Aislamiento de linfocitos de un parche de Peyer de ratón

Resumen

Fuente: Yazicioglu, Y. F., et al. Desentrañando a los actores clave de la inmunidad humoral: Protocolo de aislamiento de linfocitos avanzado y optimizado de los parches de Murine Peyer. J. Vis. Exp. (2018)

En este video, demostramos el aislamiento de linfocitos de un parche de Peyer de ratón cosechado. Los linfocitos aislados se pueden utilizar para análisis posteriores.

Protocolo

Todos los procedimientos que involucran modelos animales han sido revisados por el comité institucional local de cuidado de animales y la junta de revisión veterinaria de JoVE.

1. Escisión quirúrgica y preparación de tejidos:

1. Extirpación quirúrgica del intestino delgado (IS)
   1. Eutanasia de ratones mediante asfixia con CO₂ o cualquier método equivalente aprobado por el comité institucional de ética animal.
   2. Transfiera el mouse a un área dedicada para la escisión quirúrgica. Coloque la parte trasera hacia abajo y desinfecte el abdomen con etanol al 70%. Realizar una laparotomía corta....

Materiales

Lista de materiales utilizados en este artículo

Nombre	Empresa	Número de catálogo	Comentarios
Placas de 6 pocillos, 12 pocillos y 96 pocillos	Halcón/Corning	353046,353043/3596
Tubos cónicos de 50 ml	halcón	3520
Filtro de células de 40 μm	halcón	352340
Jeringa-émbolo de 10 ml	Exel INT	26265
RPMI	Corning	15-040-CV
Pbs	Corning	21-040-CM
FBS	Biológicos de Atlanta	S11150
Agitador orbital	VWR	Modelo 200
Tijera de extremo curvo
Pinzas dentadas finas
Tijera curva pequeña