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Artículo de método

Un modelo mínimamente invasivo para analizar la fractura endocondral en ratones en condiciones biomecánicas estandarizadas

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DOI:

10.3791/57255

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22 de marzo de 2018

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En este artículo

Resumen

Este protocolo describe una técnica de osteosíntesis mínimamente invasiva utilizando un tornillo intramedular para estandardizado estabilización de fracturas de fémur, que puede utilizarse para analizar el hueso endocondral en ratones.

Resumen

Modelos de curación ósea son necesarios para analizar los complejos mecanismos de fractura cura para mejorar el tratamiento clínico de la fractura. Durante la última década, un mayor uso de modelos murinos en investigación ortopédica observó, probablemente porque los modelos de ratón ofrecen un gran número de cepas genéticamente y anticuerpos especiales para el análisis de los mecanismos moleculares de la curación de la fractura. Para controlar las condiciones biomecánicas, técnicas de osteosíntesis bien caracterizados son obligatorias, también en ratones. Aquí, Divulgamos sobre el diseño y uso de un hueso cerrado modelo de curación para estabilizar las fracturas de fémur en ratones. El tornillo intramedular, de acero inoxidable de grado médico, ofrece a través de la compresión de la fractura una estabilidad axial y rotacional en comparación a los pines intramedulares simple usa principalmente, que demuestran una total falta de estabilidad axial y rotacional. La estabilidad alcanzada por el tornillo intramedular permite el análisis de la curación endocondral. Una gran cantidad de tejido de callo, recibido después de la estabilización con el tornillo ofrece las condiciones ideales para la cosecha de tejido para análisis bioquímicos y moleculares. Otra ventaja del uso del tornillo es el hecho de que el tornillo puede insertarse en el fémur con una técnica mínimamente invasiva, sin provocar daño a los tejidos blandos. En conclusión, el tornillo es un implante único que idealmente puede ser utilizado en fractura cerrada cura modelos ofreciendo condiciones biomecánicas estandarizadas.

Introducción

Hueso curativos estudios en ratones están en gran demanda debido a un amplio espectro de anticuerpos y animales modificados genéticamente. Estos hechos permiten para estudiar los mecanismos moleculares del hueso curativo1. En los últimos años, diferentes hueso curativo modelos para ratones se han desarrollado2. Estos modelos pueden dividirse en modelos abiertos, en que el hueso es osteotomized usando un acercamiento quirúrgico lateral abierto y en modelos cerrados, en el que se fractura el hueso basados en el modelo de fractura introducido por Bonnares y Einhorn3. Usando esta técnica, una fractura....

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Protocolo

Todos los procedimientos fueron realizados según las directrices de institutos nacionales de salud para la utilización de animales de experimentación y siguieron directrices institucionales (Landesamt für Verbraucherschutz, Zentralstelle Amtstierärztlicher Dienst, Saarbrücken, Alemania).

1. preparación de instrumental quirúrgico e implantes

  1. Seleccione una hoja de bisturí (tamaño 15), una esponja pequeña, pinzas finas, una aguja de 27 G, una sutura no reabsorbible 5-0, tijeras y un sostenedor de la aguja en el cuadro de instrumentos microquirúrgicos.
  2. Desembale el tornillo intramedular, el alambre de guía (0.3/0.2 mm de di....

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Resultados

El tiempo de funcionamiento de la incisión cutánea al cierre de la herida era 20 minutos. La cirugía puede realizarse sin un microscopio estéreo. Postoperatoriamente, los animales fueron monitoreados diariamente. Analgesia postoperatoria fue terminada después de 2 días porque ninguno de los animales mostraron evidencia de dolor después de este período de tiempo. Los animales demostraron también carga normal dentro de 2 días después de la cirugía. Infecciones de la herida no se observaron .......

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Discusión

Pasos críticos de la intervención quirúrgica son encontrar el punto de entrada correcto para la implantación de tornillo en el centro de los cóndilos del fémur en la muesca intercondílea, así como la óptima orientación de la aguja paralela al eje del hueso para el escariado de la cavidad intramedular. Para evitar una posición de entrada incorrecta, el cirujano debe preparar la muesca hasta que se logra una vista óptima. Para controlar la orientación durante el fresado, el fémur de los ratones se debe sostener con los ded.......

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Divulgaciones

Los autores declaran que no tienen intereses financieros que compiten.

Agradecimientos

Este trabajo fue apoyado por RISystem AG, Davos, Suiza.

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Materiales

Lista de materiales utilizados en este artículo
NombreEmpresaNúmero de catálogoComentarios
Tornillo de ratónRISystem AG221.100
Alambre guíaRISystem AG521.100
Broca de centradoRISystem AG590,205
Taladro manualRISystem AG390,130
Hisopo de algodón (150 mm, cabeza pequeña)Fink Walter GmbH8822428
Sutura (5-0 Prolene)Ethicon8614H
PinzaBraun Aesculap AG & CoKGBD520R
TijerasBraun Aesculap AG & CoKGBC100R
PortaagujasBraun Aesculap AG & CoKGBM024R
27 G agujaBraun Melsungen AG9186182
Hoja de bisturí tamaño 15Braun Aesculap AG & CoKG16600525
Radiador de calorSanitas605.25
Crema depilatoriaAsid bonz GmbHNDXZ10
Lubricante ocularBayer Vital GmbH2182442
XilacinaBayer Vital GmbH 1320422
KetaminaSerumwerke Bernburg7005294
TramadolGr& uuml; nenthal GmbH2256241
Solución de desinfección (SoftaseptN)Braun Melsungen AG8505018
ratones CD-1Charles River22
Dispositivo de rayos XFaxitron MX-20, Faxitron X-ray Corporation2321A0988
Dispositivo de fractura pequeñoRISystem AG891,100

Referencias

  1. Jacenko, O., Olsen, B. R. Transgenic mouse models in studies of skeletal disorders. J Rheumatol Suppl. 43, 39-41 (1995).
  2. Histing, T., et al. Small animal bone healing models: standards, tips, and pitfalls results of a consensus meeting. Bone.....

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Reimpresiones y permisos

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