Medición de TEER en células epiteliales irradiadas con rayos X cocultivadas con PBMC

Resumen

Fuente: Babini, G., et al. Un método de cocultivo para investigar la diafonía entre las células Caco-2 irradiadas con rayos X y PBMC. J. Vis. Exp. (2018)

Este video muestra la medición de la resistencia eléctrica transepitelial en células Caco-2 irradiadas, tanto en presencia como en ausencia de células PBMC. Este método permite estudiar los efectos sinérgicos de la radiación y las células inmunitarias sobre la barrera de células epiteliales.

Protocolo

1. Configuración de irradiación

>Nota: La irradiación de las células Caco-2 se realizó en el departamento de radioterapia del Istituto di Ricovero e Cura a Carattere Scientifico (IRCCS) S. Maugeri (Pavía, Italia) con un acelerador lineal utilizado habitualmente para tratar diferentes tipos de cáncer.

1. Establezca la energía de rayos X de los fotones en un pico de 6 MV. El acelerador lineal funciona en un régimen de impulsos (tiempo entre dos impulsos consecutivos de aproximadamente 4 ms; duración de un solo pulso de aproximadamente 5 μs con una tasa de dosis de hasta 1 × ^10-3 Gy/p).
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Materiales

Lista de materiales utilizados en este artículo

Nombre	Empresa	Número de catálogo	Comentarios
Insertos de cultivo celular ThinCert de 6 pocillos para placas de pocillos múltiples	Greiner Bio-one	657610	equipo
placa de cultivo celular multipocillo, 6 pocillos	Greiner Bio-one	657160	plástico
placa de cultivo celular multipocillo, 24 pocillos	Greiner Bio-one	662160	plástico
RPMI 1640 sin L-Glutamina	Lonza	12-167F	Reactivos
Voltímetro/ohímetro milicel-ERS	Millipore	MERS 00001	equipo