Aquí se presenta un protocolo que describe ex situ oxigenada máquina de perfusión de los injertos de hígado de donantes. Este artículo contiene un paso a paso el protocolo para adquirir y preparar el injerto hepático para la máquina de perfusión, preparar el líquido de perfusión, cebar la máquina de perfusión y realizar oxigenada máquina de perfusión normotérmica del injerto hepático.
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Artículo de método
Ex Situ Normotérmica máquina de perfusión de hígados de donantes
En este artículo
Resumen
Resumen
En contraste con la conservación en frío estática convencional (0-4 ° C), ex máquina de perfusión in situ puede proporcionar una mejor conservación de los hígados de donantes. La perfusión continua de órganos ofrece la oportunidad de mejorar la calidad del órgano y permite ex situ evaluación de la viabilidad de hígados de donantes antes del trasplante. Este artículo de vídeo proporciona un paso a paso para protocolo ex situ máquina de perfusión normotérmica (37 ° C) de hígados de donantes humanos utilizando un dispositivo que proporciona una presión y temperatura controlada pulsátil de perfusión de la arteria hepática y la perfusión continua de la vena portal. El fluido de perfusión se oxigena por dos oxigenadores de membrana de fibra hueca y la temperatura se puede regular entre 10 ° C y 37 ° C. Durante la perfusión, la actividad metabólica del hígado, así como el grado de lesión pueden ser evaluados por análisis bioquímico de muestras tomadas del líquido de perfusión. Perfusión Machine es una herramienta muy prometedorapara aumentar el número de hígados que son adecuados para el trasplante.
Introducción
El método actual de preservación de órganos en el trasplante de hígado es enjuagar con y posterior almacenamiento de los hígados de donantes en frío (0-4 ° C) de líquido de conservación (como Universidad de Wisconsin solución o la solución de histidina-triptófano-cetoglutarato). Este método se conoce como almacenamiento en frío estático (SCS). Aunque la tasa metabólica de los hígados a 0-4 ° C es muy baja, todavía existe la demanda de 0,27 mol de oxígeno / min / g de tejido de hígado, que no puede ser proporcionado durante 1 SCS. El método convencional de SCS, por lo tanto, resulta en cierto grado de lesión (adicional) de hígados de donantes. Si bien esta ....
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Protocolo
Este protocolo ha sido aprobado por el Comité Ético Médico (Medisch ethische Toetsingscommissie) del Centro Médico Universitario de Groningen, Holanda.
1. Preparación del líquido de perfusión
Nota: El volumen total del fluido de perfusión preparado para máquina de perfusión normotérmica de acuerdo con este protocolo es 2233 ml y la osmolaridad dirigida del líquido de perfusión es 302 mOsmol / L.
- De los componentes del fluido de perfusión se describe en la Tabla 1, mantener las células rojas de la sangre humanas lleno, plasma fresco congelado y albúmina humana separada. Mezclar el re....
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Resultados
12 hígados humanos que se negaron a trasplantes debido a diversas razones se utilizaron después de obtener el consentimiento informado para la investigación de las familias de los donantes. Características de los donantes se describen en la Tabla 2. Los hígados de donantes humanos fueron perfundidos normothermically durante 6 horas utilizando el protocolo descrito en este documento. La calidad de los injertos de hígado se evaluó mediante el control de la homogeneidad macroscópica de la perfusión del híg.......
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Discusión
Este video ofrece un paso a paso para el protocolo máquina de perfusión normotérmica de hígados de donantes humanos usando un dispositivo que permite controlar la presión de doble perfusión a través de la vena porta hepática y la arteria. Al seguir este protocolo, fallas técnicas de la máquina de perfusión no ocurrieron y todos los injertos estaban bien perfundido y bien oxigenada. Los hígados perfundidos in situ ex tenían la hemodinámica estable y eran metabólicamente activa, según la definición de la producci.......
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Divulgaciones
Los autores de este manuscrito no tienen ningún conflicto de intereses a revelar.
Agradecimientos
Este trabajo de investigación fue financiada por donaciones otorgados por Innovatief Actieprogramma Groningen (IAG-3), Jan de Cock Kornelis Stichting y Tekke Huizingafonds, todo en los Países Bajos. Estamos agradecidos a todos los coordinadores de trasplante holandeses para la identificación de los posibles descartados hígados y obtener el consentimiento informado.
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Materiales
| Nombre | Empresa | Número de catálogo | Comentarios |
|---|---|---|---|
| Asistencia hepática | Asistencia de órganos | OA. Li.Li.140 | Dispositivo de perfusión |
| Liver Assist, paquete desechable, | Organ Assist | OA. Li.DP.540 | Juego y cánulas desechables |
| Meredith No.8 | Vygon Nederlands B.V. | 1362082 | Cánula de vías biliares |
| Albúmina humana 200 g/L / ALBUMÁN | Sanquin | 15522598 | 100 ml |
| Nutrición parenteral modificada | Baxter Nederland B.V. | N14G30E | 7,35 ml |
| Multivitamínicos para infusión / CERNEVIT | Baxter International Inc. | 9800927 | 7 μ l |
| Oligoelementos concentrados para perfusión / NUTRITRACE | B. Braun Melsungen AG | 14811332 | 7,35 ml |
| Metronidazol 5 mg/ml | Baxter Nederland B.V. | 98181882 | 40 ml |
| Cefazolina / SERVAZOLINA | Sandoz B.V. | 15611337 | 2 ml |
| Insulina de acción rápida | varios proveedores | 20 ml | |
| Glubionato de calcio, solución intravenosa 10%, 137,5 mg/ml | Sandoz | 97038695 | 40 ml |
| H2O estéril | Fresenius Kabi Nederland B.V. | 98084453 | 51,3 ml |
| NaCl 0,9% | Baxter Nederland B.V. | 15262510 | 160 ml |
| Heparina 5.000 IE/ml para administración intravenosa | LEO Pharma B.V. | 98026178 | 4 ml |
| Bicarbonato de sodio 8,4% | B. Braun Melsungen AG | 97973874 | La cantidad depende del pH |
| Glóbulos rojos empaquetados (en SAGM) | Banco de sangre (Sanquin) | N0012000 | 750 ml |
| Plasma fresco congelado | Banco de sangre (Sanquin) | N04030A0/N04030B0 | 900 ml |
Referencias
- Plaats, A., et al. Hypothermic machine preservation in liver transplantation revisited: Concepts and criteria in the new millennium. Ann. Biomed. Eng. 32 (4), 623-631 (2004).
- op den Dries, S., Sutton, M. E., Lisman, Y., Porte, R. J.
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Reimpresiones y permisos
