Medición de esfínter uretral externo cistométrico en ratas despiertas con catéter implantado y electrodos para medidas repetidas

Resumen

Este protocolo describe primero el procedimiento quirúrgico de la implantación permanente de un catéter de vejiga urinaria combinada con electrodos del esfínter uretral externo y segundo, la medición de la función de la vejiga y uretral externo Esfinge en animales despiertos implantados.

Resumen

Función del tracto urinario inferior se evalúa principalmente mediante análisis de función de vejiga cistométrico en roedores. Cystometries convencionales se realizan generalmente como análisis terminal bajo anestesia de uretano. Es bien sabido que las drogas anestésicas pueden influir en la función vesical. Por lo tanto, el objetivo de esta técnica es realizar mediciones cistométrico del esfínter externo uretral y vejiga urinaria en ratas despiertas ligeramente restringidas. Para ello, se implanta un catéter de vejiga en la cúpula de la vejiga. Posteriormente, dos electrodos son implantados bilaterales en el esfínter uretral externo y un electrodo de tierra se sutura a un músculo esquelético no responde. El catéter de la vejiga y los tres electrodos son finalmente tunelizados subcutáneamente en la región del cuello y colocados en un arnés. Con esta técnica, las vías urinarias bajas puede ser medida en varios puntos del tiempo en el mismo animal para evaluar la función del tracto urinario inferior. La principal aplicación de esta técnica es el seguimiento simultánea vejiga urinaria y función del esfínter uretral externo en ratas sanas despiertas y después de la inducción de una enfermedad o lesión. Por otra parte, el posterior control de tracto urinario inferior puede realizarse durante la evaluación de la enfermedad, lesión y para monitorizar la eficacia del tratamiento.

Introducción

Para analizar almacenamiento urinario y anulación de la función y disfunción, mayoría de los estudios ha usado modelos de roedores. A través de la activación secuencial de los reflejos, se produce la micción. La coordinación de estos reflejos es esencial para la eficiente evacuación¹. Técnicas de grabación cistométrico proporcionan valiosas herramientas para el análisis de la función de la vejiga urinaria bajo su control neural¹.

Cystometries más convencionales en las ratas se hacen como un análisis único y final en anestesia, principalmente uretano²y únicamente se cent....

Protocolo

Todos los procedimientos aquí descritos fueron aprobados por el Comité de ética gubernamental austríaca para la investigación animal (Bundesministerium für Wissenschaft, Forschung und Wirtschaft, WF / V /3b) y en cumplimiento de la Asociación para la evaluación de laboratorio Pautas de cuidado animal para uso animal. Las ratas utilizadas este enfoque fueron ratas Lewis hembras, de 12 semanas de edad. Use instrumentos estériles en el protocolo.

1. material preparación

1. Fabricación del catéter
   1. Cortar el catéter (polietileno tubería PE-50) en la longitud correcta (20 a 25 cm) para ajustarse al tamaño del an....

Resultados

Un esquema mostrando el proceso de mediciones cistométrico despierto se presenta en la figura 1 y la anatomía para la implantación del catéter de la vejiga se muestra en la figura 2. La cirugía toma aproximadamente 2 h. analgesia postoperatoria y antibióticos, como se describe en el protocolo, cubren infecciones y dolor durante cinco días después de la cirugía. No hay signos de dolor se observaron después de eso. Dos veces al día.......

Discusión

Este protocolo describe el procedimiento quirúrgico de un catéter permanente, implantación de electrodos del esfínter uretral y el cistométrico grabación técnica en ratas despiertas, ligeramente restringidas, incluyendo tanto el análisis simultáneo de la vejiga urinaria y esfínter uretral externo.

Pasos críticos durante la cirugía son la cuidadosa implantación de Catéter vesical, evitando fugas y la manipulación extensa. Por otra parte, una implantación precisa de los electrodos al esfínter ex.......

Materiales

Lista de materiales utilizados en este artículo

Nombre	Empresa	Número de catálogo	Comentarios
Tubo de polietileno PE 50	Catéter de 427411 Becton Dickinson
Prolene 6-0 (BV-1, 9,3 mm, 3/8c)	Sutura	EH7403H	Ethicon
Alambre de acero recubierto de teflón	Alambre Cooner	AS631	Material del electrodo Alambre de
plata 0,250 mm	World Precision Instruments	AGW1030	Material del electrodo
Rotilabo - Tubo de PVC	Carl Arnés Roth	97241
Vicryl rapide 4-0 (P-3, 13 mm, 3/8c)	Ethicon	V4940H
Arnés	SAI Infusion Technologies	QCH-23CW	Arnés
Tubos retráctiles	ChiliTec	17894	Soldadura de electrodos
Alambre de soldadura Pb60 Sn40	Stannol	LD0029	Soldadura de
electrodos Fluxing agente 157	Castolin Eutectin	157 0150	Soldadura de electrodos
Conn Cabezal sin cubierta HDR 3 POS, soldadura de 2,54 mm Caja de orificio pasante ST	Preci-dip	801-87-050-10-001101	Soldadura de electrodos
Regleta de enchufe Conn SKT 50 POS 2,54 mm, soldadura ST Caja de orificio pasante	Preci-dip	890-18-003-10-001101	Soldadura
de electrodosPaquete de cistometría para ratas (contiene bomba, báscula, transductor de presión, hardware para análisis cistométrico)	Catamount Research and Development Inc.	CAT-CYT-R
Amplificador diferencial con cabezal activo	AD instruments	DP-311	Amplificador EMG
Restrainer Tamaño mediano para ratas 200-300 g	emka Technologies	HLD-RM
Uro Dyn Software	Zü rico en	en MTA
(cepa Lewis) de 12 semanas de edad	Charles River, Sulzfeld, Alemania		animales

de Arnés simple de conexión rápida ratas hembras basadas de la Universidad