Estandarizó una biopsia de tejido adiposo abdominal utilizando un método de diatermia no realizado bajo anestesia local. Se produjeron tres casos de excesiva después de la operación sangrado fuera de 115 operaciones (2,61%). Concluimos que una biopsia quirúrgica de tejido adiposo abdominal utilizando un método de diatermia no puede aplicarse con seguridad a hombres sanos.
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Artículo de método
Una técnica para biopsia de tejido adiposo Abdominal subcutáneo mediante un método no-diatermia
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Resumen
Resumen
Biopsias de tejido adiposo ofrecen muestras de tejido que, en el análisis, pueden proporcionar interesantes descripciones de mecanismos relacionados con el metabolismo y la enfermedad. Para obtener biopsias de tejido adiposo subcutáneo en la zona abdominal, los investigadores y los médicos utilizan una cirugía o una técnica basada en la aguja. Sin embargo, biopsias quirúrgicas de grasa subcutáneas pueden ofrecer muestras de tejido que pueden proporcionar una visión más completa de las complejidades de índices biológicos en tejido adiposo blanco. Por lo general, una biopsia quirúrgica de tejido adiposo incluye un tratamiento de diatermia para la cauterización de los vasos de sanguíneos prevenir el sangrado excesivo. Sin embargo, efectos secundarios, como fogonazos y las lesiones de piel en el tejido, se han divulgado después de diatermia. Por lo tanto, el objetivo fue estandarizar una biopsia de tejido adiposo abdominal quirúrgica realizada bajo anestesia local utilizando un método no-diatermia. Se realizaron biopsias de tejido adiposo subcutáneo 115 en hombres sanos utilizando un método no-diatermia abdominal biopsia quirúrgica. Nuestros resultados mostraron tres casos de excesiva después de la operación sangrado fuera de 115 operaciones (2,61%). En conclusión, nuestra biopsia quirúrgica de tejido adiposo abdominal subcutáneo estandarizado utilizando un método de diatermia no puede aplicarse con seguridad a hombres sanos en la cabecera, con efectos secundarios mínimos.
Introducción
Biopsias de tejido adiposo ofrecen muestras de tejido que, en el análisis, pueden proporcionar una visión general perspicaz de mecanismos relacionados con el metabolismo y la enfermedad. Por ejemplo, se utilizan para el cáncer de mama tumor identificación1, ácido graso composición examen2e investigación sobre enfermedades metabólicas y hormonales importantes vías3. Para obtener biopsias de tejido adiposo subcutáneo en la zona abdominal, los investigadores y los médicos utilizan una cirugía o una técnica basada en la aguja. Sin embargo, las biopsias quirúrgicas de grasa subcutáneas pueden ofrecer muestras de tejido que pueden proporcionar una visión más completa de mecanismos biológicos complejos [por ejemplo, Mensajero (ARNm) el ácido ribonucleico expresión, análisis histológico, etc.]4 . Previamente han sido utilizados en adultos sanos4 y puede realizarse con seguridad en la noche5.
La técnica de biopsia de la aguja requiere liposucción intensa que puede destruir la integridad del tejido, y generalmente recupera una pequeña cantidad de tejido (100-500 mg)6. Estas muestras de tejido pueden no ser apropiadas para estudios de investigación compleja. Además, en comparación con la técnica de aguja, biopsias quirúrgicas de grasa subcutáneas pueden ofrecer muestras de tejido que pueden dibujar un cuadro más completo de varios índices inflamatorios (por ej., células T y B de la señalización); regulación del citoesqueleto; vías celulares; vías metabólicas de los lípidos, carbohidratos y aminoácidos. y fosforilación oxidativa vías4. La técnica de aguja incluye también, un mayor riesgo de contaminación de células de la sangre que la quirúrgica4, mientras que proporciona poca información sobre las regiones fibróticas del tejido4,7,8 .
Por lo general, una biopsia quirúrgica de tejido adiposo incluye un tratamiento de diatermia para la cauterización de los vasos sanguíneos para prevenir el sangrado excesivo9. Una diatermia también se utiliza para quemar y destruir los tejidos afectados por neoplasias y verrugas o tejidos que son infectados por la enfermedad9. Esta técnica es particularmente aplicable en neurocirugía y ojo cirugía9.
El uso excesivo de la diatermia puede conducir a la formación de tejido necrótico, que causan infecciones y retardando la cicatrización proceso10. De hecho, se han divulgado efectos secundarios como fogonazos y las lesiones de piel en el tejido después de diatermia9. Además, se han planteado preocupaciones sobre la toxicidad del humo quirúrgico publicado por diatermia en el entorno de la cirugía, que puede ser inhalado por el paciente y el participante y el personal operativo9. De hecho, el uso de la diatermia puede causar toxicidad del aire en la sala de operaciones igual a la producida por fumar cigarrillos seis11 y, aunque las salas de operaciones suelen tener sistemas de ventilación, la contaminación puede durar al menos 20 min12 . Sin embargo, en los pacientes realizando una cirugía de amigdalectomía, el método de diatermia ha demostrado menos, pero el dolor no significativa, post-operatorios,13 y14 de sangrado que el método de hemostasia ligadura clásica. En general, existe evidencia respecto a las diferencias en el dolor postoperatorio y sangrado apenas las tasas después de biopsias de tejido adiposo en individuos sanos. Dada la falta de pruebas y los efectos secundarios de la diatermia, la estandarización de un método no-diatermia para biopsia de tejido adiposo está garantizado. Por consiguiente, el objetivo de este estudio fue estandarizar una técnica quirúrgica para biopsia de tejido adiposo abdominal subcutáneo, realizada bajo anestesia local utilizando un método no-diatermia en hombres sanos. Por otra parte, describiremos los procedimientos para la recolección de tejido para determinar la expresión del mRNA y la proteína concentración y realizar análisis histológicos.
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Protocolo
el estudio se ajustó a las normas establecidas por la declaración de Helsinki y fue aprobado por la Universidad de Tesalia, Departamento de Ciencias de ejercicio, Βiοethics Comité.
1. preparación de los equipos de cirugía y consumibles
- colocar un campo quirúrgico desinfectado en un soporte de Mayo quirúrgico de 4 ruedas.
- Posición de los siguientes insumos y equipo quirúrgico en un soporte de Mayo quirúrgico 4 ruedas:
Un par de tijeras de operación recta (15 cm)
un bisturí (Nº 11)
mango de una bisturí
un par de tijeras curvas (14 cm)
pinza un mosquito
un par de pinzas de Kocher
una pinza quirúrgica
povidona-yodo (en un estéril gasa)
una sutura (4.0)
un par de tijeras rectas (11 cm)
(15 cm) del sostenedor de la uno aguja
cinco gasas estériles
una gasa estéril adhesivo
una jeringa de 10 mL con una aguja desinfectada
10 mL de xilocaína 2% (sin adrenalina)
uno par de guantes quirúrgicos desinfectados - Coloque los siguientes materiales sobre un banco separado:
dos tubos de microcentrífuga
un tubo que contenga 5 mL de formalina al 10%
un recipiente pequeño que contenga 50-100 mL de nitrógeno líquido a-190 ° C.
2. Preparación de los participantes
- que los participantes siguen un rápido de 8 h 15 antes del procedimiento de biopsia.
- Tienen los participantes abstenerse de ejercicio físico, estrés excesivo, el alcohol y activo y pasivo antes de 72 h la biopsia 16 , 17.
3. Realizar la biopsia de tejido adiposo subcutáneo
- posición del participante en el lecho quirúrgico en una posición supina.
- Desinfectar la región de la incisión con povidona-yodo.
- Inyectar 10 mL de xilocaína 2% (sin adrenalina) lentamente y constantemente 18 en la región seleccionada para servir como anestesia local.
- Colocar un campo quirúrgico estéril sobre el área a cubrir el cuerpo de los participantes, excepto la región de la incisión.
- Al menos 3-5 min después, aplique presión con un par de pinzas en el área de anestesia local y pregunta al participante si siente cualquier dolor 19 para asegurarse de que la anestesia local se ha logrado.
- Coloque el bisturí Nº 11 en el mango del bisturí.
- Crear una incisión de 2-2.5 cm de longitud, 3-5 cm hacia la izquierda o derecha del ombligo.
- Quitar el tejido subcutáneo con un par de recta 15 cm tijeras del funcionamiento.
- Una vez que el tejido adiposo se revela, capturarlo con un par de pinzas y tijeras curvas 14 cm.
- Corte y retire aproximadamente 1 g de tejido adiposo.
- Después del retiro de tejido, coloque gasas estériles sobre la incisión para conseguir la hemostasia.
- Cuando se confirma la hemostasia, capturar la 4.0 sutura con una aguja de 14 cm y la piel con un par de pinzas quirúrgicas hasta el tejido subcutáneo.
- Insertar la aguja de sutura en la piel, hacia el tejido subcutáneo, mientras que la piel y subcutáneo están estrechamente alineados.
- Con la aguja de sutura, seguir una técnica en continuo zig-zag en el tejido subcutáneo hasta que impulsado desde el exterior de la piel. Continúe hasta que se cierra la incisión de la piel.
- Externamente atar la sutura.
- Limpiar la zona de la incisión con solución salina y cubrir con una gasa estéril adhesivo.
4. La deposición del tejido
- separar el tejido adiposo recogido en tres piezas: 150, 350 y 500 mg.
- Posición de las piezas de magnesio 150 y 350 del tejido de la muestra en tubos de microcentrífuga.
- Tubos de microcentrífuga de sumergir los dos en el pequeño recipiente con nitrógeno líquido a-190 ° C hasta la deposición final en un congelador a -80 ° C.
Nota: por adelantado, use una aguja estéril para perforar un pequeño agujero en los tubos de microcentrífuga para evitar fracaso de Copa durante la inmersión de los tubos de microcentrífuga en nitrógeno líquido a -190 ° C. - Sumergir la pieza de 500 mg de tejido de la muestra-que se utilizará para el análisis histológico-en un tubo que contenga 5 mL de formalina al 10%.
Nota: Use las pinzas de mosquito sólo en casos de sangrado excesivo durante la cirugía. En tales casos, capturar la nave con las pinzas de mosquito para ligar y cerrar hasta logra hemostasia.
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Resultados
Las características de los participantes se proporcionan en la tabla 1. Los puntos de sutura en la zona de la incisión se cayeron en los próximos días 8-12. Completamos un total de 115 biopsias de tejido adiposo subcutáneo mediante el método de diatermia no biopsia quirúrgica abdominal en hombres adultos sanos (edad: 35,2 ± 6,9 años, índice de masa corporal: 27,3 ± 4.4; y porcentaje de grasa corporal: 27,0 ± 9.0%). Sangrado excesivo después de la biopsia fue observado en ...
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Discusión
El objetivo de este estudio fue estandarizar una técnica quirúrgica para la biopsia de tejido adiposo abdominal subcutáneo, realizada bajo anestesia local con un método no-diatermia en hombres sanos. La diatermia se utiliza comúnmente en la sala de operaciones; sin embargo, pueden ocurrir efectos secundarios (es decir, fogonazos y toxicidad ambiental)9 y retrasos en la curación de10 . Estos efectos no deseados de la diatermia pueden generar riesgos para la salud pa...
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Divulgaciones
Los autores declaran que no tienen intereses financieros que compiten.
Agradecimientos
Este trabajo recibió financiación de horizonte 2020 (beca Convenio Nº 645710) de la Unión Europea y marco 7 (acuerdos de subvención Nº 612547 y 319010) programas. Los autores desean agradecer a Dr. Fotini Sourli-Chasioti por la ayuda con el procedimiento de biopsia. Los autores agradecen también el Sr. Yiorgos Paterakis por su valiosa ayuda en la preparación del video.
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Materiales
| Nombre | Empresa | Número de catálogo | Comentarios |
|---|---|---|---|
| Campo quirúrgico desinfectado | Hartmann | 23516-00 | |
| Soportes de instrumentos de acero inoxidable (Mayo quirúrgico) | Medical Device Depot Inc. | 32000 | |
| Tijeras de operación rectas 15 cm | Karl Storz | 791903 | |
| Bisturí nº 11 | Swann-Morton | 203 | Bipolar, número de catálogo 429011 |
| Mango de escarpel n.º 3 | Karl Storz | 488090 | |
| Tijeras curvadas 14 cm | Karl Storz | 511514, 752918 | |
| Pinzas para mosquitos | Karl Storz | 535012 | |
| Pinzas Kocher | Karl Storz | 530416 | Bipolar, número de catálogo 830316 |
| Pinzas quirúrgicas | Karl Storz | 793216 | Bipolar, número de catálogo 831016 |
| Povidona yodada | Varios | No aplicable | |
| Sutura 4.0 Vicryl | Johnsons | V4970H | |
| Tijeras rectas 11 cm | Karl Storz | 512511 DS | |
| Portaagujas 15 cm | Karl Storz | 515515 | Bipolar, número de catálogo 213015 |
| Gasas estériles | Hartmann | 3021 | |
| Α gasa estéril dhesive | Equipo médico Digas | 2889 | |
| Jeringa de 10 ml con aguja desinfectada | Soluciones médicas Alpha | 10310-55-0010 | |
| 2%-xilocaína (sin adrenalina) | Varios | No aplicable | |
| Guantes quirúrgicos estériles | Sempermed | 10001 | |
| Tubos Eppendorf | Kartell | 16283 | |
| 10% formalina | Soluciones médicas Alpha | 11016-30-2909 | |
| Tubos 120 mL | Equipos médicos Digas | 9025 | |
| Nitrógeno líquido a -190 grados; C | Reactivación | No aplicable |
Referencias
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