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Artículo de método

Evaluación del Comportamiento del Envejecimiento Ratón Sistema Vestibular

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DOI:

10.3791/51605

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11 de julio de 2014

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En este artículo

Resumen

Control del motor y el rendimiento balanza se conocen a deteriorarse con la edad. Este artículo presenta una serie de pruebas de comportamiento no invasivas estándar con la adición de un estímulo rotatorio sencillo para desafiar al sistema y mostrar los cambios en el rendimiento vestibulares equilibrio en un modelo murino de envejecimiento.

Resumen

Declive relacionado con la edad en el rendimiento balanza se asocia con el deterioro de la fuerza muscular, la coordinación motora y la función vestibular. Mientras que un número de estudios muestran cambios en el fenotipo equilibrio con la edad en los roedores, muy pocos aislar la contribución vestibular para equilibrar tanto en condiciones normales o durante la senescencia. Utilizamos dos pruebas de comportamiento estándar para caracterizar el desempeño equilibrio de los ratones en los puntos de edad definidos durante la vida útil: la prueba rotarod y la prueba de barra de equilibrio inclinado. Es importante destacar, sin embargo, un rotador hecha a la medida también se usa para estimular el sistema vestibular de los ratones (sin inducir signos manifiestos de la enfermedad de movimiento). Estas dos pruebas se han usado para mostrar que los cambios en el rendimiento vestibular-equilibrio mediada están presentes durante la vida útil murino. Los resultados preliminares muestran que tanto la prueba de rotarod y la prueba de barra de equilibrio modificada se pueden usar para identificar cambios en el rendimiento de equilibrio durante el envejecimiento como alternativa a la más diffictécnicas ult e invasivos tales como (VOR) mediciones vestíbulo-ocular.

Introducción

Nuestro sentido del equilibrio es tal vez uno de los componentes vitales aún más olvidadas de incluso las actividades motoras más básicos como el senderismo y el torneado. Balanza está influenciada por numerosos factores, incluyendo la fuerza muscular, coordinación motora y la función vestibular, y es sólo en la presencia de neuropatías vestibulares o durante el envejecimiento normal que se aprecia la importancia de un sistema de equilibrio pleno funcionamiento. Alteraciones en el sistema vestibular son frecuentemente asociados con experiencias de vértigo o mareo y el desequilibrio que resulta en un mayor riesgo de caídas y lesiones posteriores 1. Esto es ....

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Protocolo

1. Animales

  1. Los ratones (C57/BL6) de edades 1, 9, y 13 meses de edad se obtuvieron del Centro de Recursos Animales (Perth, Australia). Estos ratones fueron alojados en jaulas estándar de ratón en el Fondo para el Bosch de roedores en la Universidad de Sydney en un 12/12 horas de luz / oscuridad ciclo con acceso a alimentos y agua ad libitum. Los procedimientos que se describen a continuación fueron aprobados por la Universidad de Comité de Ética Animal Sydney.
  2. Traiga jaulas de ratón en la sala de pruebas antes de cada prueba durante 10 minutos para permitir ratones para aclimatarse al entorno de pruebas.

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Resultados

Rotarod

El rendimiento del motor de los ratones fue descrito como el tiempo para quedarse (TTF) registrados para cada ratón sobre 8 ensayos. Usando estas mediciones de RSA, curvas de formación para cada ratón se pueden trazar. Figura 2 muestra ejemplos de la actuación del motor de un ratón 1 mes de edad, y uno 9 meses de edad, puntero del ratón sobre el curso de 8 ensayos. Estas curvas de formación muestran un aumento en TTF durante los primeros 3-5 ensayos seguido de una meset.......

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Discusión

Pasos críticos en el Protocolo

El trabajo previo ha demostrado que es fácil de overtrain ratones tanto en el cilindro giratorio y el aparato de barra de equilibrio y como consecuencia, la adquisición de mediciones precisas puede ser un reto 15. Por ejemplo, el sobreentrenamiento en el cilindro giratorio puede dar lugar a ratones intencionalmente saltar de los tacos durante los períodos de aclimatación y de ensayo, mientras que el sobreentrenamiento en la barra de equilibrio puede con.......

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Divulgaciones

Los autores declaran que no tienen intereses financieros contrapuestos.

Agradecimientos

Los autores desean expresar su agradecimiento a la Fundación Conmemorativa Garnett Passe y Rodney Williams y al Centro de Comportamiento Animal del Instituto Bosch.

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Materiales

Lista de materiales utilizados en este artículo
NombreEmpresaNúmero de catálogoComentarios
RotarodIITC Ciencias de la Vida Inc.#755"Tacos para ratas" = 70 mm de diámetro. No permita que el etanol entre en contacto con el metacrilato.
iPhoneApplePuede usar cualquier tipo de cámara. Velcro fijado a la superficie posterior para la fijación al brazo articulado 3D.
Brazo articulado 3DFisso/BaitellaClassic 3300-28Cualquier tipo de soporte vertical estable sería adecuado. El velcro se fija al extremo apical del brazo para la fijación del iPhone.
Viga móvil de madera: tira de madera lisa de 1 m de largo con una sección transversal circular de 14 mm de diámetroSe puede utilizar una gama de diámetros y formas de sección transversal para adaptarse a los parámetros experimentales
Caja de portería de madera (130 x 140 x 220 mm) hecha de tablas
Soporte de soporte de vigas de 41 x 41 mm: 2 vigas verticales de 525 y 590 mm desde el suelo en el inicio y en el final de la portería respectivamente; Viga horizontal de 803 mm que corre a lo largo del suelo directamente debajo de la viga móvil; dos vigas de 20 mm de longitud actúan como "pies", uniendo las vigas horizontales y verticales en cada extremo; un bloque de 21 x 21 x 36 mm tallado en el extremo apical de la viga vertical "inicial"; Una abertura de 13 x 13 mm recortada en el centro de este bloque, formando un túnel que corre perpendicular a la viga móvil.Sujete todas las uniones con pequeños soportes de acero.
Pintura negra (a base de agua)HandycanAcrílico NegroMate 2-3 capas para todas las superficies de madera del aparato de barra de equilibrio
Acabado transparenteZarzo EstapolPoliuretano MateMonocapa para todas las vigas. Doble capa para todas las demás superficies del aparato de barra de equilibrio
Espuma, materialde embalaje Para amortiguar cualquier caída de la barra de equilibrio
70% Etanol, toallas deBarra limpia y caja de portería entre cada animal.
Almohadillas de gasa/toallas dePara forrar el suelo de la portería
Casita del ratón (de la jaula de casa)
de 11 mm de espesor papel papel

Referencias

  1. Agrawal, Y., et al. Disorders of balance and vestibular function in US adults: data from the National Health and Nutrition Examination Survey, 2001-2004. Arch. Intern. Med. 169, 938-944 (2009).
  2. Schwab, C. W., Kauder, D. R. Trauma in the g....

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Reimpresiones y permisos

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