La inducción de la inflamación intestinal murino por transferencia adoptiva de Efector CD4<sup&gt; +</sup&gt; CD45RB<sup&gt; Alta</sup&gt; T células en ratones inmunodeficientes

Erin C. Steinbach; Gregory R. Gipson; Shehzad Z. Sheikh

doi:10.3791/52533

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Artículo de método

La inducción de la inflamación intestinal murino por transferencia adoptiva de Efector CD4

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DOI:

10.3791/52533

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21 de abril de 2015

Erin C. Steinbach¹^,² , Gregory R. Gipson¹ , Shehzad Z. Sheikh¹^,³^,⁴

¹Center for Gastrointestinal Biology and Disease, University of North Carolina at Chapel Hill, ²Department of Microbiology and Immunology, University of North Carolina at Chapel Hill, ³Department of Genetics, University of North Carolina at Chapel Hill, ⁴Curriculum in Genetics and Molecular Biology, University of North Carolina at Chapel Hill

En este artículo

Resumen

Aquí, presentamos un protocolo para inducir inflamación colónica en ratones mediante la transferencia adoptiva de células T^altas CD4 ⁺ CD45RB singénicas a receptores deficientes de células T y B. Las características clínicas e histopatológicas imitan las enfermedades inflamatorias intestinales humanas. Este método permite estudiar el inicio de la inflamación colónica y la progresión de la enfermedad.

Resumen

Hay muchos modelos diferentes de animales disponibles para el estudio de la patogénesis de las enfermedades humanas inflamatorias del intestino (IBD), cada uno con sus propias ventajas y desventajas. Se describe aquí un modelo de colitis experimental que se inicia por la transferencia adoptiva de células ^{de alta} T CD4 ⁺ CD45RB singeneicos bazo en ratones receptores deficientes de células T y B. La población de células ^{de alta} T CD4 ⁺ CD45RB que consiste en gran parte de las células efectoras no tratados previamente es capaz de inducir la inflamación intestinal crónica, muy parecidas a aspectos clave de la EII humana. Este método puede ser manipulado para estudiar aspectos de la aparición de la enfermedad y la progresión. Además, puede ser utilizado para estudiar la función de innato y adaptativo, y las poblaciones de células inmunes reguladoras, y el papel de la exposición ambiental, es decir, la microbiota, en la inflamación intestinal. En este artículo se expone la metodología para la inducción de la colitis con un protocolo paso a paso. Esta incLudes un video de demostración de los aspectos técnicos clave necesarios para desarrollar con éxito este modelo murino de colitis experimental con fines de investigación.

Introducción

Las enfermedades inflamatorias intestinales (EII) La enfermedad de Crohn y la colitis ulcerosa son el resultado de una interacción incompleta y compleja entre las respuestas inmunitarias del huésped, la susceptibilidad genética, los factores ambientales y el contenido luminal entérico¹. Estudios recientes de asociación de todo el genoma informan de asociaciones entre los genes reguladores de las células inmunitarias y la susceptibilidad a la EII^2,3. Los genes intrínsecos de las células inmunitarias innatas y adaptativas están representados en estos estudios, lo que indica un papel central de estas poblaciones celulares en la patogénesis de la EII....