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Artículo de método

Simétrica bihemisférica post-mortem del cerebro de corte para estudiar sana y patológica condiciones cerebrales en humanos

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DOI:

10.3791/54602

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18 de diciembre de 2016

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En este artículo

Resumen

Procedimientos de corte cerebrales organizados son necesarios para correlacionar fenómenos neuropsiquiátricos específicos con diagnósticos neuropatológicos definitivas. esquejes cerebrales se realizan de manera diferente en base a diversas contingencias clínico-académica. Este protocolo describe un procedimiento de corte cerebro bihemisférica simétrica para investigar las diferencias hemisféricas en patologías del cerebro humano y para maximizar las técnicas biomoleculares / neuroimagen actuales y futuras.

Resumen

Neuropatólogos, a veces, se sienten intimidados por la cantidad de conocimiento necesario para generar diagnósticos definitivos para los fenómenos neuropsiquiátricos complejos descritos en aquellos pacientes en los que se ha solicitado una autopsia del cerebro. A pesar de los avances de las ciencias biomédicas y de neuroimagen han revolucionado el campo de los trastornos neuropsiquiátricos, que también han generado la idea errónea de que las autopsias cerebrales sólo tienen un valor de confirmación. Esta falsa idea creado una reducción drástica de las tasas de autopsia y, en consecuencia, una posibilidad reducida para realizar investigaciones más detalladas neuropatológicos y amplios, que son necesarios para comprender numerosos aspectos normales y patológicas todavía desconocidas del cerebro humano. El método de estimación tradicionales de correlación entre los fenómenos observados y neuropsiquiátricos correspondiente localización / caracterización de sus posibles correlatos neurohistológicos sigue teniendo un valor innegable. En el contexto de neuropsychienfermedades psi-, el método clínico-patológica tradicional sigue siendo la mejor metodología posible (ya menudo la única disponible) para enlazar características neuropsiquiátricas únicas para sus substratos neuropatológicos correspondientes, ya que se basa específicamente en la evaluación física directa de los tejidos del cerebro. La evaluación de cerebros postmortem del cerebro se basa en procedimientos que varían entre los diferentes centros de neuropatología corte. esquejes cerebrales se llevan a cabo de una forma relativamente extensa y sistemática sobre la base de las diversas contingencias clínicos y académicos presentes en cada institución. Una metodología de corte cerebro bihemisférica anatómicamente más inclusiva y simétrica al menos debería ser utilizado con fines de investigación en neuropatología humana para investigar de manera coherente, en profundidad, en condiciones normales como patológicas con las peculiaridades del cerebro humano (es decir, la especialización hemisférica y lateralización de concreto funciones). Tal método proporcionaría un Colle más completacción de cerebros neuropathologically bien caracterizados disponibles para las técnicas biotecnológicas y de neuroimagen actuales y futuras. Se describe un procedimiento de corte cerebro bihemisférica simétrica para la investigación de las diferencias hemisféricas en patologías del cerebro humano y para uso con actuales, así como las técnicas biomoleculares / neuroimagen futuras.

Introducción

Neuropatólogos tienen el privilegio científica, el honor intelectual, y la obligación de diagnóstico para evaluar los cerebros humanos. Durante muchas décadas, las descripciones clínicas detalladas de las enfermedades del cerebro y los grandes esfuerzos Individuar han llevado a cabo sus posibles correlatos neurohistológicos en cerebros postmortem humanos. Históricamente, estos esfuerzos representan la modalidad más productiva mediante el cual las ciencias médicas y la neurología, en particular, avanzaron en la era moderna. Gracias a neuropatólogos anteriores eminentes y su dedicación, determinación, becas y sorprendente capacidad para discriminar entre los tejidos no....

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Protocolo

Los procedimientos que implican tejidos humanos postmortem han sido revisados ​​por la junta de revisión institucional y exenta en virtud de 45 CFR (Código de Regulaciones Federales).

NOTA: El protocolo describe un procedimiento de corte cerebro bihemisférica simétrica para la evaluación cerebral postmortem finalizado para los estudios neuropatológicos en los seres humanos. serán excluidos descripciones detalladas de los aparatos, instrumentos, materiales y suministros necesarios para realizar el corte cerebro humano. Materiales y suministros para las disecciones del cerebro se seleccionan según el criterio del investigador único y se basan en instrumentos de autopsia permitidos ....

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Resultados

Protocolo de cuerpo entero

El tiempo dedicado a un solo procedimiento de corte simétrico bihemisférica fijo cerebro se estima en 1 h (con exclusión del tiempo dedicado creación de la mesa de disección, las herramientas y las superficies de corte, etiquetado,. Etc). El tiempo requerido para una sola alterna bi-hemisférica simétrica congelado y el cerebro fijo procedimiento de corte se estima para tomar 2 h. Se puede tomar.......

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Discusión

Este método de corte cerebro se puede adaptar a las necesidades específicas de cada laboratorio de neuropatología (por ejemplo, mediante la reducción del número de regiones cerebrales para evaluar para cada hemisferio) al tiempo que conserva el procedimiento de corte simétrica bihemisférica como una de sus características principales. Este protocolo propuesto podría ser utilizado para procedimientos de rutina (centros neuropatológicos orientadas a la investigación) o sólo cuando sea necesario (estudios específicos de or.......

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Divulgaciones

Los autores no tienen nada que revelar.

Agradecimientos

Agradecemos a los miles de donantes de cerebros, pacientes, familias y neurocientíficos de todo el mundo que, durante los últimos dos siglos y a través de sus generosos dones y esfuerzos intelectuales, ayudaron a descubrir cómo funciona el cerebro humano, a comprender las devastadoras enfermedades cerebrales y a desarrollar tratamientos para las mismas. Agradecemos especialmente a la Sra. Cecilia V. Feltis por editar y revisar este manuscrito.

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Materiales

Lista de materiales utilizados en este artículo
NombreEmpresaNúmero de catálogoComentarios
Copia del consentimiento informado firmado que permita la autopsia y la donación de cerebro para uso en investigación.
Historia clínica detallada del sujeto, que debe incluir una descripción detallada de cualquier síntoma y signo neurológico y psiquiátrico.
Grabaciones de video médicas o no médicas cuando estén disponibles (especialmente útiles en el campo de los trastornos del movimiento). Parientes más cercanos se requiere el consentimiento de la víctima.
Escala de neuroimagen, neurofisiología, neuropsiquiatría y evaluación o clinicometría.
Datos genéticos y de antecedentes familiares. Revisión de informes genéticos, si se diagnosticaron enfermedades neurogenéticas.
contenedor de histologíaELECTRON MICROSCOPY SCIENCES64233-24
Casetes de histologíaVWR18000-142 (orange)
Casetes de histologíaVWR18000-132 (navy)
Mangos de cuchillos y hojas desechablesELECTRON MICROSCOPY SCIENCES62560-04
Hojas largasMICROSCOPÍA ELECTRÓNICA SCIENCES62561-20
Hoja desechable Mangos de cuchilloELECTRÓNICA MICROSCOPY SCIENCES72040-08
Hojas de bisturíELECTRÓNICA MICROSCOPY SCIENCES72049-22
Accu-Punch 2 mmELECTRÓNICA MICROSCOPY SCIENCES69038-02 
Contenedores de poliestireno – estérilELECTRON MICROSCOPY SCIENCES64240-12
Tablero de disecciónELECTRON MICROSCOPY SCIENCES63307-30
Solución de formol, tamponada neutra, 10%Sigma-AldrichHT501128 SIGMA
Solución de hematoxilina, branquia n.º 2Sigma-AldrichGHS280  Solución SIGMA
Eosina Y,Sigma-AldrichHT1102128  SIGMA
anti-beta-amiloideCovance, Princeton, NJSIG-392201:500
anti-tauThermo Fisher ScientificMN10201:500
anti-alfa-sinucleínaAbcamab277661:500
anti-fosfo-TDP43Cosmo Bio Co.TIP-PTD-P021:2000
Cámara digitalCualquier
máquina de sellado de impulsos de cabeza Grainger5ZZ35
acuosa

Referencias

  1. Braun, B., Stadlober-Degwerth, M., Hajak, G., Klunemann, H. H. 100th anniversary of Perusini's second case: patient RM and his kindred. Am. J. Alzheimers Dis. Other Demen. 25, 189-192 (2010).
  2. Jellinger, K. A. Neuropathology of sporadic ....

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