Protocolo de examen clínico para detectar la tembladera atípica y clásica en ovejas

Resumen

Un protocolo clínico corto de la examinación se presenta para ayudar en la detección de tembladera clásica y anormal en ovejas y cabras.

Resumen

El diagnóstico de la tembladera, una encefalopatía espongiforme transmisible (ETE) de ovejas y cabras, se basa actualmente en la detección de proteínas priónicas asociadas a la enfermedad mediante pruebas post mortem. A menos que se monitorice activamente una muestra aleatoria de la población de ovejas o cabras para detectar la tembladera, la identificación de los casos de tembladera se basa en la notificación de sospechosos clínicos, que depende de la familiarización del individuo con la enfermedad y de la capacidad de reconocer los signos clínicos asociados con la tembladera. La tembladera puede no ser considerada en el diagnóstico diferencial de enfermedades neurológicas en pequeños rumiantes, particularmente en países con baja prevalencia de tembladera, o no reconocida si se presenta como forma no veruriginosa como la tembladera atípica. Para ayudar en la identificación de sospechosos clínicos, un protocolo corto de la examinación se presenta para evaluar la exhibición de muestras clínicas específicas asociadas a las formas pruríticas y no priuriticas de TSE en ovejas, que se podrían también aplicar a las cabras. Esto incluye la evaluación del comportamiento, la visión (mediante la prueba de la respuesta a la amenaza), el prurito (al probar la respuesta al rascado) y el movimiento (con y sin vendar los ojos). Esto puede conducir a un examen neurológico más detallado de la notificación de animales como sospechosos de tembladera. También podría utilizarse en estudios experimentales de ETE de ovejas o cabras para evaluar la progresión de la enfermedad o para identificar el punto final clínico.

Introducción

La tembladera es una encefalopatía espongiforme transmisible (ETE) de ovejas y cabras, que pertenece al grupo de trastornos por plegamiento incorrecto de proteínas, como la encefalopatía espongiforme bovina (EEB) en el ganado vacuno, la enfermedad de derroche crónico en los ciervos y la enfermedad de Creutzfeldt-Jakob en los seres humanos. El diagnóstico se realiza post mortem mediante la detección de la forma anormal de la proteína priónica, que es resistente a las proteinasas, generalmente en el cerebro. Se pueden distinguir dos formas principales de tembladera natural, que son epidemiológica, patológica y bioquímicamente diferentes: la tembladera clásica y la tembladera atípica. Además, una enfermedad neurológica con signos clínicos clásicos similares a la tembladera puede ser inducida en ovejas y cabras por infección experimental con el agente de la EEB^6,10-11. De hecho, la EEB natural se ha diagnosticado en cabras^3,17. El control de la tembladera clásica (y de la EEB en el ganado ovino si se produjo de forma natural) se ha logrado mediante la cría para la resistencia genética dirigida al gen de la proteína priónica, pero esto es más difícil para la tembladera atípica, que se cree que es una enfermedad esporádica y se ha diagnosticado en países considerados libres de tembladera clásica, por ejemplo, Nueva Zelanda⁷.

La tembladera es una enfermedad neurológica de ovejas y cabras adultas dando por resultado cambios en comportamiento, sensación, y movimiento, pero la enfermedad es lentamente progresiva, y las muestras clínicas no se reconocen a menudo porque el encargado animal o el cirujano veterinario pueden no ser familiares con las muestras clínicas, o la tembladera no se considera en absoluto en la diagnosis diferenciada de enfermedades neurológicas en pequeños rumiantes.

El protocolo de examen propuesto se diseñó para ayudar en el diagnóstico clínico de la tembladera con dos propósitos en mente: debe ser considerablemente breve para permitir la exploración de muchos animales en un corto período de tiempo, pero lo suficientemente específico como para permitir la detección de animales afectados por la tembladera, lo que se logra mediante la evaluación de la presencia de signos clínicos que se encuentran con frecuencia en los animales afectados por la tembladera. Este protocolo es una ligera modificación del utilizado para vigilar a las cabras en busca de signos de tembladera clásica¹¹ e incluye vendar los ojos al animal, lo que puede exacerbar los signos clínicos no asociados normalmente con la tembladera^9.

Protocolo

1. Evaluación de la postura

1. Evaluar la postura del animal mientras no está perturbado.
2. Los animales afectados por las EET pueden estar de pie con extremidades anchas, pueden parecer encorvados o pueden estar de pie con un carro de cabeza baja.

2. Evaluación del comportamiento

1. Estudiar el comportamiento del animal, cuando se deja solo, cuando se acerca y cuando se maneja.
2. Los animales afectados por las ETE pueden mostrar una alteración por estar separados de otras ovejas o no seguir inmediatamente a otras ovejas.
3. Cuando el animal se acerca, puede huir y colapsar, o se derrumba al suelo cuando se manipula. El circular compulsivo en el sentido de las agujas del reloj o en el sentido contrario a las agujas del reloj se puede observar en ovejas con tembladera atípica.

3. Pruebas de respuesta a la amenaza

1. Sostenga la cabeza del animal para probar la respuesta de amenaza: mueva la mano o varios dedos varias veces hacia cada ojo del animal para inducir una respuesta de parpadeo, pero tenga cuidado de no tocar ningún vello facial o crear cualquier turbulencia del aire que pueda hacer que el animal parpadee.
2. La respuesta de amenaza puede estar ausente en los animales afectados por la tembladera, en particular en las ovejas con tembladera atípica. Aunque la prueba de la respuesta de la amenaza sea la única prueba del nervio craneal usada como parte del protocolo, la inspección visual de la cara durante este procedimiento puede revelar otras muestras de déficits neurológicos no considerados normalmente en tembladera, e.g. parálisis facial. Si el animal no parpadea en respuesta a la amenaza es recomendable probar el reflejo palpebral tocando los párpados para asegurarse de que la incapacidad del animal para parpadear no es causada por parálisis facial.

4. Prueba de la respuesta de scratch

1. Asegúrese de que el animal esté tranquilo durante este procedimiento porque la prueba no se puede interpretar en un animal que lucha.
2. Áreas de rasguño de la espalda en las regiones torácica, lumbar y sacra, haciendo una pausa entre cada episodio de rascado.
3. Si el animal responde con movimientos rítmicos de la cabeza o del cuerpo, o se mueve o lame sus labios al rascarse un área en particular, repita la prueba de rasguño para confirmar la reproducibilidad de la respuesta al rasguño.
4. Una respuesta repetible se provoca generalmente en los animales que son pruríticos, que incluye generalmente ovejas con la tembladera clásica o cabras con la forma prurítica de tembladera, pero no hay generalmente ninguna respuesta en ovejas con tembladera anormal a menos que otras condiciones pruríticas de la piel o ectoparásitos estén presentes.

5. Comprobación de pérdida de lana y lesiones cutáneas

1. Inspeccione la piel.
2. El prurito debido a la tembladera generalmente causa pérdida de cabello, que puede estar en la encuesta, espalda, grupa, lado del pecho o abdomen debido al roce excesivo o rasguño donde la piel subyacente parece normal.
3. Las abrasiones pueden aparecer más tarde si el animal tiene la oportunidad de frotar objetos punzantes. Las heridas de la mordedura pueden aparecer, particularmente en los miembros, debido al mordisqueo excesivo de los miembros.

6. Puntuación condición corporal

1. Evaluar la condición corporal del animal palpando los procesos dorsales y transversales de las vértebras lumbares.
2. La tembladera puede causar una pérdida progresiva de la condición corporal donde los procesos transversales de las vértebras lumbares se pueden sentir fácilmente individualmente, y los extremos de los procesos aparecen agudos.

7. Vendar los ojos al animal

1. Cubra los ojos del animal con una capucha, que se puede hacer usando cualquier bolsa no vista donde se corte una esquina para permitir la respiración del animal.
2. Libere al animal solo si no hay problemas de seguridad y no hay riesgo de lesiones debido a un animal en pánico; de lo contrario, mantenga a las ovejas y estudie los movimientos de los animales mientras sigue teniendo el control del animal.
3. Vendarse los ojos puede exacerbar los signos de un sistema vestibular o disfunción cerebelosa, que puede ser oscurecida por la capacidad del animal para compensar a través de su visión. La pérdida de equilibrio, de incoordinación, o de dar vueltas se puede sacar, particularmente en ovejas de otra manera clínico unremarkable con tembladera anormal.

8. Evaluación del movimiento del animal

1. Estudia la marcha y los movimientos musculares del animal cuando se mueve libremente.
2. La incoordinación puede caracterizarse por movimientos de base ancha de las extremidades posteriores, saltando con ambas extremidades traseras, o balanceándose excesivamente en los cuartos traseros, lo que puede resultar en tropezar o sentarse brevemente.
3. La presencia de un temblor de cabeza es a menudo sutil cuando el animal no está perturbado, pero puede llegar a ser más notable durante o después de la finalización del examen clínico.

9. Interpretación

1. Considere la importancia de los hallazgos con respecto a la tembladera.
2. Aunque la presencia de signos individuales, como una respuesta repetible al rascado, temblor, comportamiento anormal, círculos, colapso de episodios, ataxia o una respuesta de amenaza ausente, puede tener varias causas, la aparición combinada de dos o más de estos signos es altamente sugestiva de tembladera en ovejas o cabras.

Resultados

Ovejas clínicamente sanas. Poll Dorset wether from a scrapie-free flock intracerebrally inoculated with bovine brain of New Zealand origin and examined at 49 months post inoculation. Esta oveja tiene una postura normal, se comporta normalmente, muestra una respuesta de amenaza normal (Figura 1), no reacciona a la prueba de rasguño, tiene un vellón intacto, y una muy buena condición corporal. Es clínicamente poco notable cuando se le vendan los ojos y no muestra signos de un trastorno del movimiento.

Ovejas con tembladera atípicas que presentan la forma no veruritaria de ETE en ovejas. Cheviot wether de una manada tembladera-libre intracerebrally inoculado con homogeneato del cerebro de un caso anormal del campo de la tembladera del mismo genotipo de la proteína del prión (AHQ/AHQ) y examinado en la inoculación del poste 36 meses. Esta oveja también tiene una postura normal, pero se comporta de manera diferente a las otras ovejas en la pluma y los círculos en el sentido de las agujas del reloj. No parpadea cuando se prueba la respuesta de amenaza. Rascarse no provoca ninguna respuesta, y no hay cambios en lana son evidentes, pero la condición del cuerpo es justo. Gira en el sentido de las agujas del reloj cuando tiene los ojos vendados(Figura 2)y pierde el equilibrio. La marcha es atáxica, y un temblor fino de la cabeza es visible.

Ovejas atípicas de la EEB que presentan con la forma prurítica de ETE en ovejas, que es clínico similar a la presentación clínica de ovejas tembladera-afectadas clásicas. Por esta razón, no se incluye un caso clásico de tembladera. Encuesta Dorset wether de un rebaño libre de tembladera intracerebrally inoculado con bovino atípico (tipo L) homogeneización cerebral DE LA EEB y examinado a los 50 meses después de la inoculación. Esta oveja se encuentra ligeramente encorvada, tiende a mantener las extremidades traseras de base ancha y cae al suelo cuando es atrapada. La respuesta de amenaza es débil. El rascado de varias áreas de la espalda provoca movimientos de la cabeza o los labios(Figura 3),y hay pérdida de lana con un traumatismo cutáneo menor en la encuesta. La condición corporal es buena. Cuando tiene los ojos vendados, es reacio a moverse y apoya su parte trasera en el obstáculo para mantener el equilibrio. La oveja es atáxica y muestra hipermetria del miembro anterior.

Figura 1. Pruebas de respuesta a la amenaza. El gesto amenazante hacia el ojo del animal induce una respuesta de parpadeo. Haga clic aquí para ver la imagen más grande.

Figura 2. Vendar los ojos. En el sentido de las agujas del reloj, se provocaba vendando los ojos a las ovejas con una capucha. Haga clic aquí para ver la imagen más grande.

Figura 3. Prueba de la respuesta de rasguño. Rascarse la espalda provoca lamerse los labios con movimientos laterales de la cabeza Haga clic aquí para ver la imagen más grande.

Discusión

La tembladera es una enfermedad incluida en la lista de la Organización Mundial de la Salud animal (OIE), que, en ausencia de una prueba ante mortem rápida y fiable, depende de la capacidad de los agricultores o veterinarios para reconocer los signos clínicos asociados con esta enfermedad. Sin embargo, la mayoría de los casos de tembladera, en particular los casos atípicos de tembladera, se encuentran actualmente mediante la vigilancia específica de las ETE, es decir, mediante el examen cerebral de pequeños rumiantes sujetos a sacrificio o animales muertos. La cría de ovejas para la resistencia a la tembladera clásica, que redujo el número de casos clásicos de tembladera, muy probablemente también redujo la conciencia de las personas para la enfermedad, de modo que se considera con menos frecuencia en el diagnóstico diferencial de trastornos neurológicos en ovejas. La tembladera atípica también tiene una baja prevalencia, con aproximadamente cinco casos en mataderos y ocho casos en ganado muerto por cada 10.000 examinados en Europa⁴. Además, el prurito, generalmente evidente como alopecia con o sin excoición, a menudo se considera un signo característico de la tembladera^13. Así, una enfermedad neurológica sin prurito concomitante según lo observado en la tembladera anormal¹² o la forma nonpruritic de tembladera caprina¹¹ puede no levantar la suspicacia de la tembladera.

Este protocolo de examen se diseñó para identificar signos clínicos de ET en ovejas mediante la evaluación de signos clínicos específicos asociados con diversos tipos de tembladera (tembladera atípica y clásica, esta última representada por una oveja inoculada con EEB atípica, que presentaba signos clásicos similares a la tembladera). En la tembladera clásica, el porcentaje de casos que mostraron una respuesta positiva al rasguño ("reflejo mordisqueo") varió de 50-77 en más de 100 ovejas estudiadas^5,8. Los trastornos del movimiento pueden observarse en hasta el 81% de los casos clásicos de tembladera basados en diversos estudios¹⁸. La incoordinación es también un signo importante en varios casos naturales de tembladera atípica, a menudo acompañados de cambios de comportamiento^1,pero los signos adicionales reportados tanto en ovejas con tembladera atípica infectadas natural como experimentalmente fueron alrededores y discapacidad visual^12,15,16,por lo que se incluye en el protocolo de examen el vendado de los ojos y la prueba de la respuesta a la amenaza. La puntuación de la condición corporal, por ejemplo utilizando un sistema de puntuación de 6 puntos¹⁴, permite la evaluación de la emaciación, que puede observarse en ovejas afectadas por la tembladera⁵. Aunque anteriormente se han propuesto criterios clínicos para ayudar en la detección de la tembladera en el ganado ovino^2,estos sólo se referían a la detección de la tembladera clásica y tenían en cuenta la historia clínica, que puede no estar disponible si los animales se presentan en un matadero.

El protocolo actual permite el cribado de muchos animales en busca de signos de tembladera en un corto período de tiempo. Además, el protocolo de examen se puede aplicar a estudios experimentales de tembladera en ovejas y cabras para controlar el inicio clínico, la progresión y el punto final. Sin embargo, no sustituye un examen físico y neurológico más detallado por un registro adecuado de los antecedentes clínicos, posiblemente seguido de pruebas diagnósticas auxiliares (examen de sangre y líquido cefalorraquídeo; técnicas de imagen más sofisticadas si procede), que pueden ser necesarias posteriormente para descartar otras afecciones en pequeños rumiantes que presenten signos similares. , como enfermedades neurológicas metabólicas o inflamatorias, abscesos cerebrales o tumores.

Aunque un examen clínico es generalmente menos sensible a la detección de animales afectados por las ETE que las pruebas post mortem basadas en la detección de la proteína priónica^2,11,especialmente en una fase temprana del período de incubación, este es actualmente el único método de detección en animales vivos y más pertinente para aquellos países que no cuentan con un sistema de vigilancia específico para identificar a los pequeños rumiantes afectados por las ETE.