Aislamiento de células tumorales circulantes en un modelo de ratón ortotópico de cáncer colorrectal

Susan Kochall; May-Linn Thepkaysone; Sebastián A. García; Alexander M. Betzler; Jürgen Weitz; Christoph Reissfelder; Sebastian Schölch

doi:10.3791/55357

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Aislamiento de células tumorales circulantes en un modelo de ratón ortotópico de cáncer colorrectal

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DOI:

10.3791/55357

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18 de julio de 2017

Susan Kochall¹ , May-Linn Thepkaysone¹ , Sebastián A. García¹ , Alexander M. Betzler¹ , Jürgen Weitz¹^,²^,³ , Christoph Reissfelder¹ , Sebastian Schölch¹^,²^,³

¹Department of Gastrointestinal, Thoracic and Vascular Surgery, Medizinische Fakultät Carl Gustav Carus, Technische Universität Dresden, ²German Cancer Consortium (DKTK), ³German Cancer Research Center (DKFZ)

En este artículo

Resumen

Describimos el establecimiento de tumores colorrectales ortotópicos mediante la inyección de células tumorales o organoides en el ciego de ratones y el subsiguiente aislamiento de células tumorales circulantes (CTC) de este modelo.

Resumen

A pesar de las ventajas de la fácil aplicabilidad y rentabilidad, los modelos de ratón subcutáneo tienen limitaciones severas y no simulan con precisión la biología tumoral y la diseminación de células tumorales. Se han introducido modelos de ratones ortotópicos para superar estas limitaciones; Sin embargo, estos modelos son técnicamente exigentes, especialmente en órganos huecos como el intestino grueso. Con el fin de producir tumores uniformes que crecen de forma fiable y metástasis, las técnicas estandarizadas de preparación e inyección de células tumorales son críticas.

Hemos desarrollado un modelo de ratón ortotópico de cáncer colorrectal (CRC) que desarrolla tumores muy uniformes y puede ser utilizado para estudios de biología de tumores, así como ensayos terapéuticos. Se inyectan células tumorales de tumores primarios, líneas de células bidimensionales (2D) o organoides tridimensionales (3D) en el ciego y, dependiendo del potencial metastásico de las células tumorales inyectadas, forman tumores altamente metastáticos. En adición,Los CTC se pueden encontrar regularmente. Aquí describimos la técnica de preparación de células tumorales tanto de líneas celulares 2D como de organoides 3D, así como el tejido tumoral primario, las técnicas quirúrgicas y de inyección, así como el aislamiento de CTCs de los ratones portadores de tumores y los consejos actuales para la resolución de problemas.

Introducción

El cáncer colorrectal (CCR) es una de las causas más comunes de muerte por cáncer en los países occidentales. ¹ Mientras que el tumor primario a menudo puede ser resecado, la aparición de metástasis distantes empeora drásticamente el pronóstico y a menudo conduce a la muerte. ² ^, ³ El correlato biológico de la metástasis son las células tumorales circulantes (CTC), que se separan del tumor, sobreviven en la circulación, se adhieren al epitelio en el órgano diana, invaden el órgano y en última instancia, crecen a nuevas lesiones. ⁴ Aunque se sabe que los CTC son ....