Medición de la inhibición inducida por el sistema inmunitario del crecimiento de las plántulas

Resumen

Fuente: Bredow, M. et al., Ensayos de Estallido Oxidativo Activado por Patrones e Inhibición del Crecimiento de las Plántulas en Arabidopsis thaliana. J. Vis. Exp. (147),(2019).

Este video muestra el ensayo de inhibición del crecimiento de plántulas en la planta Arabidopsis thaliana. Se determina el impacto del aumento de la concentración de elicitor de péptidos inmunes en el crecimiento de las plántulas.

Protocolo

1. Ensayo de inhibición del crecimiento de plántulas

1. Esterilice las semillas y siembre en placas Murashige y Skoog (MS).
   1. Prepare un medio MS estéril de media concentración (0,5x) (2,16 g/L) que contenga un 0,8% de agar [p/v]. Vierta el medio en placas (90 x 15 mm) en una campana de flujo laminar.
   2. Esterilizar aproximadamente 100 semillas en un tubo de microcentrífuga lavando con 1 mL de etanol al 70% durante 2 min y retirar por aspiración. Agregue 1 ml de lejía al 40% y meca suavemente durante 17 minutos a temperatura ambiente. Retirar la lejía por aspiración y lavar tres veces en 1 mL de agua estéril durante 5 min. R....

Resultados

Figura 1. Ensayo de inhibición del crecimiento de plántulas inducido por elicitor en Arabidopsis. (A) Siembre las plántulas en agar MS y crezca durante 3-4 días en condiciones estándar de días cortos. (B) Trasplante las plántulas a placas de 48 pocillos que contengan medio MS o MS que contengan diferentes concentraciones de elf18. (C) Después de 8-12 días, evalúe visualmente el tamaño de la .......

Materiales

Lista de materiales utilizados en este artículo

Nombre	Empresa	Número de catálogo	Comentarios
Placas estériles de 8 pocillos con tapa	Sigma-Aldrich	CLS3548
Escala analítica con borrador Sheid	VWR	VWR-225AC	Se puede utilizar cualquier escala analítica estándar para los ensayos de incidencia de crecimiento, sin embargo, una salida directa por computadora es óptima.
BioHit mLine Pipeta Mecánica 12 Multicanal (30-300 uL	sartorio	725240	Se puede utilizar cualquier pipeta multicanal, así como una sola pipeta si es necesario.
elf18 (AcSKEKFERTKPHVNVGTIG)	EZ Biolab	CP7211	Almacene 10 mM de péptido madre a -80 grados C en tubos de unión a proteínas bajas. Cuando esté descongelado, almacene 100 uM de material de trabajo a -20 grados C.
Sales basales de Murisage y Skoog	Laboratorios Cedarlane	MSP09-100LT	Guárdelo a 4 grados C.
Placas de poliestireno blanco de 96 pocillos	Fisher Científico	07-200-589