Inyección intravítrea para el establecimiento de modelos Enfermedades Oculares

Resumen

Inyección intravítrea es una técnica ampliamente utilizada en la investigación de las ciencias visuales de enfermedades oculares o en la aplicación directa del tratamiento local. Este vídeo demuestra un protocolo de inyección intravítrea con una jeringa de 1 ml con una pipeta de vidrio. Consejos útiles acerca de cómo evitar una hemorragia masiva y daños en el objetivo se les da.

Resumen

Inyección intravítrea es una técnica ampliamente utilizada en la investigación de las ciencias visuales. Se puede utilizar para establecer modelos animales con enfermedades oculares o en la aplicación directa del tratamiento local. Este video presenta el uso de herramientas sencillas y de bajo costo para finalizar el procedimiento de inyección intravítrea. El uso de una jeringa de 1 ml, en lugar de una jeringa hemilton, se utiliza. Consejos prácticos sobre cómo hacer que las agujas de inyección apropiada utilizando pipetas de vidrio con la punta perfecta, y cómo conectar fácilmente la aguja de la jeringa con la pipeta de vidrio bien juntos, se les da.

Para llevar a cabo una inyección intravítrea bien, hay tres aspectos a tener en cuenta: 1) el lugar de inyección no debe alterar la estructura de la retina, 2) hemorragia se debe evitar para reducir el riesgo de infección, 3) las lentes deben ser virgen para evitar la catarata traumática. En resumen, el punto más importante es reducir la interrupción de la estructura ocular normal. Para evitar la interrupción de la retina, la región nasal superior de los ojos de rata fue elegido. Además, el punto de punción de la aguja estaba en el par plana, que era de 1,5 mm de la región del limbo del ojo de la rata. Una pequeña cantidad de vítreo se empuja suavemente a través del orificio de punción para reducir la presión intraocular antes de la inyección. Con el ángulo de 45 ° de la inyección, es menos probable que cause catarata traumática en el ojo de rata, lo que evita las complicaciones relacionadas con la influencia de factores y lenticular. En esta operación, no hubo corte de la conjuntiva y el músculo ocular, sin sangrado. Con una lesión rápida y de menor importancia, una inyección intravítrea de éxito se puede hacer en cuestión de minutos.

La inyección de conjunto descritos en este protocolo en particular es específico para inyección intravítrea. Sin embargo, los métodos y materiales presentados aquí también se puede utilizar para los procedimientos de inyección en la administración de fármacos en el cerebro, la médula espinal y otros órganos en mamíferos pequeños.

Protocolo

1. Prepare las pipetas de vidrio con extractor de pipetas, se conecta a una jeringa de 1 ml, y sellar la conexión con parafilm. Retirar 2 ml de solución en la punta de las pipetas y prepararse para la inyección.
2. Anestesiar la rata por vía intra-peritoneal de ketamina (80mg/kg) y xilazina (8mg/kg) (relación de volumen de 2:1).
3. Aplique una gota de 0,5% Alcaine a los ojos de rata como anestésicos tópicos antes de la inyección intravítrea.
4. Posición de la rata y exponer la región nasal superior del ojo.
5. Use una aguja de calibre 30 para perforar la esclera nasal superior, a nivel de la plana par. Evite tocar los músculos oculares y los vasos.
6. Dar la presión globo ocular leve a deshacerse de una pequeña cantidad de vítreo a través del orificio de punción de la cámara posterior.
7. Inserte la punta de la pipeta de vidrio a través del orificio de punción en un ángulo de 45 ° a través de la esclerótica en el cuerpo vítreo. Inyectan 2 ml de solución en la cámara posterior y mantener en su lugar durante unos pocos segundos, a continuación, retire con cuidado la aguja. Evite tocar la lente intraocular y los vasos.
8. Después de la inyección intravítrea, aplique ungüento oftálmico Tobrex en el ojo de rata para prevenir la infección.

Discusión

Inyección intravítrea bien es útil para establecer un modelo animal, así como el tratamiento intraocular directa. En primer lugar, sitio de la inyección no debe alterar la estructura de la retina. Sangrado en segundo lugar, se debe evitar para reducir el riesgo de infección. Tercera lente, debe ser virgen para evitar la catarata traumática. Lo más importante es reducir la interrupción de la estructura ocular normal.

Materiales

Lista de materiales utilizados en este artículo

Nombre	Empresa	Número de catálogo	Comentarios
Microscopio operatorio	Olympus Corporation	OME
Pipetas de vidrio	World Precision Instruments, Inc.
Extractor de pipetas	David Kopf Instruments
Jeringas de 1 ml			de un solo uso
Agujas de 30G			de un solo uso
Ketamina	Aldasan		anestésico
Xilazina	Aldasan		anestésico
Alcaine	Alcon		clorhidrato de proparacaína al 0,5 %
Tobrex	Alcon		ungüento, tobramicina al 3 %.