Un método rentable y fiable para predecir la tensión mecánica en un solo uso y Bombas estándar

Resumen

Las investigaciones de esfuerzo cortante en un sistema de emulsión aceite-agua dan como resultado la ruptura de la gota durante el tiempo experimental. Para contar los tamaños de las gotas en los procesos de bombeo, en este protocolo se demostró con éxito la idoneidad de la endoscopia en línea.

Resumen

Las bombas se utilizan principalmente cuando se transfieren caldos de cultivo estériles en los procesos de producción biofarmacéuticas y biotecnológicas. Sin embargo, durante el proceso de bombeo fuerzas de corte se producen, que puede conducir a la pérdida de productos cualitativa y / o cuantitativa. Para calcular el esfuerzo mecánico con un gasto limitado experimental, se utilizó un sistema de emulsión de aceite-agua, cuya idoneidad se demostró para detecciones tamaño de gota en biorreactores ^1. Como gota de ruptura del sistema de emulsión de aceite-agua es una función de la tensión mecánica, la caída de los tamaños necesitan ser contados en el tiempo experimental de las investigaciones de estrés de cizallamiento. En estudios anteriores, la endoscopia inline se ha demostrado ser una técnica de medición precisa y fiable para las detecciones de tamaño de gota en dispersiones líquido / líquido. El objetivo de este protocolo es demostrar la idoneidad de la técnica de endoscopia en línea para las mediciones de tamaño de gota en los procesos de bombeo. Con el fin de expresar el tamaño de la gota, el diámetro medio de Sauterd ₃₂ se utilizó como el diámetro representante de gotas en la emulsión aceite-agua. Los resultados mostraron baja variación en los diámetros medios Sauter, que se cuantificaron por desviaciones estándar por debajo de 15%, lo que indica la fiabilidad de la técnica de medición.

Introducción

Las bombas se utilizan para transferir los cultivos de células en las industrias farmacéuticas y biotecnológicas. Durante el proceso de bombeo, el estrés mecánico puede resultar en el daño celular irreversible, lo que podría poner en peligro la cantidad y la calidad del producto ^1-4. El nivel de estrés mecánico depende de la configuración del tipo de bomba y la bomba, como se ha demostrado en estudios previos ^5-6. Comúnmente, las bombas peristálticas, jeringas y el diafragma se utilizan para un solo uso de aplicaciones basadas en tecnología (SU). Estas bombas resultan en altas fuerzas de cizallamiento locales causadas por la compresión de la tubería de la bomba y el flujo pulsante ^7.

Para superar estos inconvenientes, bombas centrífugas de levitación magnética (bombas centrífugas MagLev) constituyen una alternativa prometedora. El motor es accionado magnéticamente a fin de evitar huecos estrechos entre el impulsor y la carcasa de la bomba (Figura 1). Un estudio anterior investigó la centrífuga MagLevbombas y mostró la tensión mecánica menor en células de ovario de hámster chino (CHO) en comparación con las bombas de diafragma ⁵ peristáltica y 4 pistones. Además, los análisis de hemólisis no revelaron trauma sangre y trombo formación significativa sobre un rango de condiciones de operación utilizando estas bombas ^8-11. Los resultados demuestran que el uso de estas bombas diseñadas específicamente se aplica menos estrés mecánico sobre los sistemas biológicos en comparación con las bombas peristálticas y el diafragma. Para investigar la tensión mecánica con un gasto limitado experimental, un sistema modelo de emulsión de aceite-agua se recomienda debido a su costo (aproximadamente 99,8%) y (ca. 99,5%) la aplicación de tiempo reducido en comparación con los sistemas de cultivo de células biológicas.

Como gota de ruptura del sistema de emulsión de aceite-agua es una función de la tensión mecánica, la caída de tamaños deben ser contados en el tiempo experimental de las investigaciones de estrés de cizallamiento. Muchas de las técnicas para el dimensionamiento gotas están disponibles, which se puede dividir en sonido, láser y técnicas de foto base ^12. En particular, el uso de la sonda en línea endoscopia foto-óptico muestra tamaños de gota casi idénticos para las detecciones manuales y automáticas (desviación estándar por debajo de 10%) y permite una detección de 250 gotas por minuto ^13. Debido a su exactitud y fiabilidad, la técnica endoscopio ha demostrado ser una técnica de medición estándar eficaz para distribuciones de tamaño de gota en dispersiones líquido / líquido cuando se compara con otras sondas comúnmente utilizados (por ejemplo, fibra óptica adelante-atrás-ratio (FBR) sensor , método de haz enfocado de reflectancia (FBRM) y la técnica de medición de reflectancia óptica de dos dimensiones (2D-ORM)) ^12,14. Por otra parte, la adecuación de la endoscopia en línea para la medición de tamaños de gota en un recipiente agitado se ha demostrado varias veces en las investigaciones anteriores ^15-18.

Basado en un estudio previo ^6, este protocolo describeel uso de la endoscopia en línea para determinar tamaños de gota (diámetro medio Sauter) de un sistema de emulsión de aceite-agua en las bombas. El diámetro medio Sauter fue utilizado como un criterio de comparación con el fin de estimar el esfuerzo mecánico de los multi-uso (MU) bombas centrífugas MagLev, un peristáltica y un solo uso (SU) 4-pistón de la bomba de diafragma.

Figura 1. levitación magnética del sistema de bomba centrífuga. (A) El principio de un motor sin cojinetes y (B) la PuraLev 200mu se muestran como un ejemplo. Por favor, haga clic aquí para ver una versión más grande de esta figura.

Protocolo

Las investigaciones se realizaron con una configuración de bomba de tubería (Figu re 2), que permite a los experimentos de tensión mecánica en las tasas de flujo de hasta 60 L min ^-1 y caídas de presión hasta 2 bar a realizar. Como se muestra en la Fig u ra 2, la configuración experimental se compone de el recipiente de almacenamiento, el circuito de la bomba, y el equipo para la técnica de endoscopia en línea. El impulsor del recipiente de almacenamiento sólo se utiliza para mezclar el tensioactivo. Elementos periféricos se integraron en el circuito cerrado para monitorear el caudal V y caída de presión p en diferentes ajustes de la bomba. Las investigaciones se variaron con la válvula de mano-rueda.

1. Configuración Experimental

1. Asegúrese de que el biorreactor (D = 0,15 m, H / D = 2.2) está equipado con un impulsor para la disolución de la surfactant y asegurarse de que el tubo de entrada se sumerge en el líquido para evitar la entrada de gas.
2. Equipar el bucle de la bomba con un puerto de la jeringa, la bomba investigado, un medidor de flujo de pinza, un sensor de presión de un solo uso y una válvula de rueda manual. Después de la conexión del bucle de la bomba al recipiente de almacenamiento, conectar el cabezal de la bomba al motor y preparar la sonda endoscopio.
3. Montar el plano de reflexión cambiable, un espejo de rodio en este caso, en la punta de la sonda y ajustar la distancia entre el espejo y la lente a 150 micras. Ajuste el tornillo a 100 micras para enfocar la nitidez del objetivo.
4. Conecte la sonda al estroboscopio a través de un cable de fibra óptica y la cámara del endoscopio al ordenador mediante un cable Ethernet. A continuación, conecte la cámara y el estroboscopio entre sí a través de un cable disparador de caja.
5. Inicie el ordenador y abrir el software proporcionado por el fabricante, que incluye una adquisición de imágenes y software de reconocimiento, así como el software analizador de resultado.
6. Seleccione el software de adquisición de imágenes en el menú principal.
7. Haga clic en el botón "Detectar dispositivo" en la esquina superior izquierda de la pantalla para detectar la cámara.
8. En "Configuración de directorio", seleccione la ubicación en el equipo para guardar imágenes y activar el comando "Crear subcarpetas gatillo".
9. Introduzca los parámetros del proceso en el apartado "Modo de disparo: Ready".
   Velocidad de cuadros: 7.5 Hz
   Fotogramas por gatillo: 50
   Número de disparadores: 60
   Intervalo de disparo: 60 seg
10. Tras la finalización de todos los trabajos preparatorios, vierta 5 l de agua desionizada en el recipiente de almacenamiento y encender la bomba para llenar la bomba y el bucle de la bomba.
11. Apague la bomba y añadir 0,9 ml de tensioactivo _(surfactante c = 0,18 ml ^L-1, _{surfactante ρ, 20 ° C} = 1070 kg m ^-3, la concentración micelar crítica (cmc): ω _cmc0; ≈ 0,018 ml L ^-1, ω _tensioactivo ≈ 10 · ω _cmc) con una pipeta de 10 ml bajo agitación. Después de 10 min el agente tensioactivo se haya disuelto completamente.
12. Apague el impulsor y encender la bomba. Coloque la sonda de endoscopio de manera que la lente se encuentra directamente debajo del tubo de entrada.
13. Ajuste la velocidad de flujo de 3.4 L min ^-1 y la caída de presión de 0,03, 0,3 o 0,61 bar variando la velocidad del impulsor y la válvula de rueda manual.
14. Pesar 6,3 g de aceite directamente en la jeringa (β = 1,26 g _{de aceite} L ^-1, _{aceite ρ, 20 ° C} = 989,5 kg m ^-3).
15. Inicie el software de adquisición de imágenes y añadir el aceite a través del puerto de la jeringa. La bomba ejecuta distribuye las gotas de la emulsión.
16. Después de 1 hr, terminar la investigación tensión de cizallamiento y limpiar el endoscopio en línea, así como el biorreactorcon el bucle de bomba integrada. Posteriormente, preparar la configuración experimental para el siguiente proceso de bombeo.

2. Medición y Análisis de Imágenes

1. Abra el software de reconocimiento automático de imagen en el menú principal.
2. En "Directorio raíz de lotes", seleccione la ubicación en el equipo para guardar los archivos (todos * .csv).
3. Seleccione la columna "Ruta de la serie de imagen" y haga clic en el botón "Agregar Imagen serie subcarpetas" en la esquina inferior izquierda de la pantalla para cargar la imagen de la serie.
4. Cargue los parámetros del proceso que son proporcionados por el fabricante. Seleccione la columna "Configuración de búsqueda (* .PSS o auftrag _ *. Mat)" y haga clic en el botón "Establecer la configuración de búsqueda" en la media-baja de la pantalla para cargar los parámetros del proceso a fin de especificar el reconocimiento de la gota.
5. Seleccione la columna "Buscar Patrón (* .psp o F _ *. Colchoneta) y haga clic en el botón" Set Patrón de búsqueda "en la esquina inferior derecha de la pantalla para cargar los parámetros del proceso a fin de especificar el análisis de caída.
6. Inicie el reconocimiento de la imagen haciendo clic en el botón "lotes Inicio".
7. Después de la terminación de reconocimiento de imágenes, expresan los tamaños de gota detectada por el diámetro medio Sauter (d _32), o cualquier otro representante valor medio o la distribución de elección mediante el software de analizador de resultado.
8. Abra el software analizador de resultado en el menú principal.
9. Activar el comando "todos * .csv en 1 carpeta" y haga clic en la "Carpeta de carga (s)" botón en la esquina superior izquierda de la pantalla para cargar el todo * archivo .csv guardado previamente.
10. Seleccione el valor correspondiente (por ejemplo, Sauter diámetro medio) en la lista desplegable en la mitad superior de la pantalla para visualizar los resultados. Para el cálculo del diámetro de entrar en la escala de 0,6591 micras pixel ^-1 a la derecha, que es proporcionada por el fabricante.

Figura 2. Montaje experimental circuito de la bomba para la configuración de la bomba por tubería utilizando la endoscopia en línea como la técnica de medición:. (1) recipiente de almacenamiento, (2) Puerto jeringa, (3) de la bomba, (4) el sensor de presión, (5) sensor de flujo, ( 6) estroboscopio, (7) ordenador con el software proporcionado por el fabricante, y (8) de la sonda endoscopio. Haga clic aquí para ver una versión más grande de esta figura.

Resultados

Evaluación óptica

Fig u ra 3 muestra las imágenes de reconocimiento de las partículas después de un tiempo de bombeo de 1 hr. Los superiores cuatro imágenes muestran las gotas antes del reconocimiento y las cuatro imágenes inferiores muestran las gotas marcadas por el software de reconocimiento. Las gotas detectados aparecen resaltados con un borde verde. Comparando las imágenes superior e inferior muestra que los bordes de la gota se detectaron precisamente por el software de reconocimiento de imágenes. Las imágenes de la izquierda muestran la distribución de la gota para la centrífuga MagLev bombas PuraLev 200mu y PuraLev 600MU, y los de la derecha muestran el diafragma de 4 pistones y la bomba peristáltica. Una evaluación óptica permite una clasificación inicial de la tensión mecánica en el sistema modelo de emulsión. Esto reveló que tamaños de gota más grandes y gota cuenta inferiores fueron generadas por las bombas centrífugas MagLev comparación con el diaphr 4 pistonesbomba de agm y peristáltica. En consecuencia, las bombas centrífugas MagLev, especialmente el PuraLev 200mu, mostraron una reducción rotura gota, indicando tensiones mecánicas inferiores.

Figura 3. Imágenes de la endoscopia en línea. Emulsión gotas antes (A, B, C, D) y después (E, F, G, H) el reconocimiento de las partículas después de 1 hora de bombear usando (A, E) el PuraLev 200mu, ( B, F) el PuraLev 600MU, (C, G) la bomba de diafragma de 4 pistones, y (D, H) de la bomba peristáltica en condiciones de funcionamiento idénticas (3,4 L min ^-1 y 0,03 bar). Haga clic aquí para ver una versión más grande de esta cifra.

Me Sauterun diámetro

Investigaciones posteriores revelaron desviaciones estándar por debajo d ₃₂ ± 0,4 micras y garantiza resultados reproducibles utilizando inline endoscopia ^19. Por lo tanto, múltiples investigaciones no eran necesarios para este enfoque, que reduce adicionalmente el gasto experimental.

Con el fin de expresar el tamaño de la gota, el diámetro medio Sauter d ₃₂ (ver Ec. 1) se utilizó como el diámetro representante de gotas en la emulsión aceite-agua para este enfoque. En general, el diámetro medio Sauter disminuyó con el tiempo para todos los tipos de bombas y ajustes de la bomba hasta alcanzar el estado de equilibrio ^12. Las investigaciones en este estudio confirmaron la progresión del diámetro medio Sauter (Fig u re 4A a D), curvas de la PuraLev 200mu (Fig u RE &# 160; 4A) y la bomba peristáltica (fig u re 4D) están discutiendo ejemplarmente en este protocolo.

En contraste con la PuraLev 200mu, el medio Sauter diámetros eran hasta 40% más pequeño para la bomba peristáltica a las mismas condiciones de operación (caudal = 3,4 L min ^-1; caída de presión = 0,03 bar). Como consecuencia de ello, las tensiones mecánicas superiores resultaron en un aumento de la ruptura de la gota y tamaños de gota, por lo tanto de menor tamaño. Además, el diámetro de Sauter media disminuyó con el aumento de la caída de presión en el PuraLev 200mu (Fig u re 4A), lo que indica la dependencia del tamaño de la gota en caída de presión. En contraste, la bomba peristáltica mostró un diámetro medio Sauter de _32,60min d = 10 micras, con el final del experimento para todos los parámetros del proceso (Figu re 4D). Por lo tanto, el diámetro medio Sauter se encontró que era independiente de la caída de presión. Sin embargo, los resultados reflejan la comprensión física de la ruptura caída: de mayor tensión mecánica, se determinaron Sauter diámetros medios más pequeños (véase también la Fig u ra 5).

Para cada punto de medición, al menos 300 gotas se determinaron con el fin de garantizar la seguridad estadística. La desviación estándar máxima disminuyó por PuraLev 200mu de d _32,4min ± 42 micras y para el PuraLev 600MU de d _32,6min ± 21 micras a aproximadamente ₃₂ d ± 0,5 micras, con el final del proceso de bombeo. La desviación estándar de la disminución se debió a una mayor distribución del tamaño de gota homogénea hasta que se alcanzó el estado de equilibrio. En comparación to las bombas centrífugas MagLev, las bombas de diafragma peristálticos y 4 pistones revelaron desviaciones estándar por debajo d ₃₂ ± 10 micras.

(1)

Figura 4. perfiles típicos de Sauter significan diámetros d ₃₂ con el tiempo y la determinación de los diámetros medios medidos Sauter d _{32, m.} Comparación de Sauter diámetros medios d ₃₂ (A) para el PuraLev 200mu, (B) para el PuraLev 600MU, (C) para la bomba de diafragma 4-pistón, y (D) para la bomba peristáltica. Los diámetros medios Sauter D ₃₂ se determinaron con un caudal de 3,4 L min ^-1 y caídas de presión que van desde 0,03 hasta 0,61 bar.La medida Sauter diámetro medio d _32, se calculó _m para los últimos 10 minutos (límite). La desviación estándar resultante de los diámetros medios Sauter d ₃₂ (N ≥ 300) se muestra. Por favor, haga clic aquí para ver una versión más grande de esta figura.

Sauter diámetro medio medido como un sistema de comparación

Como se describió anteriormente, el diámetro medio Sauter disminuyó con el tiempo hasta que los tamaños de gota alcanzaron el estado estacionario. En el último 10 min del tiempo experimental, el valor medio de la Sauter diámetro medio se calculó para determinar el diámetro medido Sauter, que se utilizó como criterio de comparación de medias (ver límite de la Fig u ra 4A-D). Los diámetros medios medidos Sauter d _{32, m} se muestran para una velocidad de flujo de 3,4 L &# 160; min ^-1 y una caída de presión rango 0,03-0,61 bar en la Fig u ra 5. Más grandes medidos Sauter diámetros medios se determinaron para ambas bombas centrífugas MagLev (200mu y 600MU) y la bomba de diafragma 4-pistón en menores caídas de presión y las velocidades del impulsor. La bomba peristáltica reveló mide medio Sauter diámetros de d _{32, m} = 10 m para todos los parámetros del proceso. Como se mencionó anteriormente, las fuerzas de cizallamiento fueron independientes de la caída de presión para la bomba peristáltica.

Los Sauter diámetros medios medidos más grande de d _{32, m} = 36 micras para el PuraLev 200mu yd _{32, m} = 34 micras para el PuraLev 600MU se obtuvieron a una caída de presión de 0,03 bar. En comparación con sus homólogos, el MagLev bomba centrífuga serie obtiene hasta un 59% más grande mide medio Sauter diámetros. Estos resultados indica una menor tasa de ruptura de la gota y por lo tanto menor tensión mecánica resultante de la utilización de las bombas centrífugas.

La desviación estándar de la medida medio Sauter diámetros durante el estado estacionario fue inferior al 15%, confirmando de ese modo valores fiables y precisos para los tamaños de gota.

Figura 5. Comparación de las medidas Sauter diámetros medios d _{32, m.} Medido Sauter diámetros medios de las bombas centrífugas MagLev y sus contrapartes en el 3,4 L min ^-1 y presión gotas de 0,03, 0,30 y 0,61 bar. Las desviaciones estándar resultantes de los Sauter diámetros medios medidos d _{32, m} durante el estado estacionario se muestran.

Abreviaturas Please clic aquí para ver una versión más grande de esta figura.

2D-ORM	medición de reflectancia óptica bidimensional
CCD	dispositivo de carga acoplada
CHO	Ovario de hámster chino
cmc	concentración micelar crítica
FBR	adelante-atrás-relación
FBRM	método de reflectancia haz enfocado
MU	multiuso
SU	de un solo uso

Nomenclatura

	[M 3 s -1]	velocidad de flujo
c	[M 3 m -3]	concentración
d 32	[M]	Diámetro medio de Sauter
d 32, m	[M]	Sauter diámetro medio medido
d s	[M]	diámetro de la superficie
d v	[M]	diámetro de volumen
F	[Hz]	frecuencia
n	[S-1]	velocidad del impulsor
N	[-]	número de gotas
p	Papá	Presión
t	segundo	hora
β	[kg m -3]	concentración de masa
ρ	[kg m -3]	densidad
69;	[M 3 m -3]	fracción de masa

Tabla 1. Tabla de abreviaturas y nomenclatura.

Discusión

El objetivo de este protocolo es demostrar la idoneidad de la técnica de endoscopia en línea para las mediciones de tamaño de gota en los procesos de bombeo. Para este propósito, la caída de tamaños de un sistema de emulsión de aceite-agua se determinaron y un diámetro medio Sauter medido se calculó para caracterizar la tensión mecánica de la centrífuga MagLev bombas, así como sus homólogos, un peristáltica y una bomba de diafragma 4-pistón. Los resultados mostraron baja variación de la medida medio Sauter diámetros, los cuales fueron cuantificados por desviaciones estándar por debajo de 15%, lo que indica que los tamaños de gota se han medido de forma fiable y precisa. Como consecuencia, el diámetro medio de Sauter medido con éxito podría ser utilizado como un criterio de comparación para evaluar la tensión mecánica de las bombas investigados. Las bombas centrífugas MagLev revelaron mayores medidos Sauter diámetros medios, indicando tensiones mecánicas más bajas en las gotas de emulsión en comparación con las bombas de diafragma peristálticos y 4 pistones. En StudIES hasta la fecha, la endoscopia inline se ha demostrado ser una técnica robusta y simple para la medición del tamaño de gota fiable ^{1,6,12-14,20-21,} que también fue confirmado por este estudio. En comparación con las técnicas de medición alternativos, tales como el sensor de FBR de fibra óptica, la FBRM y la técnica 2D-ORM, la técnica endoscopio se pueden utilizar como el método estándar para la obtención de datos precisos en aplicaciones de líquido / líquido ^12,14.

El fácil manejo de la endoscopia en línea y de la simple producción del sistema de emulsión de aceite-agua no biológica permite un procedimiento claro para detecciones tamaño de gota de acuerdo con el texto del protocolo (véase más arriba). Sin embargo, se debe mencionar que la posición de la sonda endoscopio depende del flujo de fluido en el recipiente de almacenamiento. Otras investigaciones (datos no mostrados) han revelado que la lente de la sonda debe estar situado directamente debajo del tubo de entrada para caudales más bajos hasta 5 L min ^-1a fin de evitar una detección múltiple de una gota ^19. Para imágenes nítidas a velocidades de flujo más de 5 L min ^-1, se recomienda colocar la sonda al menos 10 cm del tubo de entrada. Independiente de los parámetros del proceso, el titular de la endoscopia en línea debe ser estable a fin de evitar un desplazamiento de la sonda, lo que puede dar lugar a imágenes borrosas.

Además, particularmente Cabe señalar que el tamaño de la gota detectada es cercana al límite inferior de detección del sistema de foto-óptico aplicada, donde el diámetro mínimo gota detectable es 6,5 m. A medida que el software proporcionado por el fabricante se ha mejorado, las técnicas de endoscopia en línea pueden detectar de manera fiable un tamaño de gota mínima de 1 m. Por otra parte, el tratamiento de la imagen se seguirá desarrollando para permitir el monitoreo en línea de aplicaciones industriales.

Aunque el presente estudio se centró en relativamente bajas tasas de flujo de hasta 3,4 L 60; min ^-1, los estudios futuros deben considerar una amplia gama de condiciones de operación. Las primeras investigaciones se han llevado a cabo a velocidades de flujo de hasta 20 L min ^-1 (datos no mostrados). Sin embargo, una dilución 1: 2 (c _surfactante = 0,09 ml ^L-1, c = 0,64 ml _{de aceite} L ^-1) del sistema de emulsión de aceite-agua se recomienda a caudales de más de 10 L min ^{-1 19,} como una mayor ruptura gota causado por el aumento de la tensión mecánica de lo contrario afectará caer la detección y reducir el número de gotas detectadas. Las pruebas se llevaron a cabo con una dilución 1: 2 y se comparan con los resultados de un sistema de emulsión de aceite-agua sin diluir. Para ambos enfoques, el medio Sauter diámetros han sido medidos con fiabilidad (desviación estándar por debajo de 5%). Por lo tanto, la fracción de volumen reducido (dilución 1: 2) no influyó en la medida medio Sauter diámetros, y por lo tanto una ruptura gota-gota era insignificante.

nt "> Estos potentes enfoques experimentales proporcionan una buena base para la mejora de la técnica de endoscopia, así como el software de adquisición de imágenes, el reconocimiento y el resultado analizador relacionada. Además, la idoneidad de la técnica de endoscopia para clasificar tipos de bombas y series de acuerdo a su mecánico estrés fue demostrado con éxito. Los resultados obtenidos son esenciales para el desarrollo del diseño de la bomba y la optimización de bombas para reducir el daño celular.

Materiales

Lista de materiales utilizados en este artículo

Nombre	Empresa	Número de catálogo	Comentarios
Cámara CCD	Allied Vision Technologies GmbH	GX2750	Equipo para endoscopia en línea
C-Flex Biopharmaceutical Tubing	Saint-Gobain Performance Plastics	374-375-4	Tubo Seleccione una longitud de tubo de aproximadamente 45  cm antes de la bomba.
C-Flex Tubo Biofarmacéutico	Saint-Gobain Performance Plastics	374-375-3	Tubo Seleccione una longitud de tubo de aproximadamente 45  cm después de la bomba y sujete el sensor de flujo a este tubo.
Conector CLAVE	Victus	011-C2000	Puerto de muestreo
Controlador LPC-200.1-02	Levitronix GmbH	100-30030	Controlador PuraLev 200MU
Controlador LPC-600.1-02	Levitronix GmbH	100-30033	Controlador PuraLev 600MU
LeviFlow Clamp-On Sensor LFSC-12	Levitronix GmbH	100-30329 Sensor de	caudal para caudales inferiores a 5  L  min-1
Convertidor LeviFlow LFC-1C-CS	Levitronix GmbH	100-30328 Dispositivo de salida del	sensor de caudal
Masterflex I/P Easy Load	Fisher Scientific AG	EW-77963-10	Bomba peristáltica
Mitos válvula de flujo libre	Parker Hannifin Europe Sà rl	FFLQR16S6S6AM	Válvula
Mobil Eal Arctic	Exxon Mobil Corporation	Mobil EAL Arctic 22	Oil Prepare la emulsión directamente antes del experimento.
Motor	Elektromotorenwerk Brienz AG	7WAC72N4THTF	Motor para eje agitador
Motor BSM-1.4	Levitronix GmbH	100-10005	Motor PuraLev 200MU
Motor LPM-600.4	Levitronix GmbH	100-10038	PuraLev 600MU
motor Norm-Ject 10 ml Luer Lock	Restek Corporation	22775	jeringa
LPP-200.5	Levitronix GmbH	100-90525	Cabezal de bomba PuraLev 200MU
Cabezal de bomba LPP-600.18	Levitronix GmbH	100-90548 Cabezal de	bomba PuraLev 600MU
Quattroflow 1200-SU	Almatechnik AG	QF 1200	Bomba de membrana de 4 pistones
SciPres Sensor	SciLog	080-695PSX	Sensor de presión
SciPres Sensor Monitor	SciLog	080-690 Dispositivo de salida del sensor de	presión
SOPAT-VF Sonda endoscópica en línea	SOPAT GmbH		endoscópico en línea
	Drello GmbH & Co KG	Drelloscop 255-01	Equipo para endoscopia en línea
Triton X-100	Sigma-Aldrich	X100	Surfactante Mango con guantes y gafas. (toxicidad aguda, irritación ocular)