Flujo de microfluidos Cámaras utilizando sangre reconstituida a Modelo Hemostasia y Transfusión de Plaquetas<em&gt; In Vitro</em

Britt Van Aelst; Hendrik B. Feys; Rosalie Devloo; Philippe Vandekerckhove; Veerle Compernolle

doi:10.3791/53823

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Artículo de método

Flujo de microfluidos Cámaras utilizando sangre reconstituida a Modelo Hemostasia y Transfusión de Plaquetas

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DOI:

10.3791/53823

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19 de marzo de 2016

Britt Van Aelst¹ , Hendrik B. Feys¹ , Rosalie Devloo¹ , Philippe Vandekerckhove²^,³^,⁴ , Veerle Compernolle¹^,²^,⁴

¹Transfusion Research Center, Belgium Red Cross-Flanders, ²Blood Service, Belgium Red Cross-Flanders, ³Department of Public Health and Primary Care, Catholic University of Leuven, ⁴Faculty of Medicine and Health Sciences, University of Ghent

En este artículo

Resumen

La transfusión y hemostasia de plaquetas se modeló utilizando cámaras de reconstitución de sangre y flujo microfluídico para investigar la función de las plaquetas de los bancos de sangre. Los datos demuestran las consecuencias de la lesión por almacenamiento de plaquetas sobre la hemostasia, in vitro.

Resumen

Las plaquetas sanguíneas preparadas para la transfusión pierden gradualmente la función hemostática durante el almacenamiento. La función de las plaquetas puede investigarse utilizando una variedad de experimentos in vitro (indirectos), pero ninguno de ellos es tan completo como las cámaras de flujo microfluídico. En este protocolo, se utiliza la reconstitución de sangre fresca trombocitopénica con plaquetas almacenadas en el banco de sangre para simular la transfusión de plaquetas. A continuación, la muestra reconstituida se perfunde en cámaras de flujo microfluídicas que imitan la hemostasia de las proteínas de la matriz subendotelial expuestas. Los efectos de la donación de sangre, el transporte, la separación de componentes, el almacenamiento y la inactivación de patógenos se pueden medir en diseños experimentales pareados. Esto permite una comparación fiable del impacto que cada manipulación en la preparación de componentes sanguíneos tiene sobre la hemostasia. Nuestros resultados demuestran el impacto de los ciclos de temperatura, las tasas de cizallamiento, la concentración de plaquetas y la duración del almacenamiento en la función de las plaquetas. En conclusión, este protocolo analiza la función de las plaquetas del banco de sangre y, en última instancia, ayuda a optimizar la cadena de procesamiento, incluida la flebotomía, el transporte, la preparación de componentes, el almacenamiento y la transfusión.

Introducción

Hemostasis requiere la actividad combinada y regulada de células, proteínas, iones y tejidos en un contexto espacio-temporal restringida ^1. actividad no controlada puede conducir a hemorragia o trombosis y la morbilidad o la mortalidad en un espectro de trastornos relacionados con la coagulación de la sangre. Un experimento de la cámara de flujo de microfluidos es una técnica difícil que imita hemostasis in vitro. Este enfoque permite la investigación de la compleja interacción de procesos que intervienen en la hemostasia con el protagonismo de las plaquetas sanguíneas.

Después de una lesión vascular, las plaquetas se ....