Aquí demostramos un protocolo para estandarizar los procedimientos de muestreo de un modelo establecido de porcino de infarto agudo de miocardio con el fin de aumentar su valor traslacional en la comprensión de la fisiopatología de la isquemia/reperfusión miocárdica y para probar a nuevos fármacos candidatos.
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Artículo de método
Mejora de un modelo de infarto de miocardio porcino pecho cerrado por normalización del tejido y procedimientos de muestreo de sangre
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Resumen
Resumen
Reperfusión de la isquemia miocárdica (me / R) lesión contribuye a casi la mitad de la zona necrótica después de infarto de miocardio. Hasta la fecha no existe ningún fármaco aprobado para prevenir o reducir del miocardio I / lesiones R. El estudio y la comprensión de los mecanismos fisiopatológicos de miocardio I / R es esencial para el desarrollo de tratamientos eficaces. Grandes experimentos con animales son un paso importante en los métodos de traslación. El modelo porcino de infarto agudo de miocardio ha sido establecido y descrito por nosotros mismos y otros. El objetivo fue para mejorar aún más el valor del modelo centrándose en detalle en las técnicas de muestreo para su uso en futuros experimentos. Además, hacemos hincapié en medidas pequeñas pero importantes que pueden afectar la calidad de los resultados finales. Para imitar la situación clínica de infarto lesiones R, un catéter de intervención coronaria percutánea (ICP) fue insertado en la arteria descendente anterior izquierda coronaria (CHAVAL) de un cerdo anestesiado. ° ° ° Este modelo mímico infarto agudo de miocardio y el tratamiento de la PCI en seres humanos con la posibilidad de determinar con precisión el área en riesgo así como el necrótico- y tejido isquémico viable. Aquí se utilizó el modelo para investigar el efecto de un inhibidor de péptidos bicíclicos de FXIIa. El modelo puede modificarse para permitir el tiempo de reperfusión estudiar efectos después del infarto de miocardio.
Introducción
Cardiopatía isquémica, en particular infarto de miocardio (MI), es la principal causa de muerte en los países desarrollados 1. Hoy en día, el tratamiento estándar de MI es la intervención coronaria percutánea (PCI), el tratamiento del catéter balón. Uno de los factores críticos que afecta la calidad de vida y pronóstico de los pacientes después de MI aguda tratados con PCI es el tamaño del infarto. La reducción del tamaño puede tener un gran impacto en la supervivencia y pronóstico paciente 2. Isquemia/reperfusión miocárdica (me / R) lesión tiene una influencia significativa en el tamaño del infarto, así que uno de los p....
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Protocolo
1. los animales:
Todos los animales fueron tratados según las pautas de las leyes nacionales suizos. El estudio fue aprobado por el Comité de experimentación animal local del cantón de Berna (permiso no. SER 25/16).
Utilizar grandes cerdos blancos de ambos sexos (30 ± 5 kg). Dividir los animales ciegamente en dos grupos, un grupo un inhibidor (80 kDa proteasa) bicíclica de FXIIa o tratamiento de elección y el otro un control inactivo.
2. quirúrgico (figura 1)
- Anestesia y preparación del animal:
- Rápidamente los animales de....
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Resultados
Un animal murió prematuramente antes de la administración del péptido inhibidor o control FXIIa debido a un error técnico (caída repentina de la presión arterial durante el tiempo de isquemia, antes de la adición de la sustancia de ensayo). Un animal fue excluido del grupo de inhibidor FXIIa porque ninguna lesión de isquemia/reperfusión se observó debido a la anatomía anormal de la arteria descendente anterior izquierda (CHAVAL). Una gran parte del ventrículo izquierdo, incluyendo el ápic.......
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Discusión
Del miocardio lesiones R tiene un efecto significativo en el tamaño final del infarto que se traduce directamente en el pronóstico del paciente después de infarto agudo de miocardio3. Comprensión de la fisiopatología del miocardio lesiones de R es el primer paso para reducir o evitar. Del miocardio I / R es una condición aguda que se produce directamente después de la reperfusión de los recipientes ocluidos. I R lesión conduce a la activación de la respuesta inmune innata y el daño celular se prod.......
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Divulgaciones
Los autores no declaran conflicto de intereses.
Agradecimientos
Los autores desean reconocer el Profesor Christian Heinis el inhibidor FXIIa y el control respectivo. También agradecemos Olgica Beslac, Dr. Daniel Mettler y Kay Nettelbeck de la unidad de Cirugía Experimental, Departamento de investigaciones biomédicas, Universidad de Berna para el soporte técnico. Celine Guillod y Matthias Rausch del Departamento de diagnóstico, intervencional y radiología pediátrica, Hospital Universitario de Berna, Inselspital prestó apoyo con el equipo de rayos x y técnicas. Este proyecto fue financiado por la Swiss National Science Foundation, proyecto Nº 320030_156193. También nos gustaría dar las gracias a Sr. Reto Haenni de comunicación y mar....
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Materiales
| Nombre | Empresa | Número de catálogo | Comentarios |
|---|---|---|---|
| ABL 90 Flex, analizador de gases en sangre | Radiometer-Análisis | de | gases en sangre (BGA) |
| ACT Plus | Medtronic-Tiempo | de coagulación activado | Medtronic |
| Atropin | Sintetica-Atropinum | Sulfas, 0,5 mg/ml | |
| Balanza (20-500 Kg) | Báscula NAGATA, Tiwan | HTB/HTR | Se pueden utilizar productos alternativos |
| Balanza (21-4200 g) | Mettler toledo, Suiza | MS4002SDR | Se pueden utilizar productos alternativos |
| Tubos de extracción de sangre: EDTA, citrato y suero | S-Monovette, Nuembrecht, Alemania | 05.1167.001, 05.1071.001 y 05.1557.001 respectivamente | Se pueden utilizar productos alternativos |
| BV Pulsera con arco en C móvil | Philips-Se | pueden utilizar productos alternativos | |
| Centrifuge | Labcare, Reino Unido | ALC PK120R | Se pueden utilizar productos alternativos |
| Desfibrilador Lifepak 12 | Medtronic-Se pueden utilizar productos alternativos | ||
| Dextrano de Leuconostoc mesenteroides | Sigma-Aldrich, Alemania | D3759 | Promedio M.wt 48000-90000 |
| Cámara réflex digital de lente única | Sony, Tailandia | DSLR-A500/A550 | Se pueden utilizar productos |
| alternativos Pinzas de disección | Se pueden utilizar productos alternativos | ||
| Catéter de dilatación EMPIRA RX PCI Cordis | , Johnson& Johnson, USA | 85R15300S | Diámetro 3 mm, longitud 15 mm, Se pueden utilizar productos alternativos |
| Catéter de dilatación EMPIRA RX PCI | Cordis, Johnson& Johnson, USA | 85R15350S | Diámetro 3,5 mm, longitud 15 mm, Se pueden utilizar productos alternativos |
| Evans Blue | Sigma-Aldrich, Alemania | E2129 | Tóxico |
| Fabius GS respirador premium | Drä ger, Lü beck, | Alemania-Estación de | trabajo de anestesia, Se pueden utilizar productos alternativos |
| Fentanilo | Inselspital ISPI-Fentanilo | 2500mcg/50ml | |
| Instituto de Patología de Formaldehído | , Universidad de Berna | SI148701 | Se pueden utilizar productos alternativos |
| Inhibidor de FXIIa | Proporcionado por el laboratorio del Prof. Christian Heinis en EPFL | Nuevo péptido bicíclico | |
| Galeo, guía coronaria | Biotronik, Alemania | 125497 | Se pueden utilizar productos alternativos |
| Catéter de guía | Boston Scientific, Florida, EE. UU | 34356-06 | 6F (100 cm, EB3.75). Se pueden utilizar productos alternativos |
| Heparina sódica | Drossapharm, Basilea, | Suiza-Liquemina, 25000 U.I./5 ml | |
| Electrocirugía de alta gama | BOWA, Alemania | ARC 400 | Fuente eléctrica para succión de sangre. Se pueden utilizar productos alternativos |
| Filtro respiratorio Hydro-Guardmini | Interquirúrgico, Lituania | 1745000 | Filtros |
| Imagen J | Instituto Nacional de Salud, EE. UU. | 1.47v | Se pueden utilizar productos alternativos |
| Dispositivo de inflado, Atrion QL2530 | Producto médico Atrion, Alabama, EE. UU. | 96402 | Se pueden utilizar productos alternativos |
| IntelliVue MP 70 | Philips, Boeblingen, | Germany-Monitor | (ECG, frecuencia cardíaca, presión sanguínea y temperatura corporal). Se pueden utilizar productos alternativos |
| KCl | Sintetica | SA-Cloruro de potasio 15% | |
| Ketamina | Vetoquinol-Narketan | , 1ml/100mg | |
| LR-ACT | Medtronic | 402-01 | ACT jeringas especiales |
| Midazolam | Roche-Dormicum, 5mg/ml | ||
| Bisturí | Se pueden utilizar productos alternativos | ||
| Portaagujas | Se pueden utilizar productos alternativos | ||
| Cámara de alta resolución, PathStand Macro Imaging Stand for Grossing | Spotimaging, EE. UU | . Resolución HD de 1080 p. Se pueden utilizar productos alternativos | |
| PBS | Preparación | interna-Se | pueden utilizar productos alternativos |
| Cánula venosa periférica, 18 G | Se pueden utilizar productos alternativos | ||
| Sistema de adquisición de datos PowerLab 4/35 | Adinstruments, Spechbach, Alemania-Rotamax120T | ||
| Heidolph, Alemania | 544-41200-00 | Agitador. La alternativa se puede utilizar | |
| Rü schelit-Super Safety Clear Tube | Teleflex, Dublín, Irlanda | 112480 | Tubo de vía aérea, Se pueden utilizar productos alternativos |
| Safe Pico Jeringas de aspiración | Radiometer | 956-622 | BGA jeringas especiales |
| Saline | Sintetica Bioren-NaCl | 0,9%. Se pueden utilizar productos alternativos | |
| Sevorane 1.5% | AbbVie | AG-Sevorane | 250ml 100% |
| Sheath | Cordis, Johnson& Johnson, EE. UU. | 504-607 A | AVANTI + / 7 F, Se pueden utilizar productos alternativos |
| Bomba de infusión espacial | B.Braun Medical AG, | Alemania-Para | infusión de fentanilo. Se pueden utilizar productos alternativos |
| SPR-350 (catéter Millar) | Adinstruments, Texas, EE. UU | 840-8166 | MIKRO-TIP, 5F, 120 cm |
| Sierra de | pueden utilizar productos | ||
| alternativos Suturas | ETHICON, Johnson& Johnson, Estados Unidos | Y3110H | Monocryl 3-0 SH-1 Plus. Se pueden utilizar |
| productos alternativos Jeringas (20, 10 y 5 mL) | CODAN,Baar, Suiza | 62.7602, 62.6616, 62.5607 respectivamente | Se utilizan para inyectar materiales anestésicos por vía intramuscular o directamente en la vía venosa central. También para inyectar heparina o FXIIa o el control respectivo. Se pueden utilizar productos alternativos |
| Esparcidor | Se pueden utilizar productos alternativos | ||
| Tissue-tek | SAKURA, Países Bajos | 4583 | Compuesto O.C.T. |
| Pinzas | Se pueden utilizar productos alternativos | ||
| Medios de contraste Xenetix 300 | Guerbet, Zü rico, | Suiza-Lobitridol, 300 mg de yoduro/ml | |
| Xilacina | Vetoquinol-Xylapan | , 20 mg/1 mL | |
| 2,3,5-Trifeniltetrazolio chorida | Sigma-Aldrich, Austria | T8877 | |
| 500 μ Tubos L (eppendorf) | Trefflab, Suiza | 96.08185.9.03 | Se pueden utilizar productos alternativos |
Referencias
- Mozaffarian, D., et al. Heart Disease and Stroke Statistics-2016 Update. Circulation. 133, e338-e360 (2016).
- Miller, T. D., et al. Infarct size after acute myocardial infarction measured by quantitative tomographic 99....
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Reimpresiones y permisos
