Murino de próstata micro-disección y la castración quirúrgica

Resumen

Este manuscrito describe los protocolos de próstata micro-disección y la castración quirúrgica en el ratón de laboratorio. También se representan los resultados representativos producidos por estos protocolos. Finalmente, se discuten las ventajas y utilización de estos protocolos.

Resumen

Los modelos de ratón se utilizan ampliamente para estudiar el cáncer de próstata y otras enfermedades. El ratón es un excelente modelo con el que estudiar la próstata y se ha utilizado como sustituto de los descubrimientos sobre el desarrollo y las enfermedades de la próstata humana. La microdisección de la próstata permite el estudio coherente de la anatomía de la próstata, la histología y las características celulares específicas del lóbulo en ausencia de contaminación de otros tejidos. La testosterona afecta el desarrollo de la próstata y las enfermedades. La terapia de privación de andrógenos es un tratamiento común para los pacientes con cáncer de próstata, pero muchos tumores de próstata se vuelven resistentes a la castración. La castración quirúrgica de modelos de ratón permite estudiar la resistencia a la castración y otras facetas de la biología hormonal en la próstata. Este procedimiento puede combinarse con la reintroducción de testosterona o la regeneración hormonal de la próstata, un método poderoso para estudiar los linajes de células madre en la próstata. Juntas, la microdisección de la próstata y la castración quirúrgica abren una multitud de oportunidades para una investigación sólida y consistente del desarrollo y la enfermedad de la próstata. Este manuscrito describe los protocolos para la microdisección de próstata y la castración quirúrgica en el ratón de laboratorio.

Introducción

La próstata es el sitio más común de cáncer en hombres en los EE.UU.. Cerca de 220.000 hombres cada año serán diagnosticados con cáncer de próstata, y aproximadamente 27.000 hombres sucumbirán a la enfermedad ^1. Los hombres tienen un riesgo de 1 en 7 tiempo de vida de un diagnóstico de cáncer de próstata en los EE.UU. ^1. Hiperplasia de próstata benigna (BPH), un agrandamiento no canceroso relacionada con la edad de la próstata, es también una condición generalizada, que afecta a más del 80% de los hombres de más de 80 ^2. Como tal, la próstata es el foco de una investigación considerable.

Los modelos de rat....

Protocolo

Este protocolo se reúne y sigue las directrices establecidas por el Comité Institucional de Cuidado y Uso de Animales de la Universidad Johns Hopkins.

1. micro-disección de una próstata de ratón

1. La eutanasia a los ratones por asfixia con dióxido de carbono o un método alternativo autorizado conforme a las directrices para el cuidado y uso de animales institucionales.
2. Pin el ratón en una posición supina a una tabla de disección por poner un pasador a través de cada una de las cuatro patas.
3. Pulverizar el abdomen con 70% de etanol.
4. Mantenga la piel de la parte inferior del abdomen con unas pinzas, y usar las tijeras para ....

Resultados

Todos los seis lóbulos prostáticos fueron retirados de un ratón a través de la próstata micro-disección (Figura 1). El tracto urogenital completa (UGT) se compone de todos los lóbulos de la próstata, la vejiga, vesículas seminales y la uretra (Figura 1a). El conducto deferente se une a la uretra, pero no es necesaria para la próstata micro-disección, y por lo tanto se pueden separar antes de la retirada de la UGT cortando la uretra (Figura 1b-1c).......

Discusión

Próstata micro-disección permite la experimentación de lóbulos específica y el análisis de la próstata de ratón (Figura 1). En modelos de ratones genéticamente modificados, los fenotipos se pueden observar en un lóbulo que no se ve en otros. Además, para el análisis histológico, este protocolo asegura que la máxima cantidad de tejido de la próstata puro puede ser seccionadas y teñidas, sin otros tejidos del tracto urogenital presentes en la sección. Por último, para los experimentos de una sola célula, .......

Materiales

Lista de materiales utilizados en este artículo

Nombre	Empresa	Número de catálogo	Comentarios
Herramientas quirúrgicas	Roboz	Various
Formaldehyde	Sigma	F8775
OCT medium	VWR	25608-930	Debe colocarse sobre hielo seco para congelar y almacenarse a -80 °C; C
PBS	Life Technologies	10010
Isoflurano	Johns Hopkins		También disponible de proveedores en línea
Pluma de cauterización	Medline ESCT002
Sutura de seda	AD Surgical	M-S330R19
heridas	Roboz	RS-9265

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