Preparación de una vacuna adyuvante en nanoemulsión

Resumen

Fuente: Zhang, Z. et al., Preparación, características, toxicidad y evaluación de la eficacia de la vacuna nasal contra tumores de nanoemulsión autoensamblada in vitro e in vivo.J. Vis. Exp. (2022)

Este video muestra la producción de vacunas tumorales con nanoemulsión. Los depósitos estables de los depósitos de petróleo que transportan péptidos sintéticos y adyuvantes se producen mediante nanoemulsión de baja energía, lo que ofrece una gran promesa para la inmunoterapia tumoral.

Protocolo

1. Preparación del I-OVA NE

1. Mezcle 1 mg de monofosforilo lípido A (MPLA) con 100 μL de dimetilsulfóxido (DMSO), vórtice durante 5 min, y deje reposar durante 4 h a temperatura ambiente (RT) para que se disuelva por completo.
2. Añadir Tween 80 e IKVAV-OVA_257-264 (I-OVA) cuantitativamente y mezclar.
   nota: Tween 80 e I-OVA se mezclaron en una proporción de masa de 25:1.
3. Agregue escualeno a la mezcla preparada en el paso 1.2 (7:3, Smix: escualeno).
4. Añadir 100 μL de solución de MPLA (10 mg/mL) a la mezcla preparada en el paso 1.3.
5. Prepare la vacuna de nanoemulsión utilizando métodos de emulsificación de baja energía: agregue la solución mezclada a las gotas de agua en aproximadamente el 70% del volumen total y agite suavemente para obtener una mezcla transparente y de fácil fluidez><. nota: El control BNE (emulsión en blanco) se preparó por el mismo método, sustituyendo el agua por I-OVA.

Materiales

Lista de materiales utilizados en este artículo

Nombre	Empresa	Número de catálogo	Comentarios
MPLA	Invivogen Lit. Co.	tlrl-mpla
OVA257–264	Shanghái Botai Biotecnología Co., Ltd.	Na
Conjugación peptídica sintética (I-OVA) de IKVAV-PA	Shanghái Botai Biotecnología Co., Ltd.	Na