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Modelo de una rata de la fatiga Central mediante la método de plataforma múltiple

DOI:

10.3791/57362

August 14th, 2018

In This Article

Summary

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Aquí, presentamos un protocolo para introducir un modelo de rata de la fatiga central mediante la modificación del método de plataforma múltiples (MMPM).

Abstract

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En este artículo, presentamos un modelo de rata de la fatiga central mediante la modificación del método de plataforma múltiples (MMPM). La caja de plataforma múltiple fue diseñada como un tanque de agua con plataformas estrechas en la parte inferior. Las ratas del modelo se pone en el tanque y estaba paradas en las plataformas de 14 h (18:00-8:00) por día por 21 días consecutivos, con un grupo de control en blanco para el contraste. Al final del modelado, ratas en el grupo modelo mostraron un evidente aspecto fatigado. Para evaluar el modelo, realizamos varias pruebas de comportamiento, incluyendo el campo de prueba (OFT), el elevado además de laberinto (EPM) y la prueba de natación exhaustivo (ES). Los resultados mostraron ansiedad, deterioro de la cognición espacial, rendimiento muscular pobre y disminuyó actividad voluntaria presentada en ratas modelo confirman el diagnóstico de la fatiga central. Cambios de los neurotransmisores centrales también verifica el resultado. En conclusión, el modelo simulado con éxito la fatiga central y estudio con el modelo puede ayudar a revelar el mecanismo patológico de la enfermedad.

Introduction

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La fatiga es uno de los principales factores que amenazan la salud humana1. En las últimas décadas, diversas investigaciones han demostrado que la fatiga es periférico activa pero impulsado por el centro y siempre acompañado con trastornos emocionales y cognitivos. Fisiólogo italiano Mosso A. propuso por primera vez la palabra fatiga Central2. Se define generalmente como una actividad voluntaria limitada y deterioro de la cognición debido a la disfunción de la transmisión del impulso en el sistema nervioso central (SNC)3. En comparación con fatiga muscular periférica, fatiga central hace hincapié ....

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Protocol

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Todos los animales fueron mantenidos siguiendo las directrices de la legislación China sobre el uso ético y cuidado de animales de laboratorio.

1. modelado de la preparación

  1. Preparación de laboratorio
    1. Funcionamiento la lámpara UV durante al menos 30 minutos antes del experimento.
    2. Control de la temperatura de laboratorio a 25 ± 3 ° C y humedad relativa alrededor del 30%.
    3. Encienda el luz en 6:00 laboratorio y apague en 18:00 para establecer un ciclo de luz/oscuridad de 12 h/12 h.
  2. Construcción de caja de plataforma múltiple
    1. La constru....

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Results

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Describimos un modelo de rata de la fatiga central mediante MMPM. 24 ratas Wistar se dividen al azar en el grupo control y el grupo modelo, con 12 ratas en cada grupo. El aparato modelo está diseñado como un tanque de agua con plataformas estrechas en la parte inferior (figura 1). Las ratas modelo soporte en las plataformas de 14 horas diarias, incluyendo el tiempo de sueño parcial, durante 21 días (figura 2).

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Discussion

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El MMPM se diseña originalmente para la privación de sueño9. Las ratas se lanzan en un tanque de agua con plataformas fijadas en la parte inferior. Impulsado por el miedo instintivo del agua, las ratas siguen de pie en las plataformas y no sueño ocurre. El estudio muestra que diferentes horas de privación del sueño conducen a varios cambios en el comportamiento de la rata y estado de ánimo, incluyendo reconocimiento deterioro10emociones negativas11y .......

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Disclosures

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Los autores no tienen nada que revelar.

Acknowledgements

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Este trabajo fue apoyado por la Fundación de Ciencias naturales de Beijing (No.7162124) y Xin-ao Foundation for Beijing Universidad de Medicina China.

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Materials

List of materials used in this article
NameCompanyCatalog NumberComments
Personalización del tanque de agua de privación del sueñomúltiples plataformas, es proporcionado por el laboratorio neuroinmunológico de la Universidad de Medicina110 cm x 60 cm x 40 cm. Hay 15 pequeñas plataformas de plástico en la parte inferior. La pequeña plataforma tiene 6,5 cm de diámetro y 8 cm de alto
Ratas Wistar BeijingWeitong Lihua Experimental Animal Technology Companynúmero de licencia SYXK (Beijing) 2016-0011Use 32 ratas macho sanas Wistar, de 8 semanas de edad (200-210 g)
Cromatógrafo líquido de alto rendimiento Agilent 1100LC Agilent  G1379A, G1311A, G1313A, G1316A   G1379A, bomba cromatográfica tipo G1311A, muestreador automático G1313A, caja de temperatura de columna G1316A
Detector electroquímico DECADE II SDCempresaelectrodo de carbono vítreo, electrodo de referencia Ag/AgCl, estaciones de trabajo (Clarity CHS)
Biofuge Centrífuga de refrigeración de alta velocidad StratosHERAEUS
VCX130 instrumento de fracturación ultrasónicaSONICS
Desarrollo de la tecnología Phos de la báscula electrónica ACS-ZEAS, Pekín.El peso de las ratas de pesaje puede tener una precisión de 0,1 g.
caja de campo abierto, es proporcionada por el laboratorio neuroinmunológico de la Universidad de Medicina China de Beijing cajade madera de campo abierto  100 cm por 100 cm x 40 cm, pared interior e inferior como el gris. La parte inferior está dividida en 25 cuadrados de área igual, cada uno de los cuales mide 20 cm x 20 cm, y las 16 cuadrículas a lo largo de la pared exterior son las externas, y las otras 9 cuadrículas son centrales. La cámara está montada sobre la mediana.
Laberinto elevado Plus-mazeBeijing zhongshi dechuang technology development co. LTD.Los brazos abiertos y cerrados de la cruz están compuestos por 30 cm x 5 cm x 15 cm, y el área central es de 5 cm x 5 cm, con una cámara montada sobre el centro y 45 cm de altura.
Cubo de natación para ratas.Zhenhua equipo de instrumentos biológicos co., LTD. Anhui, China.El volumen del tambor de plástico es de 70 cm x 30 cm x 110 cm, que se utiliza para nadar en ratas.
TermómetroShiya instrument co., LTD., changzhou, China.Controle la temperatura del agua
Pequeña bomba de aguaXincheng technology co., LTD., chengdu, China.Se utiliza para el tanque de agua y el comportamiento de natación.
Software de comportamiento Ethovition3.0.Nuldus,Países BajosAnálisis de medición de videos de comportamiento de ratas.
de China de Beijing holandesa ANTEC Personalización de la

References

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  1. Ishii, A., Tanaka, M., Yamano, E., Watanabe, Y. The neural substrates of physical fatigue sensation to evaluate ourselves: a magnetoencephalography study. Neuroscience. 261, 60-67 (2014).
  2. Dalsgaard, M. K., Secher, N. H.

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Central Fatigue ModelMultiple Platform MethodRat Model ConstructionOpen Field TestElevated Plus MazeExhaustive Swimming TestNeurotransmitter AnalysisSleep Deprivation ProtocolBehavioral AssessmentWater Tank Setup

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