Con este estudio, presentamos un modelo de estrés estandarizado para la retina bovina superfundido aislada para futuras pruebas terapéutica preclínica. Se evaluó el efecto de cualquiera de hipoxia (N 2 puro) o estrés glutamato (250 glutamato mM) sobre la función retiniana representado por a- y amplitudes de la onda b.
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Artículo de método
El glutamato y la hipoxia como un Modelo de estrés para el perfundido aislado Vertebrados Retina
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Resumen
Resumen
Neuroprotección ha sido un fuerte campo de la investigación en la investigación oftalmológica en las últimas décadas y afecta a enfermedades como el glaucoma, la oclusión vascular retiniana, desprendimiento de retina y la retinopatía diabética. Era el objeto de este estudio para introducir un modelo de estrés estandarizado para futuras pruebas terapéutica preclínica.
Retinas bovinas se prepararon y perfundidos con una solución estándar saturada de oxígeno, y el ERG se registró. Después de registrar ondas b estables, hipoxia (n pura 2) o el estrés glutamato (250 micras glutamato) se ejerció durante 45 min. Para investigar los efectos sobre la función de los fotorreceptores solo, se añadió aspartato 1 mM para obtener una de las ondas. ERG-recuperación se controló durante 75 min.
Para la hipoxia, una disminución en una onda de amplitud de 87,0% se observó (p <0,01) después de un tiempo de exposición de 45 min (disminución de 36,5% después del final de la lavado p = 0,03). Además, un decr inicialfacilidad de amplitudes b-onda de 87,23% se registró, que alcanzó significación estadística (p <0,01, disminución de 25,5% al final del lavado, p = 0,03).
Por 250 micras glutamato, una reducción inicial del 7,8% de las amplitudes de una onda (p> 0,05), seguido de una reducción del 1,9% (p> 0,05). Una reducción del 83,7% de las amplitudes de la onda b (p <0,01) fue observado; después de un lavado de 75 min, la reducción fue del 2,3% (p = 0,62). En este estudio, un modelo de estrés se presenta estandarizada que puede ser útil para identificar posibles efectos neuroprotectores en el futuro.
Introducción
Neuroprotección ha sido un fuerte campo de la investigación en la investigación oftalmológica en las últimas décadas. La retina es una red neuronal altamente sensible que depende significativamente de la oxigenación y está influenciada fuertemente por el metabolismo de sus células circundantes. Las principales patologías oculares relacionados con el daño de las células nerviosas son oclusiones vasculares de la retina, glaucoma y desprendimiento de retina.
Oclusión de la arteria de la retina, como un ejemplo para la oclusión vascular retiniana, conduce a una pérdida repentina de la visión debido a la hipoxia de la retina interna 1.
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Protocolo
1. Preparación de la especie bovina Ojos
- Obtener ojos bovinos directamente siguientes al sacrificio del animal.
- Transportar los ojos protegidos en "Sickel-solución" un medio especial que contiene NaCl 120 mM, 2 mM KCl, 0,1 mM de MgCl 2, 0,15 mM CaCl 2, 1,5 mM NaH 2 PO 4 mM de glucosa, 13,5 mM Na 2 HPO 4 y 5 en RT.
- Realizar la preparación de la retina en condiciones adaptados a la oscuridad con una luz roja tenue.
- Retire la parte anterior del ojo. Realizar una incisión ecuatorial ca. 4 mm por detrás del limbo. A partir de entonces eliminar córnea, el iris, el cue....
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Resultados
Después de 1 hora de la perfusión de los preparativos de la retina con solución estándar saturada de oxígeno (Figura 1A y B) ERG-amplitudes mostraron estabilización y una menor variación de amplitudes entre las mediciones individuales. pH, la presión osmótica, la temperatura, y pO 2 (excepto para las pruebas de hipoxia) se mantuvieron constantes para todas las pruebas.
Para aislar la señal de los fotorreceptores de la señal de la retina interna, 1 mM aspartato se aña.......
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Discusión
En este estudio, se encontró un impacto significativo en la amplitud de la onda b después de 45 min de la hipoxia. Esta reducción fue todavía significativa después de la fase de lavado. Un efecto similar sobre el potencial de los fotorreceptores se pudo observar.
Los resultados son apoyados por otros datos publicados 16 y darnos la oportunidad de estudiar los posibles efectos neuroprotectores después de la hipoxia.
Después de 45 min de exposición de 25.......
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Divulgaciones
Los autores no tienen nada que revelar.
Agradecimientos
Este periódico está dedicado a mi querida esposa Maren y a nuestro pequeño Karl.
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Materiales
| Nombre | Empresa | Número de catálogo | Comentarios |
|---|---|---|---|
| 120 mM NaCl | Merck Pharma, Alemania | 1.064.041.000 | |
| 2 mM KCl, | Merck Pharma, Alemania | 1.050.010.250 | |
| 0,1 mM MgCl2, | Merck Pharma, Alemania | 58.330.250 | |
| 0,15 mM CaCl2 | Merck Pharma, Alemania | 111 TA106282 | |
| 1,5 mM NaH2PO4/13,5 mM Na2HPO4 | Merck Pharma, Alemania | 1.065.860.500 | |
| 5 mM de glucosa | Merck Pharma, Alemania | 40.741.000 |
Referencias
- Varma, D. D., Cugati, S., Lee, A. W., Chen, C. S. A review of central retinal artery occlusion: clinical presentation and management. Eye (Lond). 27, 688-697 (2013).
- Resch, M., Suveges, I., Nemeth, J. Hypertension-related eye disorders). Orv Hetil. 154, 1773-1780 (20....
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Reimpresiones y permisos
