5 M de EDTA	Invitrogen	AM9260G
BD Vacutainer Tubos de extracción de sangre de plástico con K2EDTA	BD Biociencias	366643
Imán Easy 50 EasySep	Tecnologías StemCell	Año 18002
Kit de aislamiento de monocitos humanos Easy Sep Direct	Tecnologías StemCell	Año 19669
Pbs	Gibco	20012027
RPMI 1640 con L-Glutamina	Corning	10040CVMP