Instrumentación invasiva del cordero fetal proporciona mediciones precisas fisiológicas de la circulación de transición en un modelo que imita muy de cerca al bebé recién nacido.
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Artículo de método
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Instrumentación invasiva del cordero fetal proporciona mediciones precisas fisiológicas de la circulación de transición en un modelo que imita muy de cerca al bebé recién nacido.
Asfixia del nacimiento representa casi 1 millón de muertes en todo el mundo cada año y es una de las principales causas de mortalidad y morbilidad neonatal temprana. Muchos aspectos de las pautas actuales de reanimación neonatal siguen siendo polémicos dadas las dificultades en la realización de ensayos clínicos aleatorios debido a la infrecuente y a menudo imprevisible necesidad de resucitación amplia. Mayoría de los estudios en la reanimación neonatal se derivan de modelos maniquí que no verdaderamente reflejar cambios fisiológicos o cochinillo modelos que han limpiado su líquido pulmonar y que han completado la transición de feto a la circulación neonatal. El presente Protocolo proporciona una descripción detallada paso a paso sobre cómo crear un modelo de cordero fetal asfixia perinatal. El modelo propuesto tiene una transición de la circulación y los pulmones llenos de líquido, que imita humanos recién nacidos después del nacimiento y es, por tanto, un excelente modelo animal para estudiar la fisiología del recién nacido. Una importante limitación a los experimentos de cordero es el mayor costo asociado.
Asfixia perinatal ocurre en aproximadamente 4 por cada 1.000 nacidos de término en los Estados Unidos y es responsable de aproximadamente el 25% de los 4 millones de muertes neonatales en todo el mundo1,2. A lo largo del desarrollo natural del feto, varias adaptaciones deben ocurrir durante el parto y al nacimiento para permitir una transición sin problemas desde el intra - al ambiente extrauterino cuando los pulmones toman el papel de la placenta como órgano de intercambio gaseoso. Cualquier falla del recién nacido a la adecuada transición al nacer más compromete esfuerzos de resucitación. Casos al pulmón fetal es incompleta o retrasada3,4y las circunstancias que resultan en un impacto de5 de la resistencia vascular pulmonar alta persistente (PVR) la eficacia de la ventilación, que sigue siendo el más intervención importante en la reanimación de los recién nacidos asfixiados6. Además, el pinzamiento inmediato del cordón umbilical y extracción de la placenta de baja resistencia puede conducir a cambios bruscos en volumen cardiaco que puede causar la disfunción miocardio7,8.
Debido a la frecuente necesidad de resucitación agresiva (necesidad de compresiones o administración de epinefrina)1,9, hay una falta de evidencia fuerte de grandes ensayos clínicos para apoyar la corriente requisitos del programa (PNR) de la reanimación neonatal. Muchos estudios de investigación traslacional en la reanimación neonatal son efectuados por el postnatales modelos animales (especialmente cerdos) que no representan adecuadamente la transición de circulación fetal y en los pulmones llenos de líquido inherentes al recién nacido en la entrega habitación. Dado los desafíos relacionados con la transición de circulación fetal a la circulación neonatal, el modelo de cordero fetal cardiaco asfixia perinatal es ideal para estudiar la fisiología de resucitación neonatal.
Los estudios de Joseph Barcroft en fetal corderos, ya en la década de 1930, sentó las bases de fisiología fetal y neonatal10. En la segunda mitad delsiglo 20 , experimentos innovadores y meticulosos de Geoffrey Dawes en fetal cordero modelos, y más adelante ésos por Abraham Rudolph han contribuido enormemente al conocimiento de la fisiología cardiovascular y pulmonar en el feto 11 , 12. en los últimos años, estudios en modelos de cordero fetal y neonatal han proporcionado una mejor comprensión del impacto de la ventilación sobre la hemodinámica13,14, los efectos de la oxigenación en PVR15,16, así como de los cambios circulatorios que ocurren durante el cable de sujeción de7,17. Finalmente, en el último año, el cordero recién nacido ha servido como un modelo novedoso para el estudio de los efectos hemodinámicos durante la resucitación18,19,20. Un relato paso a paso de lo que está implicado en la realización de un experimento de cordero, así como una descripción detallada de la instrumentación quirúrgica y se presentará la metodología experimental.
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Todos los protocolos han sido aprobados por el institucional Animal Care y el Comité uso (IACUC) por el búfalo de la Universidad Estatal de Nueva York. Una ilustración de la metodología que representa la invasión y la monitorización no invasiva se muestra en la figura 1.
1. los animales
2. pre-operatorio preparación
3. anestesia
Nota: Antes de la cesárea, la oveja es sedada con diazepam y ketamina e intubada seguido por la inhalación continua de isoflurano (1-4%). Adecuación de la anestesia es supervisado por la evaluación de los reflejos de tono y ojo músculo junto con el monitoreo continuo del nivel de oxígeno de la sangre con un oxímetro de pulso y el ritmo cardíaco. Durante la instrumentación, será bajo la influencia de la anestesia materna y recibirá anestesia local para sitios de instrumentación.
4. cirugía
Nota: Los procedimientos fetales y cesárea se consideran cirugías agudas en la que los animales son sacrificados mediante la administración IV de 100 mg/kg de pentobarbital de sodio. Las ovejas son sacrificadas después de la entrega de los corderos y los corderos son sacrificados después de la realización de los experimentos. Eutanasia es confirmada por asistolia. También se emplea un método secundario de toracotomía bilateral o exsanguinación. En este caso, la técnica aséptica no se practica durante la cirugía. Personal todavía necesita usar vestimenta de protección durante el contacto animal.
5. vía aérea fetal
6. cuello barco instrumentación
7. gran vaso instrumentación
8. no-medición invasiva
9. recolección de datos
10. protocolo experimental
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Después de la instrumentación de los corderos fetales, variables hemodinámicas pueden ser registrados (figura 3 y figura 4), analizaron e interpretaron (figura 5). Se recogerán muestras de sangre frecuentes, y la figura 6 muestra el pH y la PaCO2 datos de uno de los experimentos. En ocasiones, catéteres o sondas de flujo pueden funcionar mal o conseguirán desa...
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El modelo de cordero es comparable en tamaño a los recién nacidos humanos y permite fácil instrumentación para medir las variables hemodinámicas invasivas. El modelo fetal, recién nacido Cordero ha sido una herramienta invaluable que rico ha contribuido a entender la transición de la circulación, así como la fisiología pulmonar y cardiovascular del recién nacido. Varios modelos experimentales de cordero se han establecido durante los años para estudiar estrategias de ventilación óptima en prematuros corderos
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Los autores no tienen conflictos de intereses
| Nombre | Empresa | Número de catálogo | Comentarios |
|---|---|---|---|
| Pinza Babcock | Miltex | 16-44 | |
| Transductor de presión arterial | Becton Dickinson | P23XL-1 | Se utiliza con cúpulas de diafragma rellenas de solución salina |
| Tijeras de punta roma | Miltex | 98SCS50-56 | |
| Capnógrafo | Philips | 7900 | Utilizado con sensores de flujo neonatal |
| Lápiz de cauterización | Valley Lab | 287879 | |
| Unidad de cauterización | Valley Lab | SSE2K | |
| Pinza curva | Everost 711714 | ||
| Software de adquisición de datos | Biopac Systems Inc. | ||
| Electrocardiograma | Biopac Systems Inc. | ||
| Tubo endotraqueal - | Rusch | 111780035 | |
| modulador de flujo | Transonic Systems Inc. | Sonda de flujo T403 | |
| Transonic Systems Inc. | MC4PSS-LS-WC100-CM4B-GA | ||
| Sonda gástrica | Jorgensen Labs Inc. | J0106LE | Para descomprimir y drenar el estómago de la oveja |
| Cortapelos | Andis Company | 65340 | # 40 Cuchilla Cortapelos |
| Calentador radiante para bebés | GE healthcare | 7810 | |
| Catéteres intravenosos | Becton Dickinson | 381234 | |
| Tijeras quirúrgicas Iris | Patterson | 510585 | |
| Kelly Foreceps | Patterson | ||
| Pinzas para mosquitos | RICA Productos quirúrgicos INC | 1-74 | |
| Espectroscopia de infrarrojo cercano | Nonin Medical Inc. | X-100M | Sensmart Equanox & Sensor |
| PureSAT RSO2 Nonin | Medical Inc. | 8004CB-NA | Neonatal |
| Mango y cuchilla de bisturí | Everost | 707203 | |
| Suturas -seda 2-0 | Covidien | SS-695 | Se utiliza para atar catéteres a los vasos |
| Suturas -vicryl 2-0 | Ethicon | J269H | Se utiliza para cerrar la toracotomía |
| Resucitador de piezas en T | Neo-Tee | MCM1050812 | |
| Bridas umbilicales | Jorgensen Labs Inc. | ||
| Weitlander Retractor | Miltex | 11-625 |
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