El objetivo de este protocolo es describir la preparación y caracterización de fármacos físicamente atrapados y poco solubles en agua en sistemas micelares de administración de fármacos compuestos por copolímeros de bloques anfifílicos.
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Artículo de método
Preparación y Caracterización de Individual y Multi-fármaco cargado físicamente atrapado poliméricos micelas
En este artículo
Resumen
Resumen
Copolímeros en bloque anfifílicos como bloque polyethyleneglycol- ácido -polylactic (PEG-b-PLA) se auto-ensamblan en micelas por encima de su concentración micelar crítica forman núcleos hidrofóbicos rodeadas de conchas hidrófilas en medios acuosos. El núcleo de estas micelas puede ser utilizado para cargar fármacos hidrófobos, mal solubles en agua como docetaxel (DTX) y everolimus (EVR). Caracterización sistemática de las capacidades de la estructura micelar y carga de drogas son importantes antes de in vitro e in vivo puede ser llevado a cabo. El objetivo del protocolo descrito en este documento es proporcionar los pasos de caracterización necesarias para lograr productos micelares estandarizados. DTX y EVR tienen solubilidades intrínsecas de 1,9 y 9,6 g / ml, respectivamente Preparación de estas micelas puede lograrse mediante colada en disolvente que aumenta la solubilidad acuosa de DTX y EVR a 1,86 y 1,85 mg / ml, respectivamente. Estabilidad del fármaco en micelas evaluated a temperatura ambiente durante 48 hr indica que el 97% o más de los fármacos se mantienen en solución. Tamaño de micelas se evaluó mediante dispersión de luz dinámica e indicó que el tamaño de estas micelas estaba por debajo de 50 nm y dependía del peso molecular del polímero. La liberación del fármaco a partir de las micelas se evaluó mediante diálisis en condiciones de inmersión a pH 7,4 a 37 ° C durante 48 hr. Resultados de ajuste de curvas indican que la liberación del fármaco es impulsado por un proceso de primer orden que indica que está impulsado difusión.
Introducción
Copolímeros en bloque anfifílicos con estructura repitiendo compuestas de dominios hidrófilos e hidrófobos pueden espontáneamente auto-ensamblan para formar tres asambleas macromoleculares tridimensionales conocidos como micelas poliméricas. Estas estructuras tienen un núcleo hidrófobo interior rodeado por una envoltura hidrofílica. El núcleo hidrófobo tiene la capacidad de incorporar fármacos hidrofóbicos, ya sea por atrapamiento físico a través de interacciones hidrófobas o por conjugación química a la cadena principal del polímero. 1 existir muchas ventajas de utilizar estos copolímeros de bloques para formar micelas para la administración de fármacos. ....
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Protocolo
1. Preparación de individuales y de múltiples drogas micelas cargadas por medio de fusión solvente
- Pesar DTX 1 mg o EVR 1 mg o ambos fármacos a 1 mg cada una de las micelas duales de drogas (DDM).
- Pesar 15 mg de PEG 2000 - b PLA 1800 o PEG 4000 - b PLA 2200, ya sea individual o de DDM.
- Disolver los fármacos / drogas y el polímero en 0,5 ml de acetonitrilo y el lugar en un matraz de fondo redondo de 5 ml.
- Formar una película de polímero de drogas distribuido delgada por evaporación de la (s) solución de acetonitrilo -polymer droga bajo presión reducida usando un evap....
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Resultados
DTX individual o micelas EVR y DTX y EVR DDM en PEG-b PLA micelas se formulan con éxito en cualquiera de PEG 4000 - b PLA 2200 o PEG 2000 - b PLA 1800 (Figura 1).
DTX, EVR, y el DDM mostraron una estabilidad similar en PEG 4000 - b PLA 2200 o PEG 2000 - b PLA 1800 más de 48 horas (Figura 2). Carga de fármaco inicial .......
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Discusión
El uso de micelas poliméricas para la administración de fármacos continúa expandiéndose debido a su versatilidad y capacidad para administrar medicamentos hidrofóbicos para diversos estados de enfermedad. Por lo tanto, las técnicas necesarias para preparar y caracterizar estas formulaciones antes de su uso en cultivos celulares o animales son un primer paso crítico para determinar el mejor emparejamiento entre el fármaco y el polímero. Los PEG-b-PLA son excelentes copolímeros de bloque anfifílico para la admin.......
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Divulgaciones
Los autores no tienen nada que revelar.
Agradecimientos
Este estudio fue financiado por la subvención del Programa de Premios de Investigación de la Facultad de Nueva Farmacia de la AACP, la Subvención para Nuevos Investigadores de la Fundación de Investigación Médica de Oregón, el fondo de inicio de la Universidad Estatal de Oregón y el fondo de inicio de la Facultad de Farmacia de la Universidad del Pacífico.
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Materiales
| Nombre | Empresa | Número de catálogo | Comentarios |
|---|---|---|---|
| PEG2000-b-PLA1800 | Advanced Polymer Materials, Inc | 6-01- PLA/2000 | PLA MW se puede especificar al realizar el pedido |
| PEG4000-b-PLA2200 | Advanced Polymer Materials, Inc | 6-01- PLA/4000 | PLA MW se puede especificar al realizar el pedido |
| Docetaxel | LC Laboratories | D-1000 | 100 mg |
| Everolimus | LC Laboratories | E-4040 | 100 mg |
| Acetonitrilo | EMD/VWR | EM-AX0145-1 | Grado de HPLC; 4 L |
| Matraz de fondo redondo | Glassco/VWR | 89426-496 | 5 ml |
| RV 10 Evaporadores rotativos de control | IKA Works | 8025001 | Rotoevaporador |
| Shimadzhu HPLC con detector DAD | Shimadzhu | RP-HPLC | |
| Slide-a-lyzer casete de diálisis MWCO 7000 | Thermo Scientific, Inc | 66370 | 3 ml |
| Tampón de fosfato pH 7,4, 200 mM | VWR | 100190-870 | 500 ml |
| Malvern NanoZS | Malvern Instruments, Reino Unido | DLS | |
| Filtro de nylon | Acrodisc/VWR | 28143-242 | 13 mm; 0,2 y micro; M |
| Ácido fosfórico, NF | Spectrum Chemical/VWR | 700000-626 | 100 ml |
| GraphPad Prism | www.graphpad.com | Software de análisis | |
| Cartucho Zorbax SB-C8 Rapid Resolution | Agilent Technologies | 866953-906 | 4.6 y veces; 75 mm, 3,5 μ m |
Referencias
- Yokoyama, M. Polymeric micelles as a new drug carrier system and their required considerations for clinical trials. Expert Opin Drug Deliv. 7, 145-158 (2010).
- Shin, H. C., Alani, A. W., Rao, D. A., Rockich, N. C., Kwon, G. S.
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Reimpresiones y permisos
