Isquemia photothrombotic: Un modelo de lesión cortical fotoquímico mínimamente invasiva y reproducible de Estudios Carrera Ratón

Vivien Labat-gest; Simone Tomasi

doi:10.3791/50370

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Artículo de método

Isquemia photothrombotic: Un modelo de lesión cortical fotoquímico mínimamente invasiva y reproducible de Estudios Carrera Ratón

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DOI:

10.3791/50370

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9 de junio de 2013

Vivien Labat-gest¹^,²^,³ , Simone Tomasi²^,³^,⁴

¹Department of Neuroscience, University of Turin , ²Neuroscience Institute of Turin (NIT), University of Turin , ³Neuroscience Institute Cavalieri-Ottolenghi (NICO), University of Turin , ⁴Department of Anatomy, Pharmacology and Forensic Medicine, University of Turin

En este artículo

Resumen

Photothrombosis es una técnica rápida, mínimamente invasivo para la inducción de infarto pequeño y bien delimitado en áreas de interés de una manera altamente reproducible. Es especialmente adecuado para el estudio de las respuestas celulares y moleculares que subyacen a la plasticidad cerebral en ratones transgénicos.

Resumen

El modelo de carrera photothrombotic pretende inducir un daño isquémico dentro de un área cortical determinado a través de la foto-activación de un tinte sensible a la luz inyectada previamente. Después de la iluminación, el colorante se activa y produce oxígeno singlete que los componentes de daños de las membranas celulares endoteliales, con la agregación de plaquetas y la posterior formación de trombos, lo que finalmente determina la interrupción del flujo sanguíneo local. Este enfoque, propuesto inicialmente por Rosenblum y El-Sabban en 1977, fue mejorado más adelante por Watson en 1985 en cerebro de rata y establece la base del modelo actual. Además, el aumento de la disponibilidad de líneas de ratones transgénicos contribuyó a aumentar el interés en el modelo photothrombosis. En pocas palabras, un colorante fotosensible (Rosa de Bengala) se inyecta por vía intraperitoneal y entra en el torrente sanguíneo. Cuando está iluminado por una fuente de luz fría, el colorante se convierte en activa e induce daño endotelial con la activación plaquetaria y la trombosis, lo que resulta en localesla interrupción del flujo sanguíneo. La fuente de luz se puede aplicar en el cráneo intacto sin necesidad de craneotomía, que permite la orientación de cualquier área cortical de interés de una manera reproducible y no invasiva. El ratón se sutura y se deja despertar. La evaluación del daño isquémico se puede lograr rápidamente por cloruro de trifenil-tetrazolio o tinción con violeta de cresilo. Esta técnica produce infarto de pequeño tamaño y los límites bien delimitados, lo cual es muy ventajoso para la caracterización precisa celular o estudios funcionales. Además, es particularmente adecuado para el estudio de las respuestas celulares y moleculares que subyacen a la plasticidad cerebral en ratones transgénicos.

Introducción

A principios del siglo 21, el ictus isquémico es una enfermedad devastadora que representa la segunda causa de discapacidad a largo plazo ¹ y la segunda causa de mortalidad en todo el mundo, en los que accidentes cerebrovasculares ocuparon alrededor de 5,7 millones de muertes en 2004 ^2. A pesar de los muchos esfuerzos que se pusieron en, todavía no existe un tratamiento eficaz para mejorar la recuperación funcional después del accidente cerebrovascular. Los modelos animales de accidente cerebrovascular son ampliamente utilizados en el campo de la investigación del accidente cerebrovascular, ya que permiten el modelado de la fisiopatología del da....