Ultrasonido Diagnóstico por la Imagen de la función del ratón del diafragma

Resumen

De imágenes de ultrasonido de diagnóstico ha demostrado ser eficaz en el diagnóstico de diversas enfermedades respiratorias en sujetos humanos y animales. Demostramos un protocolo integral de ultrasonido utilizado por el laboratorio del Dr. Zuo para analizar la cinética de diafragma específicamente en modelos de ratón. Esta es también una técnica de investigación no invasiva que puede proporcionar información cuantitativa sobre la función de los músculos respiratorios ratón.

Resumen

Análisis de funciones de los músculos esqueléticos respiratorios de roedores, en particular el diafragma, se realiza comúnmente mediante el aislamiento de tiras de músculo usando los procedimientos quirúrgicos invasivos. Aunque este es un método eficaz de evaluar la actividad in vitro de diafragma, que consiste en una cirugía no supervivencia. La aplicación de imágenes por ultrasonido no invasiva como un procedimiento in vivo es beneficioso, ya que no sólo reduce el número de animales sacrificados, pero también es adecuado para el seguimiento de la progresión de la enfermedad en ratones vivos. Por lo tanto, nuestro método de formación de imágenes de ultrasonido puede probablemente ayudará en el desarrollo de nuevas terapias que alivian lesión muscular inducida por diversas enfermedades respiratorias. En particular, en los diagnósticos clínicos de las enfermedades pulmonares obstructivas, imágenes de ultrasonido tiene el potencial de ser utilizado en conjunción con otras pruebas estándar para detectar la aparición temprana de la fatiga del músculo del diafragma. En el protocolo actual, se describe la forma de evaluar con precisión contracti diafragmadad en un modelo de ratón utilizando una técnica de imágenes de ultrasonido de diagnóstico.

Introducción

Recientemente, las técnicas de imagen de ultrasonido de diagnóstico se han aplicado a modelos de ratón de la hipertensión renovascular y ^1,2 del cáncer de páncreas. Sin embargo, estas técnicas no han sido ampliamente utilizados en el ensayo de la función de los músculos respiratorios de roedores. Por lo tanto, hemos desarrollado un método de imagen de ultrasonido de diagnóstico como una herramienta valiosa para las evaluaciones longitudinales en vivo de la movilidad del diafragma en ratones.

Hay varias ventajas de la ecografía diagnóstica. Por ejemplo, no es invasiva, segura, portátil y permite mediciones en tiempo rea....

Protocolo

Fueron aprobados y completados de conformidad y el cumplimiento del Cuidado de Animales institucional y el empleo Comisión de la Universidad Estatal de Ohio (IACUC) los reglamentos y directrices Todos los procedimientos que involucran sujetos animales.

1. Ratón Anestesia

1. Establecer una mesa procedimiento de limpieza con una almohadilla isotérmica climatizada envuelta en una toalla quirúrgica. La almohadilla de calefacción debe mantenerse entre 30 ° C y 34 ° C para estabilizar la temperatura del núcleo del animal al tiempo que reduce el estrés potencial para el animal.
2. Coloque el ratón en una cámara de inducción de ane....

Resultados

Una imagen de ultrasonidos típico de un diafragma de ratón se muestra en la Figura 1A. El desplazamiento vertical máxima de diafragma de ratón fue grabado. Esta distancia se calcula con precisión la medición de la profundidad de movimiento del diafragma de la relajación a la contracción usando los calibradores electrónicos que son parte del software de ultrasonido. Tabla 1 muestra estas mediciones de distancia de las contracciones del diafragma de tres ratones diferentes. Después de con.......

Discusión

El protocolo experimental actual desarrolla técnicas de imagen de ultrasonido de diagnóstico específicos para la actividad del diafragma en un modelo de ratón a través de una, en el enfoque no invasivo vivo. Los ajustes del equipo de anestesia son valores aproximados, que podrán ajustarse ligeramente para cada animal ya que los ratones individuo puede responder de manera diferente a la anestesia. Para evitar que la administración de la anestesia inadecuada, es importante controlar regularmente los sign.......

Materiales

Lista de materiales utilizados en este artículo

Nombre	Empresa	Número de catálogo	Comentarios
Sistema de diagnóstico por imagen ultrasónico digital veterinario	Edan	DUS 3 VET	Los parámetros de ultrasonido incluyen: frecuencia de 6,5 MHz, profundidad de 29 mm. Nota: Se puede utilizar una máquina de ultrasonido equivalente para este protocolo
Transductor de matriz microconvexa	Edan	C611
(HCU) GE Logiq i equivalente	GE Healthcare	GE Logiq i unidad de mano (HCU)	o equivalente
GE 12 MHz sonda de matriz lineal GE	Healthcare	12L-RS	o equivalente
Vaporizador anestésico veterinario	Webster	Veterinary Serial #: W422021	El isoflurano se utilizó exclusivamente con este vaporizador (o equivalente). Se montó una cámara de inducción hecha a medida para la anestesia para la anestesia inicial. La anestesia de mantenimiento se realizó utilizando un cono
Isothesia (Isoflurane, USP)	Butler Schein	29405 250ML PVL	O
un bote absorbente de anestesia Enviro-pure	Surgivet Smiths Medical PM, Inc.	Parte #: 32373B10	O
equivalente Gel de transmisión de ultrasonido	HM Sonic	N/A	O equivalente
Puralube ungüento veterinario	Puralube	NDC 17033-211-38	O
equivalente Almohadilla isotérmica Deltaphase	Braintree Scientific Inc.	39DP	O equivalente
Depilador	Nair	N/A	O equivalente
Maquinilla de afeitar eléctrica	Remington	HC-5015	O equivalente
Cinta quirúrgica	3M Micropore	1530-1	O equivalente
Esponjas de gasa	Dynarex	3262	O equivalente

O unidad de mano nasal equivalente