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Administración intranasal de células madre mesenquimales en un modelo de ratón de lesión cerebral traumática

June 17th, 2025

In This Article

Abstract

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Fuente: Shahror, R. A. et. al., Seguimiento de células madre mesenquimales marcadas con óxido de hierro superparamagnético mediante resonancia magnética después de la administración intranasal en un modelo murino de lesión cerebral traumática. J. Vis. Exp. (2019)

Este video muestra la administración intranasal de células madre mesenquimales (MSC) en un modelo de ratón. Las MSC se absorben en el tejido nasal, migran al cerebro a través de señales de citoquinas y secretan factores neurotróficos en el sitio de la lesión, ofreciendo un potencial neuroterapéutico para la reparación neuronal.

Protocol

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Todos los procedimientos que involucran modelos animales han sido revisados por el comité de cuidado animal institucional local y la junta de revisión veterinaria JoVE.

1. Etiquetado de células madre mesenquimales (MSC) con nanopartículas de óxido de hierro superparamagnético (SPIO)

  1. Para etiquetar MSC con SPIO, agregue 6 ml de medios de etiquetado (25 μg / ml de SPIO en el medio Eagle modificado (DMEM) de Dulbecco sin suero fetal bovino (FBS)) a un matraz T75 que contenga MSC (80% de confluencia).
  2. Incube las células con el medio de marcado en una incubadora de CO2 (37 °C, 5% CO2 ) sin agitar. Después de 24 h, retire suavement....

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Results

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Figura 1: Diagrama de flujo esquemático del protocolo y confirmación in vitro de la adopción de SPIO por parte de las MSC. (A) Las MSC se incubaron con SPIO durante 24 horas para su etiquetado. Luego, las MSC marcadas se administraron en un modelo de rató.......

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Materials

List of materials used in this article
NameCompanyCatalog NumberComments
Suministros de cultivo celular (plásticos)ThermoFisher ScientificVaríaReemplazable con cualquier fuente
Cuchilla de micrótomo desechableVWR95057-832
D-MEM/F-12 (1X) con GlutaMAXGIBCO10565-018
Medio de inclusión para muestras de tejido congelado (O. C. T.)Sakura Finetek4583
Suero fetal bovino (FBS)GIBCO12662-029
Microscopio de campo salvaje de fluorescenciaOlympusOlympus BX43
Fórcepsde ciencia fina11293-00Cirugía
Gentamicina (10 mg / ml)GIBCO15710-064
Cortadora de cabelloPet ClubPC-400
Dispositivo para contusión por traumatismo craneoencefálicoSistemas de precisión e instrumentaciónModelo TBI-0310
Hialuronidasa de testículos bovinosMilliporeSigmaH3506
Ketamina (Ketavet)Pfizer778-551
RatonesNational Laboratory Animal Center, TaiwánC57BL6Cepa de ratones de tipo salvaje utilizada en el estudio
MicrodrillNakanishiNE50Combine with Burrs para generar la ventana ósea
MicrotomoLeicaRM2265
Mouse (C57BL/6) células madre mesenquimalesGIBCOS1502-100
Escáner de resonancia magnéticaBruker Biospec
Fosfato tampón salino (PBS)Corning Cellgro/ThermoFisher21-031-CV
Povidona yodada 7.5%Producto Purdue L.P. Scrub quirúrgico
TijeraFine Science Tools14084-08Cirugía
Marco estereotáxicoKopf InstrumentsModelo 900
Nanopartículas de óxido de hierro superparamagnético (SPIO)BioPALMolday ION EverGreen, CL-50Q02-6A-51 Etiquetado decélulas madre para seguimiento in vivo mediante resonancia magnética
Sutura monofilamentoEthiconG697Temporizador de sutura
Wisewind Reemplazable con cualquier fuente
TrypLEGIBCO12604-013
Xilacina (Rompun)BayerQN05 cm92
Herramientas

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Intranasal DeliveryMesenchymal Stem CellsTraumatic Brain InjuryMouse ModelHyaluronidase TreatmentMSC MigrationNeurotrophic FactorsCytokine SignalsNasal AbsorptionBrain Injury Site

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