Artículo de método

Una técnica simplificada para fabricar un modelo de lesión isquémica

DOI:

10.3791/3341

2 de mayo de 2012

En este artículo

Resumen

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Hemos desarrollado una técnica mínimamente invasiva para crear un conejo isquémico modelo de herida del oído mediante la división de la arteria central y los nervios y el paquete vasculonervioso del cráneo. Un túnel subcutáneo y luego corta todos los tejidos subcutáneos. Este procedimiento provoca la interrupción mínima de la piel y puede usarse de manera segura en animales diabéticos.

Resumen

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Uno de los principales obstáculos en la investigación actual herida diabética es la falta de un modelo de lesión isquémica que pueden usarse de manera segura en animales diabéticos. Los fármacos que funcionan bien en no isquémicas heridas pueden no funcionar en humanos, porque las heridas diabéticas vasculopatía es un factor importante que impide la curación de estas heridas. Hemos publicado un artículo en 2007 que describe un modelo de oreja de conejo lesión isquémica creado por una técnica quirúrgica mínimamente invasiva. Desde entonces, hemos simplificado aún más el procedimiento para facilitar la operación. En una oreja, tres pequeñas incisiones cutáneas se realizaron en los pedículos vasculares, de 1-2 cm de la base de la oreja. La arteria central y se ligó con corte a lo largo del nervio. El paquete del cráneo entero se cortan y se ligan, dejando sólo la rama caudal intacto. Una circunferencia túnel subcutáneo se realizó a través de las incisiones, para cortar el tejido subcutáneo, músculos, nervios y vasos pequeños. La otra oreja se utilizó como control no-isquémico. Cuatro heridas fueron hechas en la parte ventral of cada oído. Esta técnica produce 4 heridas isquémicas y no isquémicas 4 heridas en un animal de comparaciones por pares. Después de la cirugía, el oído isquémico era fresca y cianótica, y mostró movimiento reducido y una falta de pulso en la arteria de la oreja. Temperatura de la piel de la oreja isquémica fue 1.10 ° C más baja que en el oído normal y esta diferencia se mantuvo durante más de un mes. Oído tejidos de alta energía el contenido de fosfato fueron más bajos en el oído isquémica que el oído de control. Veces la cicatrización de heridas eran más largos en el oído isquémica que en el oído no-isquémico cuando el tratamiento se utilizó la misma. La técnica ha sido utilizada en más de 80 conejos en los que 23 eran diabéticos (tiempo de la diabetes que van desde 2 semanas a 2 años). No conejo solo se ha desarrollado complicaciones quirúrgicas tales como sangrado, infección o ruptura de las incisiones en la piel. El modelo tiene muchas ventajas, como la perturbación poco de piel, más tiempo isquémica, y una mayor tasa de éxito, en comparación con muchos otros modelos. CA ITn utilizarse de manera segura en animales con resistencia reducida, y también se puede modificar para cumplir diversos requisitos de ensayo.

Protocolo

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1. Bases anatómicas

La oreja de conejo ha sido un material de estudio privilegiado para el cuidado de heridas desde principios del siglo 20. El oído es suministrada por tres haces vasculares (central, craneal y caudal), el núcleo central es el más grande, mientras que los buques en los paquetes craneal y caudal varían en tamaño. Ocasionalmente, la arteria caudal puede estar ausente. 1 Todas estas embarcaciones son fácilmente identificados en la cara dorsal después de la oreja se afeita (fig. 1). En el lado ventral, la piel distal no recibe suministro de sangre de los vasos proximales. Los tres paquetes....

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Discusión

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La diabetes afecta a 23,6 millones de personas en los EE.UU., 2,3 y 15-20% de estos pacientes desarrollan úlceras del pie en su vida, 4,5, a un costo anual de tratamiento de más de $ 25 mil millones. 3,6 Sin embargo, incluso la mejor información disponible tratamientos de lograr sólo una tasa de 50% de curación y esto es a menudo temporal, 7 con tasas de recurrencia tan altas como 66% en los diabéticos. 3,6 Cuando las úlceras se presentan en pacientes con diabetes, .......

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Divulgaciones

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No hay conflicto de intereses financieros implicados en este estudio.

Agradecimientos

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Este estudio fue apoyado en parte por subvenciones del NIH 1RO1DK74566 y 1RO1AM52984. Los autores desean agradecer a la Sra. Jacqueline McCarty en la CRR, por su ayuda durante la cirugía, los Dres. Jianpu Wang y Sarojini Harshini por su ayuda en el cuidado postoperatorio de la cirugía y algunos conejos, el Dr. Wan Rong, por su trabajo histología, y la Sra. Li Ming de sus medidas por HPLC de fosfatos de alta energía.

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Materiales

Para el control durante la cirugía

  1. Una almohadilla térmica para mantener la temperatura normal.
  2. Un monitor de oxígeno transcutáneo.
  3. Un monitor de temperatura.

Para la cirugía

  1. Un cuchillo # 3 # 15 con la cuchilla.
  2. Dos pares de pinzas (una para la piel y otra para otros tejidos blandos).
  3. 2-3 pares de pinzas pequeñas.
  4. Uno o dos pares de tijeras micro (para cortar los tejidos).
  5. Un par de pequeñas tijeras (para cortar suturas).
  6. El titular de una aguja.
  7. Un par de golpes de acero inoxidable (para la fabricación de las heridas).

Referencias

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  1. Ninomiya, H. The vascular bed in the rabbit ear: microangiography and scanning electron microscopy of vascular corrosion casts. Anat. Histol. Embryol. 29, 301-305 (2000).
  2. American Diabetes Association: Diabetes statistics. , American Diabetes Association. Available from: http://www.diabetes.org/diabetes-basic....

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