El siguiente informe describe cómo replicar el modelo de roedores de la neuropatía óptica isquémica anterior no arterítica (rNAION), utilizando los parámetros apropiados de tinte, lente de contacto y láser. También revelamos los pasos apropiados para evaluar la lesión rNAION in vivo.
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Artículo de método
El modelo de roedor de la anterior no arterítica neuropatía óptica isquémica (rNAION)
En este artículo
Resumen
Resumen
La neuropatía óptica isquémica anterior no arterítica (NAION) es una lesión isquémica focal del nervio óptico que afecta a 1/700 individuos a lo largo de su vida. NAION produce edema del nervio óptico, pérdida selectiva de las neuronas de las células ganglionares de la retina (RGC) y atrofia del nervio óptico. Se ha desarrollado un modelo de roedor de NAION que expresa la mayoría de las características y secuelas de NAION, que es aplicable tanto a ratas como a ratones. Este modelo utiliza una aplicación láser focal de 532 nm de longitud de onda para iluminar un tinte fotoactivo, la rosa de Bengala (RB), para causar daño capilar y fugas en el nervio óptico anterior objetivo (la región laminar). Después de la inducción de rNAION, hay una isquemia temprana del nervio óptico, edema del nervio óptico e inflamación intraneural, seguida de RGC selectivo y pérdida axonal. Dado que el nervio óptico es un tracto de sustancia blanca del SNC, el modelo rNAION es aplicable a los estudios mecanicistas de la isquemia selectiva de la sustancia blanca, así como a los análisis neuroprotectores y a corto y largo plazo de la respuesta glial y neuronal a la isquemia.
Introducción
Anterior no arterítica neuropatía óptica isquémica (NOINA) es una lesión isquémica focal de la porción anterior del nervio óptico (NO) 1. NOIA-NA es la causa más común de pérdida repentina de la visión relacionada nervio óptico en individuos de más de 50 años 2. El mecanismo se cree que es un síndrome compartimental que da lugar a un edema intraneural, y provoca la compresión de los capilares que irrigan los axones en el nervio óptico 3.
Dado que el EN es en realidad un tracto del sistema nervioso central (CNS), el NOINA roedor modelo (rNAION) se puede utilizar para estudiar los mecanismos y las respuestas....
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Protocolo
Este protocolo fue aprobado por la Universidad de Maryland Institucional Cuidado de Animales y el Utilización (IACUC; Baltimore, MD, EE.UU.)
1. Estructura del ensayo
- Hacer una lente de contacto personalizado diseñado a partir de un claro grado óptico circulares 7 mm de diámetro, de plexiglás de 3 mm de espesor. Cortar las lentes circulares con un taladro de columna. Utilice una broca estándar para hacer la curva interna, y finalmente pulir las curvas exteriores e interiores utilizando un pulidor de lentes de contacto de grano ultrafino (1000/3000).
- Preparar 2,5 mM Rosa de Bengala (RB) de pH 7,4 buffer fosfato salino (....
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Resultados
La visualización de lentes de contacto permitido central de la retina (Figura 1). El punto focal con láser ilumina el disco óptico en la parte posterior de la retina (Figura 2). La retina normal un-inducido se muestra fotografiada por lámpara de hendidura bio-microscopio (Figura 3A) y por SD-OCT (Figura 3B y 3C). Durante la inducción láser, cuando no hay colorante está presente en la circulación, la luz láser no da.......
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Discusión
Mientras que hay un número de modelos de lesión del nervio óptico (óptica aplastamiento del nervio 12, óptica transección del nervio 13, y PION 14), el modelo rNAION es humano, adaptable a ratas y ratones. Se asemeja más a la condición clínica humana de NOINA. Esta condición incluye anterior progresiva edema del nervio óptico, un síndrome compartimental del nervio óptico anterior, isquemia focal axonal, aislado daño axonal de la retina de células ganglionares y la pérdida durante un tran.......
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Divulgaciones
Los autores tienen nada que revelar.
Agradecimientos
Agradecemos a los muchos estudiantes y compañeros que han trabajado en este modelo para mejorar su eficacia, y para comprender sus mecanismos. Un agradecimiento especial al Dr de. Mary Johnson (Universidad de Maryland-Baltimore), Nitza Goldenberg-Cohen (Hospital Schneiderman niños, Petah-Tikva, Israel), Charles Zhang (Einstein Medical College, Bronx, Nueva York), y Valerie Touitou (Hopital Salpetrie, París, Francia). Este estudio fue financiado en parte por SR1 EY015304 al SLB.
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Materiales
| Nombre | Empresa | Número de catálogo | Comentarios |
|---|---|---|---|
| Láser de 50 mW 532 nm | Láser oftálmico estándar | Iridex | |
| - 100 mW Láser de 532 nm | luminiscencia láser | Sustituto de iridex | |
| Adaptador de lámpara de hendidura láser | Iridex | SMA Adaptador acoplado para salida láser | |
| Medidor láser Fieldmate coherente con sensor de termopila | Otros | coherentes también apropiados | |
| Examen oftálmico Biomicroscopio de lámpara de hendidura | Varios | Haag-Streit es el mejor; versiones más baratas disponibles en eBay | |
| Rose Bengal | Sigma | 330000-1G | Agente fotoinductor |
| Fondo de ojo Lente de contacto o cubreobjetos de vidrio | personalizado/Cantor y Nissel (Reino Unido) | Lente de plástico planoconvexa diseñada a medida para examen ocular e inducción | |
| Tropicamida 1% | |||
| Compuesto pulidor Tamiya | Tamiya, INC | 87068 | lente de contacto pulidora |
| 2.5% Hipromelosa (Goniovisc)/1% Metilcelulosa | Agente de acoplamiento de lentes de contacto | farmacéuticos | |
| 2.5% Neosinefrina Gotas oftálmicas Agente | dilatador | de pupila de Alcon labs | |
| Tropicamida 1% | Agente dilatador | de pupila de Alcon labs | |
| 0.5% Proparacaína | Anestésico tópico | ||
| Jeringa de insulina de aguja fusionada de 30 G | Varios | Varios | para inyección intravenosa de rosa bengala |
| Pomada antibiótica oftámica con dexametasona añadida (Ungüento antibiótico triple) | Varios | Varios | Aplicar después de la inducción para minimizar la cicatrización de la córnea |
| Heidelberg Corporation Dominio espectral-Tomógrafo de coherencia óptica | Heidelberg Corporación | para las mediciones de coherencia óptica de referencia y post-inducción; no esencial para la inducción |
Referencias
- Banik, R. Nonarteritic Anterior Ischemic Optic Neuropathy: An Update on Demographics, Clinical Presentation, Pathophysiology, Animal Models, Prognosis, and Treatment. J. Clin. Experimental Ophthalmol. 10, 1-5 (2013).
- IONDT study group.
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Reimpresiones y permisos
