Inducir una lesión traumática en un corte de cerebro usando un dispositivo de tubo de choque

Resumen

Fuente: Campos-Pires, R., et al. Un novedoso modelo in vitro de lesión cerebral traumática por explosión. J. Vis. Exp. (2018)

En este video, se utiliza un dispositivo de tubo de choque para generar una onda de choque rompiendo un diafragma de polímero a través de una presurización controlada. La onda de choque impacta en los cortes de cerebro contenidos en una bolsa asegurada, induciendo lesiones traumáticas en el corte de cerebro.

Protocolo

Todos los procedimientos que involucran modelos animales han sido revisados por el comité institucional local de cuidado de animales y la junta de revisión veterinaria de JoVE.

>1. Preparación y cultivo de cortes organotípicos del hipocampo

NOTA: Este protocolo permite la producción de cortes organotípicos del hipocampo. Idealmente, no se deben sacrificar y diseccionar más de tres animales en una sesión para garantizar que cada paso se realice rápidamente y para evitar comprometer la calidad de las rebanadas. Utilice una técnica aséptica en todo momento.

1. Asegúrese de ....

Resultados

Figura 1: Esquema del dispositivo de tubo de choque con el marco del soporte de la bolsa estéril. (A). El tubo de choque es un tubo de acero inoxidable de 3,8 m de largo hecho de tres secciones de 1,22 m de largo, conectadas por juntas y bridas, con un diámetro interno de 59 mm. (B) El recuadro muestra el conjunto de doble recámara. Uno o dos diafragmas de Mylar se pueden sujetar en el conjunto con u.......

Materiales

Lista de materiales utilizados en este artículo

Nombre	Empresa	Número de catálogo	Comentarios
Solución salina equilibrada de Geys	Sigma Reino Unido	G9779
D-glucosa	Sigma Reino Unido	G8270
Antibiótico/antimicótico	Sigma Reino Unido	A5955
Mínimo esencial medio Águila	Sigma Reino Unido	M4655
Solución salina equilibrada de Hanks	Sigma Reino Unido	H9269
Suero de caballo	Sigma Reino Unido	H1138
L-glutamina	Sigma Reino Unido	G7513
HEPES	VWR Prolabo, Bélgica	441476L
hidróxido sódico	Sigma Reino Unido	S-0945
Insertos para cultivo de tejidos	Millicell CM 30 mm baja altura Millipore	PICM ORG 50
Placas de 6 pocillos	NUNC, Dinamarca	140675
Yoduro de propidio	Sigma Reino Unido	P4864
Bolsas estériles de polietileno - Bolsas de muestras estériles Twirl'em	Marca Pescadora	01-002-30
Tubo de llenado Portex Avon Kwill de 5" (127 mm)	Suministros médicos Smiths	E910
Microscopio de epifluorescencia	NIKON Eclipse 80i, Reino Unido
Objetivo del microscopio	Nikon Plan UW magn. 2x, NA 0.06, WC 7.5 mm
Filtro de microscopio	Nikon G-2B (emisión de paso largo)
Película aislante eléctrica de Mylar, 304 mm x 200 mm x 0,023 mm	Componentes RS Reino Unido	785-0782
Transductor de presión	Dytran Instrumentos, Inc.	2300V1
Picadora de pañuelos	Mickle Laboratory Engineering Co., Guildford, Surrey, Reino Unido.	Picadora de pañuelos Mcllwain
Elastómero de silicona	Dow Corning, Estados Unidos	Sylgard 184