Las hormonas gonadales como el estrógeno modulan la formación de la memoria en una serie de paradigmas experimentales, incluyendo el miedo, la extinción, la memoria. Este protocolo describe un conjunto de métodos para investigar la influencia de las hormonas gonadales específicamente durante la extinción en hembras de ciclo natural, incluido el monitoreo del ciclo estral y la administración de estrógenos exógenos.
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Artículo de método
Protocolo para el Estudio de la extinción del miedo condicionado en ratas hembras Naturalmente Ciclismo
En este artículo
Resumen
Resumen
La extinción del miedo condicionado se ha estudiado extensamente en roedores machos. Recientemente, ha habido un creciente número de estudios que indican que los mecanismos neuronales para ciertas tareas de comportamiento y conductas de respuesta son diferentes en mujeres y hombres. Usando a las mujeres en los estudios de investigación puede representar un desafío debido a la variación de las hormonas gonadales durante su ciclo estral. Este protocolo describe procedimientos bien establecidos que son útiles en la investigación del papel de los estrógenos en el miedo consolidación de la memoria extinción en ratas hembras. Fase del ciclo estral y la administración exógena de estrógenos antes de la extinción de formación puede influir en recuerdo de la extinción 24 horas más tarde. La técnica de hisopado vaginal para la identificación de fase estral descrito aquí ayuda al examen y manipulación de ciclismo naturalmente las hormonas gonadales. El uso de este modelo básico de roedores pueden definir con mayor precisión los mecanismos por los que los estrógenos pueden modular la memoria de extinción miedo enhembras.
Introducción
Diferencias sexuales inherentes se observan a través de diversos comportamientos cognitivos y paradigmas de aprendizaje tanto en humanos y roedores. Por ejemplo, se ha informado de que las mujeres tienen en general las habilidades verbales y orientado a los detalles más fuertes, mientras que los hombres tienen mejores habilidades espaciales 1-3. Estas diferencias sexuales pueden deberse en parte a la influencia de las hormonas gonadales. Los niveles altos de estradiol mejorar el rendimiento en las tareas en las que las mujeres son mejores, pero empeoran el rendimiento en tareas que los hombres por lo general hacen bien 4-6. Aunque esta evidencia....
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Protocolo
NOTA: Todos los procedimientos de este protocolo han sido aprobados por el Subcomité de Investigación Animal Care, que sirve como el Cuidado y Uso de Animales Comité Institucional (IACUC) para el Hospital General de Massachusetts, y cumplen con los Institutos Nacionales de Salud.
1. Animal Vivienda y Procedimiento para el Manejo
- A su llegada, la casa del adulto Sprague Dawley hembras de 8-10 semanas de edad (con un peso 200-225 g) en grupos de cubos de plástico 3.4 pulgadas con ropa de cama de viruta de madera. Mantenerlas en una dieta de acceso ad libitum al perro chino y el agua y un 12 horas de luz / oscuridad ciclo. Deja ra....
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Resultados
En este protocolo de recordatorio miedo extinción, por ciento de congelación se midió como un indicador de miedo. Los animales que se extinguen bien y conservan el recuerdo de la extinción de formación exhibieron bajo el miedo en el último día de la prueba de comportamiento durante la llamada de extinción. Las ratas macho y hembra no difieren significativamente en la expresión condicionada miedo durante el condicionamiento, la extinción, y recuerdan fases (Figura 2). Sin embargo, una diferencia de sexo .......
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Discusión
Extinción miedo ha sido ampliamente estudiado en ratas macho con los mecanismos neurales que median condicionado extinción miedo identificado y evaluado bajo diversas manipulaciones. Relativamente pocos estudios han examinado las ratas hembras o el papel de las hormonas gonadales en el miedo extinción. Para estudiar específicamente los efectos del estrógeno en el miedo extinción, que completan un ciclo natural ratas hembras son sometidos a un paradigma de comportamiento de tres días. Este procedimiento consiste en fases.......
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Divulgaciones
Los autores de este manuscrito no tienen que compiten intereses financieros u otros conflictos de intereses a revelar.
Agradecimientos
Mohammed R. Milad cuenta con el apoyo de la subvención R01 del NIMH MH097880 y fondos institucionales del Departamento de Psiquiatría del MGH.
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Materiales
| Nombre | Empresa | Número de catálogo | Comentarios |
|---|---|---|---|
| Cámara de acondicionamiento del miedo | Coulbourn Instruments | ||
| Graphic State | Coulbourn Instruments | ||
| Caja atenuadora del sonido | Med Associates, Inc. | NIR-022MD | |
| Estradiol | Sigma-Aldrich | E1024 | En aceite de sésamo para inyección subcutánea |
| Aceite de sésamo | Sigma-Aldrich | S3547-250ML | |
| Freezescan | Cleversys, Inc. | ||
| Tinción rápida por inmersión | Jorgensen Laboratories, Inc. | J0322A1, J0322A2, J0322A3 | |
| Aplicadores con punta de algodón | Fisher Scientific | 23-400-114 | 6 pulgadas, solución salina estéril |
| al 0,9 % | LabChem, Inc. | LC23460-2 | Cloruro de sodio con |
| portaobjetos de microscopio Selectfrost | Fisher Scientific | 12-550-003 | |
| Virex II 256 | Diversey, Inc. | 5019317 | Diluir 1:256 con agua |
| Jeringas Luer-Lok Tip 1ml | Becton Dickinson | 309628 | |
| Agujas desechables hipodérmicas | Exelint International, Co. | 26402 | Calibre 26 |
Referencias
- Baron-Cohen, S., Knickmeyer, R. C., Belmonte, M. K. Sex differences in the brain: implications for explaining autism. Science. 310 (5749), 819-823 (2005).
- Voyer, D., Voyer, S., Bryden, M. P. Magnitude of sex differences in spatial abiliti....
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Reimpresiones y permisos
