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La angiogénesis en el pulmón de rata isquémico

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DOI:

10.3791/50217

8 de febrero de 2013

En este artículo

Resumen

El pulmón se perfundieron por tanto la arteria sistémica bronquial y las arterias pulmonares. En la mayoría de las patologías de pulmón, que es más pequeño de la vasculatura sistémica que muestra neovascularización robusto. La cesación del flujo sanguíneo pulmonar promueve la angiogénesis bronquial a paso ligero. Ofrecemos detalles quirúrgicos de la inducción de isquemia arteria pulmonar que promueve la neovascularización bronquial.

Resumen

El pulmón adulto se perfunde por tanto la arteria sistémica bronquial y el retorno venoso todo fluye a través de las arterias pulmonares. En la mayoría de las patologías de pulmón, que es más pequeño de la vasculatura sistémica que responde a una necesidad de mejorar la perfusión pulmonar y muestra neovascularización robusto. Isquemia vascular pulmonar inducido por la obstrucción de la arteria pulmonar se ha demostrado que resulta en una rápida angiogénesis arterial sistémica en el hombre, así como en varios modelos animales. Aunque la evaluación histológica de la evolución temporal de la proliferación de la arteria bronquial en ratas se ha descrito cuidadosamente por Weibel 1, los mecanismos responsables de este crecimiento organizado de nuevos vasos no son claras. Ofrecemos detalles quirúrgicos de la inducción de isquemia arteria pulmonar en la rata que lleva a la neovascularización bronquial. La cuantificación de la extensión de la angiogénesis constituye un desafío adicional debido a la presencia de los dos lechos vasculares en el pulmón. Métodospara determinar la angiogénesis funcional basado en inyecciones de microesferas marcadas se proporcionan.

Introducción

Angiogénesis sistémica en el pulmón está bien reconocida. En estados de enfermedad tales como el asma 2, fibrosis pulmonar intersticial 3, 4 cáncer y tromboembolismo pulmonar crónico 5, la vasculatura sistémica en y alrededor de los prolifera pulmonares e invade el parénquima pulmonar. Sin embargo, los modelos animales para el estudio de esta activación diferencial de la sistémico en lugar de la circulación pulmonar son pocos. Quizás el modelo más reproducible de la neovascularización sistémica en el pulmón del mamífero adulto es el que ocurre después de la inducción de isquemia crónica de la arteria pulmonar. La respuesta a la obstru....

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Protocolo

Todos los protocolos realizados en ratas han sido aprobados por el Cuidado de Animales Universidad Johns Hopkins y el empleo, y de conformidad con las directrices del NIH. Siempre que sea posible, el animal debe ser preparado quirúrgicamente en un área separada de la zona quirúrgica para minimizar la contaminación de la zona quirúrgica.

1. La anestesia / analgesia

  1. Rata lugar (ratas Sprague Dawley macho, 125-150 g; Harlan, Indianapolis, IN) en una cámara de inducción infundido con isoflurano 3%.
  2. Coloque rata anestesiada a bordo cirugía unido al cono de la nariz y el ventilador con 3% de anestésico isoflurano. Utilice u....

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Resultados

Reparto vascular: Resultados de los efectos de la isquemia arteria pulmonar izquierda en la rata se muestra en la Figura 1. Se muestra un reparto de metacrilato de la vasculatura bronquial y la vascularización extensa del árbol de las vías respiratorias izquierda 28 días después de LPAL. Para obtener este molde, la vasculatura sistémica se inyectó con una mezcla de metacrilato (rojo), retrógrada en la aorta descendente y de la tráquea se canuló y se inyecta con un material a base de silicona blanca. Est.......

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Discusión

La ligadura de la arteria pulmonar izquierda en todas las especies estudiadas conduce a la neovascularización robusto sistémica del pulmón isquémica. Hemos presentado los detalles de la técnica quirúrgica en un modelo de rata. Nuestros resultados vascular producido por fundición, histopatología, y en el etiquetado in vivo demuestran que las arterias bronquiales proliferan y perfundir el parénquima pulmonar. Por lo tanto, los mecanismos de la angiogénesis bronquial puede ser estudiada en un modelo anima.......

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Divulgaciones

No hay conflictos de interés declarado.

Agradecimientos

Reconocemos la labor del Dr. Adlah Sukkar, MD para ayudar con la colada del pulmón. Este trabajo ha sido financiado por el NHLBI, HL088005.

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Materiales

Lista de materiales utilizados en este artículo
NombreEmpresaNúmero de catálogoComentarios
Reactivos: Empresa
hidrocloruro de buprenorfina, Puralube Mayordomo Schein
bupivicaína APP Pharmaceuticals
Povidona Yodada bastoncillo con hisopo Dynarex Corporación
polipropileno tamaño de la sutura 6-0, 3/8 círculo inverso aguja de corte Myco Médico
PE20 tubo Becton Dickinson
15 micras fluoroesferas de poliestireno carmesí Invitrogen
1 ml vidrio de la jeringa Hamilton Hamilton Company
Equipamiento:
Genie Plus bomba de jeringa Kent Científico
Espectrofotómetro de Fluorescencia Digilab
Rodent Ventilator Modelo 683 Harvard Apparatus
Tabla 1. Tabla de reactivos y equipos específicos.

Referencias

  1. Weibel, E. R. Early stages in the development of collateral circulation to the lung in the rat. Circulation Research. 8, 353-376 (1960).
  2. Li, X., Wilson, J. W. Increased vascularity of the bronchial mucosa in mild asthma. Am. J. Respir. Crit. Ca....

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