Artículo de método

Cuantitativa del fondo de ojo autofluorescencia para la Evaluación de Enfermedades de la Retina

DOI:

10.3791/53577

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11 de marzo de 2016

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1Department of Ophthalmology, NYU School of Medicine, 2Harkness Eye Institute, Columbia University

En este artículo

Resumen

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El epitelio pigmentario de la retina (EPR) apoya la retina sensorial a través del reciclaje de los subproductos del ciclo visual, que se acumulan como lipofuscina. Estos productos son autofluorescentes y pueden ser visualizados cualitativamente in vivo. Aquí, describimos un método para obtener imágenes cuantitativas de lipofuscina RPE mediante oftalmoscopia láser de barrido confocal.

Resumen

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El epitelio pigmentario de la retina (EPR) se yuxtapone a la retina sensorial suprayacente y apoya la función del sistema visual. Entre las tareas realizadas por el EPR se encuentran la fagocitosis y el procesamiento de segmentos externos de fotorreceptores a través de orgánulos derivados de lisosomas. Estos productos de degradación, almacenados y denominados gránulos de lipofuscina, están compuestos parcialmente por bisretinoides, que tienen amplios espectros de absorción y emisión de fluorescencia que pueden detectarse clínicamente como autofluorescencia del fondo de ojo con oftalmoscopia láser de barrido confocal (cSLO). La acumulación de lipofuscina se asocia con el aumento de la edad, pero también se encuentra en varios patrones tanto en enfermedades degenerativas adquiridas como hereditarias de la retina. Por lo tanto, el estudio de su patrón de acumulación y la correlación de dichos patrones con los cambios en la retina sensorial suprayacente son esenciales para comprender la fisiopatología y la progresión de la enfermedad de la retina. Aquí, describimos una técnica empleada por nuestro laboratorio y otros que utiliza cSLO para cuantificar el nivel de lipofuscina RPE en ojos sanos y enfermos.

Introducción

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El epitelio pigmentario de la retina (RPE) es compatible con la función de la retina sensorial a través de numerosos procesos 1. La degeneración macular asociada a la edad (DMAE) es la causa más importante de ceguera intratable en los países industrializados y se caracteriza por los cambios en el EPR, incluyendo la pérdida de pigmento, pérdida de la función y la atrofia. En AMD y en el envejecimiento normal, el RPE se acumula orgánulos fluorescentes, lisosomas derivados que contienen fragmentos fotorreceptoras fagocitados, se hace referencia como gránulos de lipofuscina. La acumulación de lipofuscina RPE ha sido pensado para indicar la disfunción oxidativa....

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Protocolo

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Ética Declaración: Todos los pacientes incluidos en estos estudios fueron realizados de acuerdo con lo que de revisión institucional aprobado supervisión de la junta de la Facultad de Medicina de la Universidad de Nueva York.

1. Selección de pacientes y preparación inicial de la Imagen

Nota: Se requieren los siguientes materiales: 0,5% solución oftálmica de tropicamida, 2,5% solución oftálmica fenilefrina, CSLO equipado con dominio espectral tomografía óptica de coherencia (SD-OCT) y la fluorescencia de referencia interna.

  1. Antes de la proyección de imagen, configurado de forma adecuada CSLO para la ....

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Resultados

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Esta técnica se utilizó para estudiar qaf en ambos sanos 13 y estados de enfermedad 10-12. En ojos sanos (Figura 1), AF emitida desde el RPE se distribuye de forma relativamente uniforme a lo largo del fondo de ojo (Figura 1A). intensidad reducida se ve en la región macular central debido al bloqueo de la luz por el pigmento macular, y en los lados y las esquinas de la imagen debido a la óptica del ojo y la cámara. Los vasos se ven .......

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Discusión

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distribución lipofuscina RPE anormal, si aumenta o disminuye, es un marcador sensible de la enfermedad de la retina y, en general se asocia con la pérdida de función de la retina sensorial. A continuación, describimos la aplicación de qaf para la evaluación de la lipofuscina RPE. La incorporación de una referencia interna fluorescente para corregir la sensibilidad variable la potencia del láser y el detector 9 junto con nuestra técnica de imagen estandarizada permite la cuantificación fiable de los niveles de.......

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Divulgaciones

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STA: sin divulgaciones, JPG: sin divulgaciones, RTS: consultor, Ocata Therapeutics.

Agradecimientos

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Nos gustaría dar las gracias a nuestros colaboradores, Francois Delori, Tomas Burke, y Tobias Duncker.

Apoyo a la Investigación: NIH / NEI R01 EY015520 (RTS, JPG), y los fondos de libre disposición de Investigación para prevenir la ceguera (RTB).

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Materiales

Lista de materiales utilizados en este artículo
NombreEmpresaNúmero de catálogoComentarios
Spectralis HRA + OCTHeidelberg Engineering
oftálmica de tropicamida al 0,5%Se puede utilizar cualquier marca
SoluciónSe puede utilizar cualquier marca
Referencia fluorescente internaHeidelberg Engineering
Software IGOR ProWaveMetrics
Solución oftálmica de fenilefrina al 2,5%

Referencias

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  1. Strauss, O. The retinal pigment epithelium in visual function. Physiological reviews. 85, 845-881 (2005).
  2. Ach, T., et al. Quantitative autofluorescence and cell density maps of the human retinal pigment epithelium. In....

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Etiquetas

Fundus AutofluorescenceRetinal Pigment EpitheliumConfocal Scanning Laser OphthalmoscopyLipofuscin QuantificationAge Related Macular DegenerationGeographic Atrophy AnalysisHigh Speed Image AcquisitionMean of 9 FramesInternal Fluorescent ReferencePupil Dilation Protocol

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