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Artículo de método

Peritonitis estandarizada por stent de colon ascendente en ratas: un modelo animal simple y factible para inducir lesión renal aguda séptica

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DOI:

10.3791/54448

15 de febrero de 2022

En este artículo

Resumen

La lesión renal aguda (IRA) es una complicación grave en el paciente crítico y se relaciona con un aumento de la mortalidad. Aquí, presentamos un modelo in vivo confiable y reproducible para imitar la LRA en condiciones inflamatorias que podría contribuir a la comprensión de la patogénesis de la LRA séptica.

Resumen

La LRA en pacientes sépticos se asocia con un aumento de la mortalidad y un mal pronóstico, a pesar de los grandes esfuerzos para refinar la comprensión de su fisiopatología. Aquí, se presenta un modelo in vivo que combina un foco séptico estandarizado para inducir LRA y una configuración de cuidados intensivos (UCI) para proporcionar un monitoreo hemodinámico avanzado y una terapia comparable en la sepsis humana. La sepsis es inducida por la peritonitis estandarizada del stent del colon ascendente (sCASP). La LRA se investiga funcionalmente mediante la medición de muestras de sangre y orina, así como histológicamente mediante la evaluación de las puntuaciones histopatológicas. Además, la monitorización hemodinámica avanzada y la posibilidad de tomar muestras repetitivas de gases en sangre permiten un análisis diferenciado de la gravedad de la sepsis inducida.

El método sCASP es un método estandarizado, fiable y reproducible para inducir LRA séptica. La configuración de cuidados intensivos, la monitorización hemodinámica y de intercambio gaseoso continua, la baja tasa de mortalidad, así como la posibilidad de realizar análisis detallados de la función renal y las deficiencias son ventajas de esta configuración. Por lo tanto, el método descrito puede servir como un nuevo estándar para las investigaciones experimentales de la LRA séptica.

Introducción

La sepsis sigue siendo la principal causa de muerte en las unidades de cuidados intensivos (UCI) no cardíacas, con tasas de mortalidad del 30 al 50% ≈1,2,3. Una característica distintiva de la sepsis grave y el shock séptico es la lesión renal aguda que provoca un aumento adicional de la tasa de mortalidad cuando se asocia a disfunción orgánica a distancia, como insuficiencia cardíaca y respiratoria 4,5,6. La incidencia global de LRA en pacientes de ....

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Protocolo

Todos los procedimientos con animales fueron aprobados por el Comité de Cuidado y Uso de Animales de Laboratorio del Distrito de Unterfranken, Alemania, y se llevaron a cabo de acuerdo con la Declaración de Helsinki.

1. Preparación quirúrgica e instalación de monitorización invasiva y medicación continuada

  1. Anestesiar ratas Sprague-Dawley usando isoflurano administrado por un vaporizador de precisión a una concentración y caudal aprobados por el organismo de supervisión de investigación animal de la institución local y/o el equipo veterinario. Confirme la profundidad adecuada de la anestesia observando la frecuencia ....

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Resultados

Como ya se publicó previamente por Schick et al.8, demostramos los siguientes resultados.

Inducción de sepsis sin mortalidad
En el modelo CASP, la sepsis es inducida por una fuga continua de bacterias intraluminales localizadas en el colon que ascienden a la cavidad abdominal, lo que resulta en peritonitis fecal y bacteriemia. De este modo, el tamaño del catéter implantado regula la sa.......

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Discusión

La fisiopatología de la LRA séptica sigue siendo desconocida en su complejidad. La investigación clínica y los ensayos en pacientes no permitirán obtener nuevos conocimientos con respecto a los cambios histopatológicos, las alteraciones de la microcirculación o las interacciones farmacológicas a nivel celular15. Se ha postulado previamente que existe la necesidad de modelos animales nuevos y mejorados para investigar la lesión renal aguda asociada a la sepsis

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Divulgaciones

Los autores no tienen nada que revelar.

Agradecimientos

M.A. Schick y N. Schlegel recibieron financiación de la Deutsche Forschungsgemeinschaft (DFG) SCHL 1962/2-1 y SCHL 1962/4-1.

....

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Materiales

Lista de materiales utilizados en este artículo
NombreEmpresaNúmero de catálogoComentarios
Ratas Sprague-DawleyJanvier Labs, Francia
  Isoflurano CPcp-pharma, Burgdorf, Alemania
catéter de polietileno PE 10; 30mA. Hartenstein, Würzburg, Alemania0,58x0,96 mm
Giratorio (375/D/20)Instech, Plymouth Meeting, PA, EE.UU. (375/D/20)
correas de botón de plásticoInstech, Plymouth Meeting, PA, EE. UULW105S
B. Braun; Melsungen, AlemaniaPerfusor fm
ch. 10B.Braun Melsungen AG, Alemaniacatéter de succión typy " Ideal"; cap. 10
sineturaSyneture; USASurgipro; Monofilamento Polipropileno 4-0
suturaEthicon; EscociaProlene; Catéter de polipropileno 5-0
14G-i.v.BD Insynte; BD Vialon; Madrid; España14GA catéter i.v.
bastoncillos de algodónNOBA Verbandmittel Danz GmbH u Co KG; Wetter; Alemania
respirador para roedoresHugo Sachs Elektronik KG, Alemaniarespirador para roedores, Tipo:7025
MidazolamRatiopharm, AlemaniaMidazolam
ThermodilutioncatéterADInstruments, Spechbach, Alemania
ácido p-aminohipúricoSigma-Aldrich; San Luis; Sal.; A3759-25G
InulinaSigma-Aldrich; San Luis; Inulina de EE. UU.-FITC; F3272-1G
FormaldehídoOtto Fischar GmbH & CoKG; Saarbrü cken, AlemaniaFormaldehído 3,5%
CiclopentanoMerck; Darmstad; AlemaniaUvasol: exfoliante a base de alcohol 2-metilbutano
Schü LKE & Mayr GmbH, Norderstedt; 45g de 2-Propanol, 10 g de 1-Propanol por 100 g de
solución de povidona yodadaB.Braun Melsungen AG, AlemaniaBraunol, 7,5 g de povidona yodada por 100 g
. Perfusor Catéter de succión sódica del ácido p-aminohipúrico de EE. UU

Referencias

  1. Angus, D. C., et al. Epidemiology of severe sepsis in the United States: analysis of incidence, outcome, and associated costs of care. Crit Care Med. 29, 1303-1310 (2001).
  2. Dellinger, R. P., et al.

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Reimpresiones y permisos

Etiquetas

Monitoreo hemodin micomuestreo de gases sangu neospuntuaciones histopatol gicasconfiguraci n de cuidados intensivosfoco s ptico estandarizadoan lisis de la funci n renalm todo de inducci n de sepsismodelo experimental de LRA

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