Un sistema de radio-telemetría para monitorizar la función cardiovascular en ratas con la médula espinal y transección Embryonic Stem Neural injertos de células

Resumen

Se presenta un protocolo para el uso de un sistema de radio-telemétrico para registrar los parámetros cardiovasculares en la T4 de la médula espinal de ratas cortados transversalmente ocho semanas después del tronco cerebral embrionaria de células madre neurales de injerto en el sitio de la lesión. La telemetría es una técnica avanzada para evaluar con precisión la función cardiovascular en conscientes de la médula espinal de ratas lesionadas con libertad de movimientos.

Resumen

Lesión de la médula espinal torácica o cervical alta (SCI) puede conducir a la disfunción cardiovascular. Para controlar los parámetros cardiovasculares, se implantó un catéter conectado a un transmisor de radio en la arteria femoral de ratas que se sometieron a una transección de la médula espinal T4 con o sin injerto de células madre neurales embrionarias del tallo cerebral derivados que expresan la proteína verde fluorescente. En comparación con otros métodos, como la inserción de la cánula o manguito de la cola, la telemetría es ventajoso para controlar continuamente la presión arterial y la frecuencia cardíaca en los animales se mueven libremente. También es capaz de múltiples adquisiciones de datos a largo plazo. En la médula espinal lesionada ratas, se registraron los datos con éxito cardiovasculares basales bajo condición desenfrenada y la DA en respuesta a la distensión colorrectal. Además, los parámetros cardiovasculares antes y después de SCI pueden compararse en la misma rata si un transmisor se implanta antes de una transección de la médula espinal. Una limitación de la Telemet descritoRY procedimiento es que la implantación en la arteria femoral puede influir en el suministro de sangre a la extremidad posterior ipsilateral.

Introducción

Disfunción cardiovascular se produce después de una lesión de la médula espinal (SCI) en niveles altos. Se manifiesta en la presión desordenada arterial y frecuencia cardíaca en reposo, hipotensión ortostática, hipotensión inducida por el ejercicio, y la DA se caracteriza por episodios de hipertensión y bradicardia baroreflex mediada en respuesta a estímulos sensoriales por debajo del nivel de la lesión ^1,2. Estos síntomas interfieren con la vida diaria de los pacientes con lesión medular. Por lo tanto, es importante establecer herramientas eficaces para la investigación de cambios cardiovasculares en animales con SCI y los tratamientos experimentales.

Protocolo

Todos los animales protocolos fueron aprobados por el Cuidado de Animales y el empleo Comisión Institucional (IACUC). Directrices del NIH para el cuidado de animales de laboratorio y seguridad se siguen estrictamente. Los animales con los procedimientos quirúrgicos fueron tratados adecuadamente para minimizar el dolor y el malestar.

1. Médula Espinal Curgery e injerto celular

1. Instrumentos quirúrgicos autoclave antes de todas las cirugías. Utilice Hot bolas Esterilizador (Herramientas de Bellas Ciencia) para eliminar los agentes patógenos y contaminantes microbianos de instrumentos entre los procedimientos en diferentes animales....

Resultados

Utilizando la técnica de telemetría antes descrito, se registró con éxito los parámetros cardiovasculares en la médula espinal lesionada animales. En los animales con solo SCI, MAP se redujo significativamente, mientras que HR aumentó en comparación con los animales no tratados previamente, en consonancia con los informes anteriores ^9. En los animales con BS-NSC injerto, PAM y FC acercado niveles medidos en los animales no tratados previamente (Figura 2). Durante la distensión colorrectal, un.......

Discusión

Tradicionalmente, una cánula llena de líquido se inserta en la arteria y se conecta a un transductor de presión para registrar los parámetros cardiovasculares como una instantánea terminal en cada animal ^11. Para supervisar continuamente el rendimiento cardiovascular durante mucho tiempo, los sistemas de radio-telemétrico se emplean en muchos laboratorios. Esta herramienta más refinada puede registrar la presión arterial en el consciente, moviéndose libremente animales. En comparación con los catéteres llenos.......

Materiales

Lista de materiales utilizados en este artículo

Nombre	Empresa	Número de catálogo	Comentarios
Fibrinógeno (rata)	Sigma	F6755-25MG	2 horas a 37 oC para dissovle
Trombina (rata)	Sigma	T5772-100UN	Dissovle en 10 mM CaCl2
1% Terg-A-Zyme	Sigma Z273287		Solución enzimática para la limpieza por telemetría
Fluorogold	Fluorochrome		Dissovle en agua destilada y evitar la luz
Telémetro                      (PA-C40)	Data Sciences International
Sistema de registro y análisis Telementric	Sciences International		Estimulador de señales, Matriz de intercambio de datos, receptores, Monitor de referencia de presión ambiental
Catéter con punta de balón	Edward Lifesciences	111F7-P	Para la distensión colorrectal

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