La insuficiencia respiratoria es la principal causa de muerte a raíz de una lesión de la médula espinal cervical. Tener un modelo animal preclínico reproducible, cuantificable y confiable de la insuficiencia respiratoria inducida por una lesión cervical parcial le ayudará a comprender la neuroplasticidad respiratoria y no respiratoria posterior y permiten probar estrategias de reparación putativos.
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Artículo de método
Un modelo murino de la médula espinal cervical Lesión en estudio post-lesional Respiratorio Neuroplasticidad
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Resumen
Resumen
Una lesión de la médula espinal cervical induce parálisis permanente, y, a menudo conduce a la dificultad respiratoria. Hasta la fecha, no hay terapias eficaces se han desarrollado para mejorar / mejorar la insuficiencia respiratoria después de una lesión de la médula espinal cervical alta (SCI). Aquí se propone un modelo preclínico murino de alta SCI en la cervical 2 (C2) nivel metameric estudiar diversa neuroplasticidad respiratoria post-lesional. La técnica consiste en una lesión parcial quirúrgica en el nivel C2, que inducirá un hemiparalysis del diafragma debido a una desaferenciación de los frénico motoneuronas de los centros respiratorios situados en el tronco cerebral. El lado contralateral de la lesión permanece intacta y permite la recuperación de los animales. A diferencia de otros LIC que afectan la función locomotora (en la columna torácica y lumbar de nivel), la función respiratoria no requiere la motivación de los animales y la cuantificación del déficit / recuperación se puede realizar fácilmente (diafragma y la grabación del nervio frénicos, la ventilación de todo el cuerpo). Este modelo C2 SCI preclínica es un potente, útil y fiable modelo preclínico para estudiar diversos eventos de neuroplasticidad respiratorias y no respiratorias en diferentes niveles (molecular a la fisiología) y para probar diversas estrategias terapéuticas supuestos que podrían mejorar la respiración en pacientes con lesión medular.
Introducción
Traumatismo de la médula espinal es una lesión común que se observa en la población humana con incidencias dramáticas, como la parálisis permanente. Sin embargo, la gravedad de la lesión depende del nivel y la extensión de la trauma inicial. La insuficiencia respiratoria es la causa principal de mortalidad después de una lesión de la médula espinal cervical superior (SCI) 1. Actualmente, el único tratamiento terapéutico es para colocar el paciente bajo asistencia ventilatoria. Dado que algunos pacientes pueden ser destetados de la asistencia ventilatoria 2, debido a la recuperación espontánea que se produce con un retraso post-lesional, la neces....
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Protocolo
Este protocolo fue aprobado por el comité de ética de la silla RBUCE-UP de Excelencia (Universidad de Paris Sud, acuerdo de subvención n º 246556) y la Universidad de Versailles Saint-Quentin-en-Yvelines.
1. Preparación de instrumentos quirúrgicos esterilizados
- Limpiar los instrumentos quirúrgicos con detergente de laboratorio.
- Autoclave los instrumentos antes de la cirugía.
- En una sesión quirúrgica, esterilizar las herramientas mediante la colocación de las puntas en un esterilizador de cuentas caliente durante 10 min a 180 ° C entre 2 cirugías.
2. Preparación de Drogas
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Resultados
Extensión de la lesión
El éxito y la reproducibilidad de este modelo experimental particular, dependen de la experiencia de cada manipulador / cirujano. La cantidad subsiguiente de recuperación de las vías respiratorias (la actividad del nervio frénico y la actividad de diafragma) después de una lesión C2 está correlacionada con la ventrolateral restante salvó la materia blanca 21. Dado que la lesión es "hecho a mano" y requiere un poco de práctica por p.......
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Discusión
Dificultades técnicas de hacer el modelo de lesión C2
El modelo murino lesión C2 es una interesante herramienta para estudiar la neuroplasticidad respiratoria post-lesional. Sin embargo, los pasos necesarios para producir un modelo reproducible y fiable son numerosos y cada uno podría tener un impacto en el resultado del estudio. Por ejemplo, durante el proceso de intubación, un cuidado extremo debe ser tomada desde el tubo oro-traqueal puede producir una inflamación de la t.......
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Divulgaciones
Los autores declaran que no tienen intereses financieros en competencia.
Agradecimientos
Este trabajo es apoyado por fondos del Programa marco de la Unión Europea de la OIT (FP7/2007-2013) en virtud de acuerdo de subvención n º 246556 (proyecto RBUCE-UP Europea), HandiMedEx asignado por la Junta de Inversión Pública francés. Marcel Bonay fue apoyada por la Chancellerie des las Universidades de Paris (Piernas Poix), el Fonds de Dotation Recherche en Santé respiratoire, y el Centro de Asistencia respiratoire un domicilio d'Île de France (CARDIF)
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Materiales
| Nombre | Empresa | Número de catálogo | Comentarios |
|---|---|---|---|
| Animal | |||
| Macho Sprague Dawley Rat | Janvier | 225-250 g | |
| Surgical Instruments | |||
| Student Pinza Dumont #5 | Finas 91150-20 | ||
| Pinzas de Patrón Estándar para Estudiantes Herramienta | Ciencias Finas 91100-12 | ||
| Mayo-Stille Tijeras | Fine Science Tool | 14013-15 | Curvo |
| Student Vannas Spring Tijeras | Fine Science Tool | 91500-09 | |
| Tijeras de resorte recto - 8 mm Cuchillas | Fine Science Tool | 15025-10 | Recto romo/romo |
| Friedman Pearson Rongeur | Fine Science Tool | 16121-14 | |
| Cuchillo de disección curvo - punta fina | Fine Science Tool | 10055-12 | |
| Portaagujas recto Olsen-Hegar | Herramienta de ciencia fina | 12002-14 | |
| Retractor de Weitlaner-Locktite | Herramienta de ciencia fina | 17012-11 | 2x3 Suturas quirúrgicas reabsorbibles romas |
| Centravet | BYO001 | Tamaño de sutura 4-0 | |
| Equipment | |||
| Hot Bead Steriliser | Fine Science Herramienta | 18000-45 | |
| Catéter | Centravet | CAT188 | 16 G |
| Laringoscopio | |||
| Alambre | |||
| Espejo laríngeo | Centravet | MIR011 | |
| Timbres lactatados | Centravet | RIN020 | |
| Jeringa | Centravet Aguja Centravet | ||
| O2 | Air Liquid | I1001M20R2A001 | |
| 683 RodentT Ventilador 115/230V | Harvard Apparatus | 55-0000 | |
| Vaporizador | WPI | EZ-155 | |
| Cama caliente de línea delgada | WPI | EZ-211 | |
| Bote de aire | WPI | EZ-258 | |
| Drugs | |||
| Carprofeno | Centravet | ||
| Rimadyl | Centravet | RIM011 | |
| Buprenorfina | Centravet | BUP001 | |
| Baytril | Centravet | BAY001 | |
| Dexmedetomidina | Centravet | DEX010 | |
| Atipamezol | Centravet | ANT201 | |
| Solución | de BetadineCentravet | VET002 | |
| Isoflurano | Centravet | VET066 |
Referencias
- Frankel, H. L., et al. Long-term survival in spinal cord injury: a fifty year investigation. Spinal Cord. 36, 266-274 (1998).
- Ramer, M. S., Harper, G. P., Bradbury, E. J. Progress in spinal cord research - a refined strategy for the Internatio....
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Reimpresiones y permisos
