Evaluación del deterioro de la memoria espacial en un modelo de ratón de lesión cerebral traumática utilizando un laberinto radial

Resumen

Aquí presentamos un protocolo para una prueba específica de ratón de la cognición que no requiere nadar. Esta prueba puede utilizarse para distinguir con éxito los ratones de lesión cerebral traumática inducida por impacto cortical controlado de los controles simulados.

Resumen

A pesar del reciente aumento en el uso de modelos de ratón en la investigación científica, los investigadores siguen utilizando las tareas cognitivas que fueron originalmente diseñados y validados para el uso de ratas. Se ha demostrado previamente que la prueba de laberinto de la memoria espacial (diseñada específicamente para ratones y que no requiere natación) del laberinto radial de agua (RWT) ha permitido distinguir exitosamente entre ratones TBI inducidos por impacto cortical controlado y controles simulados. Aquí se presenta un protocolo detallado para esta tarea. El laberinto RWT capitaliza la tendencia natural de los ratones a evitar las áreas abiertas en favor de abrazar los lados de un aparato (thigmotaxis). Las paredes del laberinto están forradas con nueve orificios de escape colocados por encima del piso del aparato, y los ratones son entrenados para usar señales visuales para localizar el hueco de escape que sale del laberinto. El laberinto está lleno de una pulgada de agua fría, suficiente para motivar la fuga pero no lo suficientemente profunda como para requerir que el ratón nade. El período de adquisición toma sólo cuatroCon una prueba de retención de la memoria en el día cinco y una prueba de memoria a largo plazo en el día 12. Los resultados reportados aquí sugieren que el laberinto de RWT es una alternativa factible a validación de ratas, pruebas cognitivas de natación en la evaluación de espacial Déficit de memoria en los modelos de ratón de TBI.

Introducción

Los impedimentos de la memoria están entre los síntomas más comunes reportados por los pacientes después de una lesión cerebral traumática (TBI) ^{1 , 2} . La identificación precisa y la evaluación de los déficit de memoria análogos en los modelos animales de TBI, por lo tanto, son esenciales para nuestra comprensión de esta condición y su gestión. Aquí, presentamos un protocolo para probar la memoria espacial en un modelo de ratón de TBI utilizando un laberinto de rodamiento radial de agua (RWT). Este aparato se mostró previamente para evaluar los déficits cognitivos en modelos de ratón de TBI

Protocolo

Todos los procedimientos y manipulación de animales se llevaron a cabo de acuerdo con las directrices de cuidado de animales emitidas por los Institutos Nacionales de Salud y por el Comité de Cuidado y Uso de Animales de la Universidad de Washington.

1. Cirugía

1. Anestesiar el ratón con isoflurano al 5% en una caja de inducción hasta que quede inconsciente. Confirme la anestesia mediante una reducción de la frecuencia respiratoria y la ausencia de un reflejo de retirada después de la pinzamiento.
2. Mantenga la anestesia a través del cono de la nariz en el 2-2.5% durante la cirugía. Controle la frecuencia respiratoria dura....

Resultados

El laberinto de RWT ( Figura 1 ) se utilizó para investigar los déficit de memoria espacial dependiente de lesiones en ratones asignados al azar para recibir tanto la TBI cortical controlada como la cirugía simulada. La lesión se generó mediante un impacto cortical impulsado por solenoides con una punta convexa de 3 mm y los siguientes parámetros de lesión: velocidad de huelga de 6 m / s, profundidad de penetración de 1 mm y tiempo de contacto de 200 ms. Los.......

Discusión

El protocolo del laberinto de RWT presentado aquí distingue con éxito entre los ratones TBI inducidos por CCI y los controles simulados, y representa una alternativa factible, centrada en el ratón, al laberinto circular MWM y Barnes. Mientras que los resultados presentados aquí se refieren únicamente a la utilización del laberinto RWT en un modelo de ratón TBI, este aparato ha sido utilizado con éxito en modelos de edad y transgénicas donde el estrés inducido por el incumplimiento resultante de las pruebas basadas en na.......

Materiales

Lista de materiales utilizados en este artículo

Nombre	Empresa	Número de catálogo	Comentarios
Bañera redonda de acero sumergido en caliente de 35 galones	Home Depot	Internet #206638142	Necesario: 1
1-1/2 pulg. Adaptador de trampa ABS DWV SPG x SJ	Home Depot	Internet #100344703, SKU de la tienda #188956	Necesario: 9
1-3/4 pulgadas x 1-7/16 pulgadas Tapón de goma negra	Home Depot	Internet #100114974 SKU de la tienda #755844	necesario: 8
1-1/2 pulg. ABS DWV 90 Degree Hub x Hub Elbow	Depot	Internet #100346663 SKU de la tienda #188603	Necesario: 1
bolsa de almacenamiento HDX de 10 galones	Depot	Internet #202523587 SKU de la tienda #258804 Tienda SO SKU #258804	Necesario: 1
Impacto Un impactador estereotáxico para CCI	Leica Biosystems	39463920	necesario: 1
Vernier Stereotaxic con instrumento estereotáxico manual de accionamiento fino para animales pequeños	39463001 necesarios para Leica Biosystems		: 1

Home Home