Con el fin de entender la fisiopatología del accidente cerebrovascular, es importante utilizar modelos fiables. En este trabajo se va a describir uno de los modelos de accidente cerebrovascular de uso más frecuente en los ratones, llamado el medio modelo de oclusión de la arteria cerebral (MCAO) (también llamado el filamento de sutura intraluminal o modelo) con reperfusión.
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Artículo de método
Técnica quirúrgica para la oclusión de la arteria cerebral media y la reperfusión del movimiento inducidos en ratones
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Resumen
Resumen
El accidente cerebrovascular es la principal causa de muerte en el mundo y sigue siendo una de las causas principales de discapacidad adultas a largo plazo. Alrededor del 87% de los accidentes cerebrovasculares son isquémicos en su origen y se producen en el territorio de la arteria cerebral media (ACM). Actualmente la única Administración de Alimentos y Medicamentos (FDA) aprobado por la FDA para el tratamiento de esta enfermedad devastadora es el activador del plasminógeno tisular (tPA). Sin embargo, el tPA tiene una pequeña ventana terapéutica para la administración (3 - 6 horas), y sólo es eficaz en el 4% de los pacientes que lo reciben. La investigación actual se centra en la comprensión de la fisiopatología del accidente cerebrovascular con el fin de encontrar posibles dianas terapéuticas. Por lo tanto, los modelos fiables son cruciales, y el modelo (MCAO) oclusión de la ACM (también llamado modelo filamento o hilo de sutura intraluminal) se considera que es el modelo quirúrgico más clínicamente relevante de accidente cerebrovascular isquémico, y es bastante no invasivo y fácilmente reproducible. Típicamente, el modelo MCAO se utiliza con los roedores, especialmente con los ratones debidoa todas las variaciones genéticas disponibles para esta especie. Aquí se describe (y presente en el video) cómo llevar a cabo con éxito el modelo MCAO (con reperfusión) en ratones para generar datos confiables y reproducibles.
Introducción
El accidente cerebrovascular es la causa principal de muerte quinta a nivel mundial, con una persona morir de la enfermedad cada 4 minutos. Más de 800.000 estadounidenses sufren un ictus cada año, lo que no sólo es devastador para el paciente, sino también para sus familias. El accidente cerebrovascular es la principal causa de discapacidad en los adultos y los gastos anuales se estima que es del orden de $ 1 billón el 36,5 pesar de muy pocas opciones de tratamiento son disponibles.
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Protocolo
Este protocolo y los experimentos reportados en el video fueron aprobados por el Comité LSUHSC-S Institucional de Cuidado y Uso de Animales y están en conformidad con las directrices del NIH.
NOTA: Hombre ratones C57BL / 6 que pesaban 25 a 29 g se utilizaron en este estudio. Los ratones se mantuvieron en una dieta de pienso de pellets de serie con libre acceso al agua, en virtud de un 12 h luz / oscuridad ciclo en jaulas ventiladas por separado. El procedimiento se realiza bajo condiciones estériles usando técnicas estériles (por ejemplo, guantes estériles, instrumentos estériles).
Preparativos 1. Pre-quirúrgicos
- Inducir la anestes....
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Resultados
Los ratones se sometieron a una isquemia de 30 min inducida por MCAO cerebro (Figura 1), seguido de un período de reperfusión (24 hr y 1 sem se presentan aquí, pero la duración de la reperfusión puede ser variada). La mortalidad durante MCAO era mínima (aproximadamente 2%). isquemia posterior, la tasa de mortalidad (dentro de las primeras 24 horas) fue de alrededor de 26%.
Laser Doppler flujometría se utilizó .......
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Discusión
Desde su concepción hace 20 años, el modelo MCAO para el accidente cerebrovascular humano que implica la inserción de un filamento se ha utilizado en un gran número de estudios. Esto es principalmente debido al hecho de que imita lo que ocurre clínicamente en la forma más común de accidente cerebrovascular (es decir, ictus isquémico). El cuerpo estriado es más sensible a la isquemia de la corteza cerebral, y como tal, la longitud del tiempo de isquemia se traducirá en si tanto el cuerpo estriado y la corteza do.......
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Divulgaciones
Los autores no tienen nada que revelar.
Agradecimientos
Este trabajo fue financiado por el Instituto Nacional de Salud, el Instituto Nacional del Corazón, los Pulmones y la Sangre (NIH y NHLBI; HL125572-01A1) y el fondo de puesta en marcha LSUHSC-S a F.N.E. Gavins.
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Materiales
| Nombre | Empresa | Número de catálogo | Comentarios |
|---|---|---|---|
| Ratones machos C57BL/6 | Laboratorio Jackson, Bar Harbor, ME | #000664 | |
| Clorhidrato de ketamina | Morris & Dickson, Shreveport, LA | 67457-108-10 | |
| Xilacina | Akorn, Inc, Lake Forest, IL | NADA# 139-236 | |
| Sistema de control de temperatura de CC | FHC, Bowdoin, ME | 40-90-8D | |
| Mini sonda de termistor rectal | FHC, Bowdoin, ME | 40-80-5D-02 | |
| Almohadilla térmica | FHC, Bowdoin, ME | 40-90-2-06 | |
| Maquinillas | Amazon, Bellevue, WA | #64800 | |
| 70% etanol | Productos médicos mundiales, Bristol, PA | #51011023 | |
| Microscopio de disección | Olympus, Center Valley, PA | SZ40 | |
| rectas) | Fine Science Tools, Foster City, CA | 11251-20 | |
| Pinzas Dumont (45 grados; punta doblada) | Fine Science Tools, Foster City, CA | 11297-00 | |
| Clip para micro vasijas | Fine Science Tools, Foster City, CA | 18055-05 | |
| Micro tijeras de disección de resorte (rectas) | Fine Science Tools, Foster City, CA | 14088-10 | |
| Retractores (romos) | Fine Science Tools, Foster City, CA | 18200-11 (Helen usada 17022-13) | |
| Aplicadores con punta de algodón | Fisher Scientific, Waltham, MA | 23-400-100 | |
| Esponjas de gasa | Covidien, Mansfield, MA | #9023 | |
| 7-0 sutura quirúrgica trenzada de seda | Braintree Scientific, Braintree, MA | SUT-S103 | |
| Cloruro de sodio al 0,9% Morris | & Dickson, Lake Forest, IL | 0409-4888-20 | |
| 6-0 sutura MCAO media (monofilamento recubierto de caucho de silicona) | Doccol Corporation, Sharon, MA | 6023PKRe | |
| Sofsilk 6-0 seda trenzada recubierta de silicona | Covidien, Mansfield, MA | SUT-14-1 | |
| Carprofeno | Pfizer, Nueva York, NY | NADA# 141-199 | |
| Puralube | Dechra, Norwich, Reino Unido | NDC 17033-211-38 | |
| Controlador de temperatura Physitemp | Aparato de Harvard, Holliston, MA | Lámpara de calor TCAT-2AC | |
| Aparato de Harvard, Holliston, MA | HL-1 | ||
| Sonda láser doppler | AD Instruments, Colorado Springs, CO | MSP100XP | |
| Placas de 24 pocillos | Fisher Scientific, Waltham, MA | #353226 | |
| Fosfato tamponado solución salina (PBS) | Life Technologies, Carlsbad, CA | 20012-050 | |
| Hojas de afeitar de un solo filo | Fisher Scientific, Waltham, MA | 12-640 | |
| Cloruro de 2,3,5-trifeniltetrazalio (TTC) | Sigma Aldrich, St. Louis, MO | T8877-50G | |
| Cortadora de matriz de cerebro de ratón | Braintree Scientific, Braintree, MA | BS-A 5000C | |
| Baño de agua | VWR, Radnor, PA | #182 | |
| 10% formalina | Sigma Aldrich, St. Louis, MO | HT501128-4L | |
| ImageJ software de análisis | NIH, Bethesda, MD | gratuita | |
| Retractor | Compra de dispositivos médicos, Newcastle, CA | MP-740 |
Referencias
- Go, A. S., et al. Heart disease and stroke statistics-2014 update: a report from the American Heart Association. Circulation. 129 (3), e28-e292 (2014).
- Marks, M. P., et al.
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Reimpresiones y permisos
