Diluido-skull técnica de ventana cortical para<em&gt; En Vivo</em&gt; Tomografía de Coherencia Óptica de imagen

Resumen

Se presenta un método de creación de una ventana adelgazada cráneo cortical (TSCW) en un modelo de ratón para In vivo Imágenes de OCT de la corteza cerebral.

Resumen

Tomografía de Coherencia Óptica (OCT) es una técnica de imagen biomédica con alta resolución espacial y temporal. Con su enfoque mínimamente invasivo octubre se ha utilizado ampliamente en oftalmología, dermatología, gastroenterología y ^1-3. Usando una ventana adelgazado-skull cortical (TSCW), empleamos dominio espectral OCT (SD-OCT) modalidad como una herramienta para la imagen de la corteza en vivo. Comúnmente, un cráneo abierto-se ha utilizado para neuroimagen, ya que proporciona más versatilidad, sin embargo, un enfoque TSCW es menos invasiva y es un medio eficaz para la formación de imágenes a largo plazo en los estudios de neuropatología. Aquí, se presenta un método de creación de un TSCW en un modelo de ratón para la formación de imágenes in vivo octubre de la corteza cerebral.

Introducción

Desde su introducción en la década de 1990, octubre se ha utilizado ampliamente para formación de imágenes biológicas de la estructura tisular y la función ^2. Octubre genera imágenes transversales mediante la medición de retardo del eco de tiempo de ⁴ luz dispersada por la aplicación de fuente bajo la luz coherencia con un interferómetro de Michelson fibra óptica ^2,4. SD-OCT, también conocido como dominio de Fourier OCT (OCT-DF), fue introducido por primera vez en 1995 ^5, y ofrece una modalidad de imagen superior en comparación con el tradicional dominio de tiempo OCT (OCT-DT). En SD-octubre, el brazo de referencia se manti....

Protocolo

1. Preparación quirúrgica

1. Ratones hembra CD 1 entre las edades de 6-8 semanas se usaron en nuestros experimentos.
2. Se anestesia el ratón con una inyección intraperitoneal de una combinación de ketamina y xilazina (80 mg / kg ketamine/10 mg / kg de xilazina). Coloque el ratón sobre una almohadilla homeotérmico para garantizar una temperatura corporal óptima a ~ 37 ° C. Supervisar continuamente el nivel de anestesia por probar reflejos animal (por ejemplo, pellizcar pie con fórceps romos) e inyectar más anestesia cuando sea necesario.
3. Lubricar ambos ojos con un ungüento de lágrima artificial. Elimine los pelos en el cuero cabellud....

Resultados

Después de crear una ventana adelgazada sobre la corteza cerebral de la vasculatura ahora debería ser más visualmente prominente (Figura 1) y permitirá una profundidad de imagen más profundo (hasta 1 mm). La corteza derecha se adelgaza a aproximadamente 55 micras, en comparación con un cráneo normal medido a 140 micras (figura 1) y proporciona una mayor claridad óptica. Además adelgazamiento a 10-15 micras es posible ¹¹ no obstante, es necesario que el uso de cubreobjetos de .......

Discusión

Proyección de imagen con OCT y un cráneo adelgazado-es una novela de neuroimagen técnica que sólo se ha investigado recientemente ^{15, 16.} En nuestros experimentos, hemos demostrado la viabilidad de la SD-OCT imágenes a través de un TSCW en un modelo de ratón in vivo. A partir de nuestros resultados, el cráneo se adelgaza a aproximadamente 55 micras y con la profundidad de penetración se obtiene en aproximadamente 1 mm con una resolución de imagen de 8 micras y 20 micras en la dirección axial y latera.......

Materiales

Lista de materiales utilizados en este artículo

Nombre	Empresa	Número de catálogo	Comentarios
Materiales	Empresa	Número de catálogo	Comentarios
La ketamina	Phoenix Pharmaceuticals	57319-542-02
Xilazina	Akorn, Inc.	139-236
Lágrimas artificiales Ungüento	Rugby	0536-6550-91
Nair	Church & Dwight Co., Inc.	4010130
Estéril Alcohol Prep Pad	Kendall Healthcare	6818
Aplicadores con punta de algodón	Fisherbrand	23-400-115
Betadine solución bastoncillo con hisopo	Purdue Productos	67618-153-01
Solución salina, 0,9%	Phoenix Pharmaceuticals	57319-555-08
Estereotáctica Frame	Stoelting
Alta velocidad Taladro quirúrgico	Foredom		38.000 rpm
Carburo de fresa redonda	Stoelting		0,75 mm
Dura-Green Stones	Shofu		Shank: HP Forma: BA1
CompoMaster gruesa y pulidora CompoMaster	Shofu		Forma: Mini-Pt.
SpaceDrapes	Braintree Scientific, Inc.