Artículo de método

La constricción aórtica mínimamente invasiva transversal en ratones

DOI:

10.3791/55293

14 de marzo de 2017

En este artículo

Resumen

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Mínimamente invasiva constricción de la aorta transversal (MTC) conserva los elementos esenciales de la constricción de la aorta transversal regular (TAC) al tiempo que elimina el uso de un ventilador con intubación traqueal. Demuestra ser un método altamente deseable para los estudios de alto rendimiento de sobrecarga ventricular izquierda, sobre todo en estudios de traducción.

Resumen

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Mínimamente invasiva constricción de la aorta transversal (MTC) es un método más deseable para la constricción de la aorta transversal en ratones que a tórax abierto constricción de la aorta transversal estándar (TAC). Aunque la constricción aórtica transversal es un método altamente funcional para la inducción de alta presión en el ventrículo izquierdo, que es un procedimiento más difícil y prolongado debido a su uso de la ventilación artificial con la intubación traqueal. TAC es a menudo también menos de supervivencia, como el método más reciente, MTAC, ni requiere el corte de las costillas y los músculos intercostales ni la intubación traqueal con una configuración de la ventilación. En MTAC, en oposición a una toracotomía para acceder a la cavidad torácica, el arco aórtico se alcanza a través de una incisión de línea media en el cuello anterior. La tiroides se tira hacia atrás para revelar la horquilla esternal. El esternón se corta posteriormente hasta el segundo nivel de costilla, y el arco aórtico se alcanza simplemente mediante la separación de los tejidos conectivos y el timo. Deallí, una sutura puede ser envuelto alrededor del arco y atado con un espaciador, y después el corte del esternón y de la piel se puede cerrar. MTAC es una manera mucho más rápida y menos invasivo para inducir la hipertensión ventricular izquierda y permite la posibilidad de que los estudios de alto rendimiento. El éxito de la constricción se puede verificar usando alta frecuencia ecocardiografía transtorácica, en particular de color Doppler y de la onda de impulsos Doppler, para determinar las velocidades de flujo del arco aórtico y la izquierda y la arteria carótida derecha, la dimensión de los vasos sanguíneos, y la función ventricular izquierda y la morfología. Una constricción éxito también dará lugar a cambios histopatológicos significativos, tales como la hipertrofia de células del músculo cardiaco con fibrosis intersticial y perivascular. A continuación, se describe el procedimiento de MTAC, lo que demuestra cómo los cambios en los flujos resultantes en las arterias carótidas pueden ser examinados con la ecocardiografía, morfología general, y los cambios histopatológicos en el corazón.

Introducción

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El propósito general de este artículo es demostrar cómo transversal constricción de la aorta (TAC) en ratones puede ser modificado para producir una cirugía simple y más conveniente. TAC se introdujo por primera vez en 1991 1 y activar los biólogos moleculares para estudiar las vías celulares y moleculares que conducen a la hipertrofia en el ventrículo izquierdo y a la insuficiencia cardíaca, en particular en los pequeños animales con genomas manipulados 2, 3, 4, 5, 6. A pesar....

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Protocolo

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El protocolo sigue las directrices del Comité para el uso de animales vivos en la Enseñanza y la Investigación (CULATR) de la Universidad de Hong Kong.

1. Operación Preparación del Sitio

  1. Desinfectar el lugar de la operación con alcohol isopropílico al 75%. Ajustar la temperatura almohadilla térmica a 37 ° C para evitar cambios en el ritmo cardíaco y respiratorio del sujeto animal.
  2. Utilizar instrumentos quirúrgicos esterilizados en un esterilizador de desplazamiento por gravedad a 121 ° C durante 30 minutos o por otros métodos apropiados.
  3. Tome 2 - 4 agujas de calibre 30 y les curva con un soporte de aguja, co....

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Resultados

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MTAC permite la inducción de hipertensión significativa en el ventrículo izquierdo de una manera oportuna.

Como se ve en la Figura 1, la preparación de las principales herramientas para el procedimiento es simple y mínima, que requiere sólo 2-4 agujas de calibre 30 a curvar y en su lugar con un tubo de poliuretano. El procedimiento quirúrgico en sí también es menos complicado, en comparación con TAC, y se pued.......

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Discusión

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Rockman y sus colegas desarrollaron el primer método de constricción aórtica como método para estudiar la sobrecarga de presión en el corazón. Esta investigación permitió comenzar a descubrir las consecuencias celulares y moleculares de la hipertensión y la insuficiencia cardíaca 1. Un método mejorado, mínimamente invasivo constricción aórtica transversal (MTAC), proporciona un método susceptible, dependiente del tiempo para la inducción de ventricular izquierda sobrecarga de presión y la insufic.......

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Divulgaciones

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Los autores declaran que no tienen intereses financieros contrapuestos.

Agradecimientos

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Nos gustaría reconocer el Fondo para la Investigación de la Universidad de Ciencias de la Vida (ULS) de la Universidad Politécnica de Hong Kong para la prestación de Vevo 2100 sistema de ultrasonido. Un agradecimiento especial a la Dra Chunyi Wen de la División Interdisciplinaria de Ingeniería Biomédica, Universidad de Hong Kong Polytechnic, para la capacitación y facilitación. Este trabajo fue apoyado por el gobierno de Hong Kong RGC subvención GRF 17127215, 764812 y HKU6 / CRF / 11G a Billy Chow KC.

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Materiales

Lista de materiales utilizados en este artículo
NombreEmpresaNúmero de catálogoComentarios
1 inch 30 Gauge NeedlesBD, Franklin Lakes, NJ 07417, USA. 305128Curvada como en el procedimiento y Figura 1
>27 Aguja de calibreBD, Franklin Lakes, NJ 07417, EE. UU. 301629Hacer romo y liso para espaciador
6/0 DafilonB. Braun, 34212 Melsungen, Hessen, Alemania.C0933066
6/0 SilkamB. Braun, 34212 Melsungen, Hessen, Alemania.C0762067
Guantes estérilesA.R. Medicom, Inc (Asia), Hong Kong.
algodón fuerteMannings, Quarry Bay, Hong Kong.Centro comercial local
Depilatory CreamVeet (Hong Kong), Kwun Tong, Kowloon, Hong KongLocal Shopping Center
Lexer-Baby ScissorFST, Columbia Británica V7H 0A6, Canadá.14078-10
fórcep de iris curvadoFST, Columbia Británica V7H 0A6, Canadá.11065-07
Micro Olsen-Hegar Needle HolderWPI, Sarasota, FL 34240, EE. UU. 501989
Stereo MicrioscopeWPI, Sarasota, FL 34240, USA. PZMIII-BS
strong>GenTeal Eye GelNovartis, East Hanover, NJ 07936, EE. UU. Farmacia local
Heating PadKent Scientific Corporation, Torrington, CT 06790, EE. UU. DCT-20
Cinta quirúrgicaUnidad de Animales deLaboratorio
Ketamina y XilacinaUnidad Animales de Laboratorio
BetadinaUnidad Animales de Laboratorio
BuprenorfinaUnidadde Animales de Laboratorio
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Referencias

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  1. Rockman, H. A., et al. Segregation of atrial-specific and inducible expression of an atrial natriuretic factor transgene in an in vivo murine model of cardiac hypertrophy. Proc Natl Acad Sci U S A. 88 (18), 8277-8281 (1991).
  2. de Almeida, A. C., van Oort, R. J., Wehrens, X. H. Transverse aortic co....

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