Artículo de método

Intraoperatoria detección de endometriosis sutil: un nuevo paradigma para la detección y tratamiento del dolor pélvico asociado con la pérdida de la integridad Peritoneal

DOI:

10.3791/4313

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21 de diciembre de 2012

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1Department of Obstetrics and Gynecology, Division of Reproductive Endocrinology and Infertility, Greenville Hospital System, 2Department of Pathology, Duke University Health System, 3Department of Obstetrics and Gynecology, Division of Reproductive Endocrinology and Infertility, Duke University

En este artículo

Resumen

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La pérdida de integridad peritoneal proporciona un nuevo paradigma para entender y tratar el dolor pélvico crónico en mujeres con formas leves de endometriosis y puede ser fácilmente detectado usando la instilación intraoperatoria de colorante en el momento de la laparoscopia.

Resumen

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La endometriosis es una enfermedad común que afecta a 40 a 70% de mujeres en edad reproductiva con dolor pélvico crónico (CPP) y / o infertilidad. El propósito de este estudio fue demostrar el uso de un colorante azul (azul de metileno) para teñir las superficies peritoneales durante la laparoscopia (L / S) para detectar la pérdida de la integridad peritoneal en pacientes con dolor pélvico y sospecha de endometriosis. Cuarenta mujeres con DPC y 5 mujeres sin dolor fueron evaluados en este estudio piloto. Durante L / S, colorante concentrado se pulveriza sobre las superficies peritoneales, entonces aspirado y se enjuagaron con solución de Ringer con lactato. Las áreas de absorción de colorante localizado fueron evaluados para la presencia de visibles lesiones de endometriosis. Zonas de coloración intensa peritoneal se resecaron y se fijaron algunos en 2,5% glutaraldehído tamponado y se examinaron por microscopía electrónica de barrido (SEM). La absorción de colorante azul era más común en las mujeres con endometriosis y dolor pélvico crónico que en los controles (85% vs 40%). La resección de la stai azuláreas ned reveló endometriosis mediante SEM y pérdida de peritoneal contacto célula-célula en comparación con el normal, que no mancha y peritoneo. Afectada peritoneo se asoció con implantes endometriales visibles en la mayoría pero no todos los pacientes. Alivio del dolor subjetivo fue reportado en 80% de los sujetos. En base a microscopía electrónica de barrido, llegamos a la conclusión de que las células endometriales se extienden mucho más allá de los implantes visibles de endometriosis y parecen alterar el mesotelio subyacente. Lesiones sutiles de la endometriosis pueden ser la causa del dolor pélvico por la ruptura de la integridad peritoneal, permitiendo que la sangre menstrual o la ovulación y el dolor asociado a factores subyacentes acceso nervios sensoriales. La resección completa del peritoneo afectada puede proporcionar un mejor tratamiento a largo plazo para la endometriosis y CPP. Esta sencilla técnica parece mejorar la detección de endometriosis sutil invisible o cerca de las mujeres con resultados visuales CPP y mínima en L / S y puede servir para elevar la precisión diagnóstica para la endometriosisen la laparoscopia.

Protocolo

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1. Selección de pacientes

  1. Las mujeres con dolor pélvico crónico someterse a una historia y examen físico.
  2. La localización del dolor, el tiempo en lo que respecta al ciclo menstrual, los síntomas asociados, incluyendo quejas del intestino irritable o quejas vejiga se observan y registran.
  3. Las mujeres sometidas a laparoscopia se consintió para la resección posible de la endometriosis y el uso de sus tejidos para investigación.

2. Las técnicas laparoscópicas

  1. La laparoscopia se realiza utilizando técnicas estándar a través de un puerto umbilical 5 mm y puertos adicionales 5 mm en la parte inferior del abdomen.
  2. La inspección cuidadosa de la pelvis se realiza para correlacionar las conclusiones de la endometriosis con la localización pre-operatorio del dolor, como se indica por el paciente.
  3. Colorante azul de metileno se mezcla 1:200 con solución salina estéril y se inyecta en las superficies pélvico usando una aguja de aspiración.
  4. Riego de succión se realiza para eliminar el exceso deteñir y lavar las superficies peritoneales.
  5. La pelvis es inspeccionado y las zonas de absorción de colorante azul se registran.
  6. Cuando sea posible, la resección de las áreas afectadas de peritoneo se realiza.

3. Microscopía Electrónica de Barrido

  1. Secciones peritoneales se sutura a una placa estéril Telfa para aplanar la muestra y mantener la orientación (lado hasta intraperitoneal) y se colocaron en fijador de glutaraldehído (Sigma, St. Louis, MO) para SEM.
  2. Las muestras fueron orientadas y post fija en 1% de tetróxido de osmio tamponado durante 1 hora y se deshidrataron con concentraciones de etanol secuenciales.
  3. Las muestras se secaron utilizando dióxido de carbono líquido y se montaron en aluminio de barrido talones de microscopio electrónico con pasta de plata coloidal y pulverización catódica recubierto de oro: aleación de platino con un espesor de 20 nM.
  4. Microscopía electrónica de barrido se realizó con un modelo JEOL JSM-6400 microscopía de barrido y fotomicrografías obtenido a partir de 12 áreas aleatorias.

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Resultados

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Un ejemplo de endometriosis sutil que era casi invisible se muestra en la Figura 1A. Antes de la aplicación de tinte azul una superficie irregular de peritoneo punteado fue apreciada con la ayuda de la reflexión de la luz laparoscópica. En la Figura 1B, la aparición de esta misma área después de la tinción muestra el mismo patrón irregular sobre la vejiga (Figura 1B). Una vez que esta porción del peritoneo fue resecado (fig. 1C) Han sido sometidos a SEM...

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Discusión

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El dolor pélvico crónico en las mujeres es un problema costoso y poco comprendida 1. La dismenorrea es la forma más común de dolor pélvico que afecta al 60% de las mujeres 2 y 72% de los adolescentes 3. La endometriosis es una enfermedad inflamatoria que afecta al 5% de las mujeres normales, pero está presente en hasta el 70% de las mujeres con dolor pélvico. Aunque la endometriosis contribuye al dolor pélvico crónico (CPP), un mecanismo por el cual el dolor lesiones causa sigue siendo i...

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Divulgaciones

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No hay conflictos de interés declarado.

Agradecimientos

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Nos gustaría agradecer la excelente ayuda técnica de Angela Houwing y ayudar con la recolección de datos de Greta Bushnell.

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Materiales

Lista de materiales utilizados en este artículo
NombreEmpresaNúmero de catálogoComentarios
Nombre del reactivo Empresa Número de catálogo Comentarios (opcional)
Azul de metileno Reactivo americano NDC0517-0310-110 Mezclado 1:200 en solución salina

Referencias

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