Determinación rápida del umbral nociceptivo térmico en ratas diabéticas

Resumen

A continuación, describimos un procedimiento rápido fiable y sencillo para determinar la temperatura más baja en la que las ratas o ratones muestran un comportamiento nocifensive, Es decir, El Umbral nociceptivo térmica (TNT). Este método se aplica un estímulo térmico aumentando lentamente permitiendo una estimación precisa y reproducible de TNTS con un mínimo, en su caso, la tensión a los animales.

Resumen

La neuropatía diabética dolorosa (PDN) se caracteriza por la hiperalgesia, es decir, mayor sensibilidad a los estímulos nocivos, y la alodinia, es decir, hipersensibilidad a estímulos inocuos normalmente ^1. Hiperalgesia y alodinia se han estudiado en muchos diferentes modelos de roedores de la diabetes mellitus tipo ^2. Sin embargo, según lo declarado por Bölcskei et al, la determinación de "dolor" en modelos animales es un reto debido a su naturaleza subjetiva ^3. Por otra parte, los métodos tradicionales utilizados para determinar las respuestas de comportamiento a los estímulos térmicos nocivos por lo general carecen de reproducibilidad y la sensibilidad farmacológica ^3. Por ejemplo, utilizando el método de la placa caliente de Ankier ^4, estremecerse, la retirada y / o de cualquiera de lamer traseros y / o patas delanteras se cuantifica como los reflejos en las latencias de constantes estímulos térmicos de alta (52-55 ° C). Sin embargo, los animales que son hiperalgésico al estímulo térmico no reproducible muestran diferencias en la reflex latencias que se utilicen los umbrales de temperaturas ^supra-3,5. Como el método descrito recientemente de Bölcskei et al. ^6, los procedimientos descritos aquí permite la determinación rápida, sensible y reproducible de los umbrales térmicos nociceptivos (TNTS) en ratones y ratas. El método utiliza estímulo aumentando lentamente térmico aplicado principalmente a la piel de la superficie de ratón / rata plantar. El método es especialmente sensible para estudiar la lucha contra la nocicepción durante los estados hiperalgésicas como PDN. Los procedimientos descritos abajo se basan en los publicados en detalle por Almási et al ⁵ y Bölcskei et al ^3. Los procedimientos aquí descritos han sido aprobados el Cuidado de Animales de Laboratorio y el empleo (LACUC), Wright State University.

Protocolo

TNTS de ratones y ratas se determinan mediante el incremento de la placa caliente analgesia metros [iHPAM, CITI Inc. Ciencias de la Vida (Woodland Hills, CA)]. El equipo consta de varios componentes: una placa de aluminio (10 x 20 cm) con el sistema de calefacción por debajo y una cámara de observación por encima de plexiglás, una unidad de control de calor, el software de adquisición de datos (serie CITI Parte # Soft 8), una PC (personal ordenador) y un pedal de arranque a control remoto, detener o reiniciar el control de la unidad. El sistema de calefacción también permite el inicio / parada / reposición del proceso de calentamiento de forma manual a través de un t....

Discusión

Al igual que en la prueba de la placa clásico caliente para cuantificar la hiperalgesia térmica ^4,13, el ensayo de la nocicepción aquí descrito permite una manera rápida y fiable para cuantificar el comportamiento nocifensive en ratas y ratones. Sin embargo, contrariamente a prueba clásica, el incremento de la placa caliente método es no invasivo y prácticamente libre de estrés. Aunque algunos frenar es necesario realizar la prueba (es decir, el animal debe estar en la cámara de observación), las rat.......

Materiales

Lista de materiales utilizados en este artículo

Nombre	Empresa	Número de catálogo	Comentarios
Nombre	Empresa	Número de catálogo
Incremento de la placa caliente Analgesia Meter	CITI Inc. Ciencias de la Vida	Parte # PE34
Serie suave 8	CITI Inc. Ciencias de la Vida	Parte # Series8
Estreptozotocina	Calbiochem	572201