Canulación de la arteria carótida en un modelo de rata

Resumen

Fuente: Trevaskis, N. L. et al., El modelo de rata canulada del conducto linfático mesentérico: aplicación a la evaluación del transporte de fármacos linfáticos intestinales. J. Vis. Exp. (2015)

En este video, demostramos un procedimiento quirúrgico para canular la arteria carótida izquierda en un modelo de rata.

Protocolo

Todos los procedimientos que involucran modelos animales han sido revisados por el comité institucional local de cuidado de animales y la junta de revisión veterinaria de JoVE.

>1. Canulación de la arteria carótida

La canulación de la arteria carótida puede realizarse antes o después de la canulación del conducto linfático mesentérico. Algunos operadores prefieren canular la arteria carótida antes de canular el conducto linfático para reducir el posible desplazamiento de la cánula linfática al mover al animal.

1. Coloque una marca en la cánula de la arteria carótida a 2,5 cm de la punta biselada para identificar la parte del tubo que se insertará en la arteria. Conecte el otro extremo de la cánula (es decir, sin bisel) a una aguja de 23 o 25 g conectada a una jeringa llena de solución anticoagulante y llene la cánula con la solución anticoagulante asegurándose de que no haya espacios de aire.
2. Para facilitar la canulación, coloque a la rata anestesiada en decúbito dorsal con el cuello estirado y la cabeza apuntando hacia el operador. Tenga en cuenta que algunos operadores prefieren realizar esta técnica con la cola de la rata apuntando hacia el operador.
3. Coloque una incisión longitudinal de 1 a 1,5 cm a través de la capa de piel por encima de la izquierda de la tráquea en el plano sagital.
4. Disecciona el tejido conectivo subcutáneo con pinzas de punta roma para exponer los músculos pares del cuello subyacentes.
5. Retraiga los músculos del cuello para revelar la arteria carótida izquierda (ubicada ~ 1 cm por debajo de la superficie de la piel y pulsante). Limpie el tejido conectivo suprayacente de la arteria mediante una disección roma.
6. Aísle cuidadosamente una sección de ~ 1 cm de la arteria con pinzas de tejido romo, teniendo cuidado de no dañar el tracto nervioso vago adyacente. Realice esto abriendo y cerrando las pinzas de punta roma verticalmente a lo largo de cada lado de la arteria para liberarla del tejido circundante y del nervio vago.
7. Con pinzas de punta fina, enhebre dos suturas de seda debajo de la arteria carótida y colóquelas en cada extremo de la sección de la arteria aislada. Ate la sutura más cercana al operador y la más alejada del corazón y la clavícula de la rata (Figura 1A).
8. Ocluya el flujo sanguíneo a través de la arteria colocando un par de pinzas rectas de punta fina debajo de la arteria (Figura 1B).
9. Con las tijeras de iris de punta fina, coloque una pequeña incisión en la superficie superior de la arteria (aproximadamente 1/3 del camino hacia abajo desde la parte superior del área aislada). Enjuague la sangre derramada en la superficie de la arteria con solución salina heparinizada y limpie suavemente con puntas de algodón.
10. Inserte la punta de la cánula en la arteria con un par de pinzas de punta curva. Una vez insertada, retire las pinzas rectas de punta fina que ocluyen el flujo sanguíneo y avance la cánula 2,5 cm dentro de la arteria usando dos pares de pinzas, una para sujetar la cánula dentro de la arteria para evitar que la sangre se filtre hacia atrás y la otra para insertar la cánula.
11. Use una pinza arterial pequeña para sostener la cánula dentro de la arteria y retire las pinzas rectas de punta fina que se colocaron debajo de la arteria en el paso 1.8 para ocluir el flujo sanguíneo.
12. Confirme la permeabilidad de la cánula inyectando una solución anticoagulante en la cánula y extrayendo una pequeña cantidad de sangre (Figura 1C). A continuación, enjuague la cánula con una solución anticoagulante y selle el extremo con la llama de un encendedor o un tapón de cánula.
13. Ate la cánula en su lugar con las dos suturas colocadas debajo de la arteria en el paso 1.8.
14. Retire la pinza arterial y asegure una tercera sutura alrededor de la arteria y la cánula. Cierre la herida del cuello con suturas.

Resultados

Figura 1. Fotografías de (A) la arteria carótida aislada con dos suturas de seda con la más cercana al operador atada, (B) la arteria carótida aislada y el flujo sanguíneo ocluido con un par de pinzas rectas de punta fina colocadas debajo de la arteria, y (C) una arteria carótida con la cánula en su lugar y la permeabilidad que se verifica extrayendo...

Materiales

Lista de materiales utilizados en este artículo

Nombre	Empresa	Número de catálogo	Comentarios
Solución salina estéril	Cuidado de la salud de Baxter	AHB 1307	Se puede utilizar cualquier marca. Un ejemplo aquí son las bolsas de solución salina Baxter de 100 ml, caja de 50
70 % de etanol en agua	cualquier		Se puede utilizar cualquier marca
Heparina (35000U.I. en 35 mL)	Sigma Pharmaceuticals	337220	http://sigmaco.com.au/
Cánula de polietileno (PE) de 0,96 mm x 0,58 mm de diámetro interno	Extensiones de microtubos	PE8050	Se puede utilizar cualquier marca. Un ejemplo de ello es el tubo de PE de 0,8x0,5 mm, 30 m
Cánula de polietileno (PE) diámetro exterior 0,8 mm x diámetro interno 0,5 mm	Extensiones de microtubos	PE9658	Se puede utilizar cualquier marca. Un ejemplo de ello es el tubo de PE de 0,96x0,58 mm, 30 m
gobernante	cualquier		Se puede utilizar cualquier marca
Marcadores	cualquier		Se puede utilizar cualquier marca
encendedor	cualquier		Se puede utilizar cualquier marca
Agujas de calibre 23	Livingstone Internacional	DN23GX0.75LV	Se puede utilizar cualquier marca. Un ejemplo aquí es Livingstone Aguja Desechable, Estéril, 23GX0.75inch, 100/BOX. http://www.livingstone.com.au/?PG=search_result&CAT= 6&buscar=DN23GX0.75LV
Agujas de calibre 25	Livingstone Internacional	DN25GX1.0LV	Se puede utilizar cualquier marca. Un ejemplo de ello es la Aguja Desechable Livingstone, Estéril, 25GX1.0inch, 100/BOX. http://www.livingstone.com.au/?PG=search_result&CAT=6&search= DN25GX1.0LV
Jeringa de 1 ml	Livingstone Internacional	T3SS01TA	Se puede utilizar cualquier marca. Un ejemplo aquí es la jeringa Terumo 1 ml Slip Tuberculin 100/Box. http://www.livingstone.com.au/?PG=search_result&CAT=6&search =T3SS01TA
Jeringa de 10 ml	Livingstone Internacional	T3SS10SA	Se puede utilizar cualquier marca. Un ejemplo aquí es la jeringa Terumo 10 ml Slip 100/Box. http://www.livingstone.com.au/?PG=search_result&CAT=6&search =T3SS10SA
Hisopos de gasa	Livingstone Internacional	GSC075	Se puede usar cualquier marca y cortar al tamaño requerido. Un ejemplo aquí es el hisopo de gasa relleno de algodón de 7,5x7,5 cm, 8 capas. http://www.livingstone.com.au/?PG=search_result&CAT=6&search =GSC075
Bastoncillos de algodón	Livingstone Internacional	CTAST075DP	Se puede utilizar cualquier marca. Un ejemplo aquí es el aplicador de algodón Livingstone de plástico de doble punta. 75MM. 100/PK. http://www.livingstone.com.au/?PG=search_result&CAT=6&search =CTAST075DP
Sutura de seda	Livingstone Internacional	DTSK163019F4
Hojas de bisturí	Herramientas de Bellas Ciencias, (FST)	10020-00	Se puede utilizar cualquier marca. Un ejemplo de ello es la hoja de bisturí FST #20. http://www.finescience.ca/Special-Pages/Products.aspx?ProductId=191
Mango de bisturí	Herramientas de Bellas Ciencias, (FST)	10004-13	Se puede utilizar cualquier marca. Un ejemplo de ello es el mango de bisturí FST #4. http://www.finescience.ca/Special-Pages/Products.aspx?ProductId=298&CategoryId=51
1 x Tijeras quirúrgicas pequeñas	Herramientas de Bellas Ciencias, (FST)	14060-09	Se puede utilizar cualquier marca. Un ejemplo aquí es FST Tijeras finas, de 9 cm con filo de 21 mm, afiladas, rectas. http://www.finescience.ca/Special-Pages/Products.aspx?ProductId=40&CategoryId=17
2 x Pinzas con punta curva dentada	Herramientas de Bellas Ciencias, (FST)	11001-13	Se puede utilizar cualquier marca. Un ejemplo de ello es la pinza de patrón estándar FST de 13 cm con punta curvada de 2,8x1,4 mm. http://www.finescience.ca/Special-Pages/Products.aspx?ProductId=405&CategoryId=32
1 x Tijeras de iridectomía	Herramientas de Bellas Ciencias, (FST)	15000-08	Se puede utilizar cualquier marca. Un ejemplo aquí es FST Vannas Spring Scissors - 2.5mm Cutting Edge, Straight. http://www.finescience.ca/Special-Pages/Products.aspx?ProductId=17&CategoryId=16
1 x Pinzas con punta recta dentada	Herramientas de Bellas Ciencias, (FST)	11650-10	Se puede utilizar cualquier marca. Un ejemplo aquí es FST Graefe de 10 cm recto con punta dentada de 1 x 0,99 mm. http://www.finescience.ca/Special-Pages/Products.aspx?ProductId=390&CategoryId=32
1 x Pinzas con punta lisa, afilada, recta y fina	Herramientas de Bellas Ciencias, (FST)	11251-10	Se puede utilizar cualquier marca. Un ejemplo aquí es la pinza FST Dumont #5 recta de 11 cm con punta de 0,08 x 0,04 mm. http://www.finescience.ca/Special-Pages/Products.aspx?ProductId=335&CategoryId=29
1 x Pinzas con pinzas curvas finas y lisas	Herramientas de Bellas Ciencias, (FST)	11063-07	Se puede utilizar cualquier marca. Un ejemplo de ello son las pinzas delicadas FST de 9 cm con punta lisa de 0,4 x 0,3 mm. http://www.finescience.ca/Special-Pages/Products.aspx?ProductId=360
1 x Portaagujas de sutura	Herramientas de Bellas Ciencias, (FST)	12001-13	Se puede utilizar cualquier marca. Un ejemplo aquí es el portaagujas Hasley FST de 13 cm con punta de 16 mm de largo x 1,9 mm de ancho. http://www.finescience.ca/Special-Pages/Products.aspx?ProductId=254&CategoryId=70
1 x Pinza para arterias	Herramientas de Bellas Ciencias, (FST)	18050-28	Se puede utilizar cualquier marca. Un ejemplo de ello es la mordaza recta FST Bulldog Serrefines, de 28 mm de largo y 9x1,6 mm con prensa de abrazadera mediana. http://www.finescience.ca/Special-Pages/Products.aspx?ProductId=270&CategoryId=82