Summary
सुपरास्पिनल क्षेत्र में क्षणिक रिसेप्टर संभावित वैनलिड टाइप 1 (टीआरपीवी1) को मस्तिष्क समारोह में कुछ भूमिकाएं निभाने का सुझाव दिया गया है। यहां वर्णित चूहों में सुपरास्पिनल टीआरपीवी1 डिसेंसिटाइजेशन के लिए रेसिनिफेरॉक्सिन के इंट्रासेरेब्रोवेंट्रिकुलर इंजेक्शन के लिए एक प्रोटोकॉल है। कुछ दर्द परीक्षणों के लिए प्रक्रियाएं भी प्रस्तुत की जाती हैं।
Abstract
क्षणिक रिसेप्टर संभावित वैनलिड टाइप 1 (TRPV1), एक थर्मोसेंसिटिव सेशन चैनल, परिधीय नसों में दर्द को ट्रिगर करने के लिए जाना जाता है। इसके परिधीय कार्य के अलावा, मस्तिष्क कार्यों में इसकी भागीदारी का भी सुझाव दिया गया है। रेसिनिफेरॉक्सिन (आरटीएक्स), एक अल्ट्रापोसेंट टीआरपीवी1 एगोनिस्ट, टीआरपीवी1 के दीर्घकालिक असंवेदनशीलीकरण को प्रेरित करने के लिए जाना जाता है, और यह डिसेंसिटाइजेशन टीआरपीवी1-एक्सप्रेसिंग कोशिकाओं की शारीरिक प्रासंगिकता की जांच के लिए एक वैकल्पिक दृष्टिकोण रहा है। यहां हम चूहों में आरटीएक्स के साथ इंट्राशेरेब्रोवेंट्रिकुलर (i.c.v.) उपचार के लिए एक प्रोटोकॉल का वर्णन करते हैं। परिधीय टीआरपीवी1 उत्तेजना (आरटीएक्स परीक्षण) और यांत्रिक उत्तेजना (पूंछ दबाव परीक्षण) के लिए एनओसी परीक्षण के लिए प्रक्रियाओं का वर्णन किया जाता है। यद्यपि चूहों की असंगत प्रतिक्रियाएं जिन्हें आरटीएक्स यानी वी प्रशासित किया गया था, नियंत्रण समूहों के उन लोगों के बराबर थे, आरटीएक्स-i.c.v.-प्रशासित चूहे एसिटामिनोफेन के एनाल्जेसिक प्रभाव के प्रति असंवेदनशील थे, सुझाव देते हैं कि i.c.v. RTX उपचार सुप्रास्पिनल-चयनात्मक टीआरपीवी1 डिसेंसिटाइजेशन को प्रेरित कर सकता है। इस माउस मॉडल मस्तिष्क में TRPV1 की भूमिका का अध्ययन करने के लिए एक सुविधाजनक प्रयोगात्मक प्रणाली के रूप में इस्तेमाल किया जा सकता है/ इन तकनीकों को अन्य दवाओं के केंद्रीय कार्यों के अध्ययन के लिए भी लागू किया जा सकता है।
Introduction
पशु परिधीय नसों पर सेंसर के माध्यम से अपने पर्यावरण से विभिन्न भौतिक और रासायनिक उत्तेजनाओं प्राप्त करते हैं। क्षणिक रिसेप्टर संभावित वेनिलॉइड टाइप 1 (टीआरपीवी1) थर्मोसेंसिटिव, नॉनसेलिटिव शन चैनलों में से एक है जो हीट सेंसर1,,2,और टीआरपीवी1 के सक्रियण और/या मॉडुलन के रूप में कार्य करता है, सामान्य और भड़काऊ दोनों संदर्भों में नोक-पोटेशन के लिए एक महत्वपूर्ण कदम माना जाता है3। हालांकि समग्र अभिव्यक्ति पैटर्न विवादास्पद है, टीआरपीवी1 की अभिव्यक्ति का सुझाव भी सुप्रास्पिनल क्षेत्रों में दिया गया है, जिसमें विभिन्न मस्तिष्क गतिविधियों (निशाचर4,थर्मोरेगुलेशन5,चिंता6,ध्यान घाटे अतिसक्रियता विकार7और मिर्गी8)शामिल हैं) । इसके अलावा, हाल ही में यह सुझाव दिया गया है कि एक व्यापक रूप से उपयोग की जाने वाली दर्द निवारक दर्द निवारक एसिटामिनोफेन, केंद्रीय टीआरपीवी1 की सक्रियता को अपनी एनाल्जेसिक कार्रवाई9,,10को प्रकाश में लाने के लिए मध्यस्थता करती है।
जानवरों के लिए कैप्सैसिन और रेसिनिफेरॉक्सिन (आरटीएक्स) सहित अतिरिक्त टीआरपीवी1 एगोनिस्ट का प्रशासन टीआरपीवी1-पॉजिटिव न्यूरॉन्स की मौत की ओर जाता है और टीआरपीवी1 agonists11,,12के लिए लंबे समय तक चलने वाले desensitization । स्थानीय आवेदन (इंट्राथेकल,13,14,इंट्रासिस्टरल,15, 16,,17,और इंट्राएंग्लियोनल18)के साथ संयुक्त रूप से, इस रासायनिक एब्लेशन दृष्टिकोण ने टीआरपीवी1 के शारीरिक कार्यों की जांच करने का एक वैकल्पिक तरीका प्रदान किया है।17 हमने हाल ही में बताया है कि आरटीएफएक्स का इंट्रासेरेब्रोवेंट्रिकुलर (i.c.v.) इंजेक्शन चूहों में एसिटामिनोफेन के एनाल्जेसिक प्रभाव को रोकता है, जो सुप्रास्पिनल-चयनात्मक टीआरपीवी1 डिसेंसिटाइजेशन19का सुझाव देता है। इस पांडुलिपि में, हम i.c.v. इंजेक्शन और बाद में दर्द परीक्षण के लिए सटीक प्रोटोकॉल प्रस्तुत करते हैं।
मस्तिष्क के वेंट्रिकल में दवाओं का सीधा इंजेक्शन किसी भी परिधीय प्रभाव को कम करते हुए उनके केंद्रीय प्रभावों का अध्ययन करना संभव बनाता है। यहां प्रस्तुत i.c.v. इंजेक्शन प्रक्रिया हेली और मैककॉर्मिक20द्वारा बताई गई विधि का संशोधन है । यह विधि कोरोनल सीवन के माध्यम से पार्श्व वेंट्रिकल्स में एक इंजेक्शन सुई के सम्मिलन को शामिल करना सरल है और कैनुलेशन के लिए किसी विशेष उपकरण या शल्य चिकित्सा प्रक्रियाओं की आवश्यकता नहीं है।
TRPV1 agonists के परिधीय स्थानीय आवेदन एक जलती हुई दर्द सनसनी और न्यूरोजेनिक सूजन उदाहरण भी देते हैं। चूहों कि प्रणालियां आरटीएक्स के साथ इलाज कर रहे हैं, और TRPV1-KO चूहों, इस उत्तेजना13के प्रति असंवेदनशील हैं । हमने आरटीएक्स-i.c.v. में परिधीय टीआरपीवी1 के संरक्षण की पुष्टि करने के लिए आरटीएक्स (आरटीएक्स टेस्ट) का इंट्राप्लांटर इंजेक्शन किया है। चूहों. यह विधि पारंपरिक फॉर्मेलिन परीक्षण21का संशोधन है ।
यह सूचित किया गया है कि आरटीएक्स और टीआरपीवी1-को चूहों के साथ व्यवस्थित रूप से इलाज किए जाने वाले चूहों में यांत्रिक उत्तेजनाओं11 , 13,,,22के लिए एक सामान्य सीमा दिखाई जाती है।13 यहां हम एसिटामिनोफेन के एनाल्जेसिक प्रभाव में परिवर्तन के परीक्षण के लिए पूंछ दबाव परीक्षण के लिए एक प्रक्रिया प्रस्तुत करते हैं।
इन प्रक्रियाओं के सभी रूढ़िवादी और बहुमुखी हैं, और अन्य दवाओं के अध्ययन के लिए लागू किया जा सकता है।
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Protocol
यहां इस्तेमाल किए जाने वाले सभी प्रायोगिक प्रोटोकॉल को मुसाशिनो विश्वविद्यालय की एनिमल केयर एंड यूज कमेटी ने मंजूरी दी थी । पुरुष ddY चूहों (एसएलसी, शिज़ुओका, जापान) पानी और खाद्य विज्ञापन libitum के साथ प्रयोगों से पहले एक 12-h प्रकाश/अंधेरे चक्र के तहत कम से 7 दिनों के लिए रखा गया था । प्रयोगों के लिए 5 या 6 सप्ताह पुराने चूहों का इस्तेमाल किया गया ।
1. ड्रग्स की तैयारी
-
आरटीएक्स
नोट: शराबी RTX समाधान गंभीर त्वचा जलता है और आंखों को नुकसान का कारण बन सकता है । हैंडलिंग करते समय सुरक्षा के लिए रबर दस्ताने और चश्मे का उपयोग करना सुनिश्चित करें। इस स्टॉक सॉल्यूशन का इस्तेमाल 6 महीने तक किया जा सकता है।- 1 मिलीग्राम आरटीएक्स में इथेनॉल के 500 माइक्रोन जोड़ें।
- ऊपर के समाधान और भंवर अच्छी तरह से पॉलीऑक्सीथिलीन (20) सॉर्बिटन मोनोलेट के 500 माइक्रोन जोड़ें।
- मिश्रण और भंवर अच्छी तरह से शारीरिक नमकीन के 4 एमएल जोड़ें।
- 1.5-एमएल स्क्रू कैप ट्यूब में समाधान के 40 μL अलीकोट, और उन्हें -40 डिग्री सेल्सियस पर स्टोर करें।
-
एसीटामिनोफेन
- 30 मिलीग्राम/एमएल की एकाग्रता पर एसीटामिनोफेन के लिए 20% w/v प्रोपलीनेग्लाइक घोल जोड़ें, और एक सोनिकेटर के साथ भंग करें । चूंकि एसिटामिनोफेन विघटन के कई घंटे बाद कमरे के तापमान पर तेज़ हो सकता है, उपयोग से ठीक पहले तैयार करें या उपयोग तक समाधान को गर्म रखें।
2. आरटीएक्स के चमड़े के नीचे या इंट्राचेरेब्रोवेंट्रिकुलर इंजेक्शन
- 1.1 में तैयार स्टॉक किए गए समाधान को पिघला दें। ऊपर और यह खारा या कृत्रिम मस्तिष्कद्रस्तर तरल पदार्थ (ACSF) में 20 μg/mL को पतला (एमएमए में): ११९ NaCl, 2.5 केसीएल, 1 एनएएच2पीओ4,26 नाएचसीओ3,11 ग्लूकोज, 1.3 एमजीएसओ4,2.5 सीएसीएल2 95% ओ2 और 5% सीओ 2 (पीएच7.2) के साथ समतुल्य।
- पेंटोबार्बिटल सोडियम नमक (60 मिलीग्राम/किलो, इंट्रापेरिटोनली) के साथ चूहों को एनेस्थेटाइज करें, और राइटिंग पलटा के नुकसान की जांच करें।
- एससी उपचार के लिए, 0.1 एमएल/10 ग्राम शरीर के वजन की मात्रा में गर्दन के पीछे आरटीएक्स (20 μg/l) इंजेक्ट करें। कंट्रोल ग्रुप के लिए वाहन (10% इथेनॉल, 10% पॉलीऑक्सीथीन (20) सोर्बिटन मोनोलेट और 80% खारा) को इंजेक्ट करें।
- i.c.v. उपचार के लिए, 5 माइक्रोन आरटीएक्स (20 μg/mL) को सही पार्श्व वेंट्रिकल में इंजेक्ट करें। कंट्रोल ग्रुप के लिए वाहन (10% इथेनॉल, 10% पॉलीऑक्सीथीन (20) सोर्बिटन मोनोलेट और 80% एसीएसएफ) को उसी तरह इंजेक्ट करें।
- सुई के 3.0-3.5 मिमी टिप(चित्रा 1A)को बेनकाब करने के लिए एक धातु ट्यूब (0.8 मिमी मैंने) के माध्यम से एक डिस्पोजेबल 27-जी सुई पास करें।
- माउस के सिर को 70% अल्कोहल के साथ कीटाणुरहित करें, और माउस की स्क्वैमोसल हड्डियों को उंगलियों(चित्रा 1B)के साथ मजबूती से पकड़ें।
नोट: स्क्वैमोसल फलाव की स्थिति पर ध्यान दें, क्योंकि ये फलाव इंजेक्शन के लिए स्थलों के रूप में काम करेंगे। - सिर पर सुई को बाद में ले जाएं, और सगितल सीवन को ढूंढें क्योंकि सुई टिप सीवन पर झुका हुआ है।
- दाईं ओर 1 मिमी के बारे में टिप ले जाएँ, तो टिप rostrally ले जाएँ, और 2.4.3 के साथ के रूप में कोरोनल सीवन लगता है। (चित्रा 1B)।
- सुई को धीरे-धीरे और खड़ी डालें, आरटीएक्स समाधान को लगभग 10 सेकंड में इंजेक्ट करें, और इसे लगभग 10 सेकंड तक दबाएं।
- धीरे-धीरे सुई वापस लें, और माउस को अपने घर के पिंजरे में वापस करें। रक्तस्राव आमतौर पर कम या अनुपस्थित होता है। यदि प्रमुख रक्तस्राव होता है, तो एक और माउस के उपयोग पर विचार किया जाना चाहिए।
- पूर्वउपचारित चूहों को आरटीएक्स परीक्षण या पूंछ दबाव परीक्षण (क्रमशः चरण 3 और 4) के विषयों के रूप में असाइन करें।
3. आरटीएक्स टेस्ट
नोट: परीक्षण 10:00 बजे से 5:00 बजे के बीच किया जाता है । टेस्टिंग रूम 200 लक्स और 24-26 डिग्री सेल्सियस पर रखा गया है।
- आरटीएक्स (चरण 2.) के साथ पूर्व उपचार के एक सप्ताह बाद, परीक्षण शुरू करने से पहले चूहों को कम से कम 60 मिनट परीक्षण कक्ष में स्थानांतरित करें।
- वजन और एक प्लेक्सीग्लास पिंजरे में व्यक्तिगत रूप से प्रत्येक माउस जगह (29.5 × 17.5 ×13.5 सेमी 3 ऊंचाई) कम से कम 30 मिनट परीक्षण शुरू करने से पहले ताकि यह पर्यावरण के लिए अनुकूल करने के लिए अनुमति देने के लिए।
नोट: परीक्षणों के आदेश को पूर्वउपचार समूहों में प्रतिसंतुलित किया जाना चाहिए । - परीक्षण से पहले माउस इंट्रापेरिटोनली 20 मिनट के लिए एसीटामिनोफेन (300 मिलीग्राम/किलो) का प्रशासन करें।
- माउस को एक छोटे कपड़े के बैग में ढीला रखें, और दाहिने हिंद पंजा की एड़ी में 30 गेज की सुई डालें। चलने वाले पैड के पास सुई को चमड़े के नीचे आगे बढ़ाएं, और आरटीएक्स समाधान (0.05 μg/mL) के 20 माइक्रोन इंजेक्ट करें।
- प्रत्येक 5 मिनट के ब्लॉक में प्रभावित पंजा के थेग्ब्रोस क्षेत्र में चाट/काटने के व्यवहार की अवधि को मापें ।
4. टेल प्रेशर टेस्ट
नोट: एक रान्सारे-Selitto प्रकार के दबाव मीटर का उपयोग तीव्र यांत्रिक एनओसी के लिए सीमा का आकलन करने के लिए किया जाता है। परीक्षण सुबह 10:00 बजे से शाम 5:00 बजे के बीच किया जाता है । टेस्टिंग रूम 200 लक्स और 24-26 डिग्री सेल्सियस पर रखा गया है।
- आरटीएक्स (स्टेप 2.) के साथ पूर्वउपचार के एक सप्ताह बाद, चूहों को परीक्षण कक्ष में स्थानांतरित करें, और प्रत्येक माउस को व्यक्तिगत रूप से प्लेक्सीग्लास पिंजरे में वजन और रखें।
- पूंछ के आधार से 1.5 और 2.5 सेमी पर स्पॉट चिह्नित करें।
- माउस को एक छोटे कपड़े के बैग में ढीला रखें, और कुंद जांच के साथ धब्बे पर दबाव लागू करें।
नोट: ऊतक क्षति से बचने के लिए 250 ग्राम का कटऑफ दबाव लगाया जाता है। - भागने के व्यवहार (पूंछ व्हिस्किंग, घुमा और स्क्वाकिंग) को प्रकाश में लाने के लिए आवश्यक दबाव निर्धारित करें, और दो स्थानों पर निर्धारित दबाव को औसत करके nociceptive दहलीज की गणना करें।
- चरण 4.3 दोहराएं। 4.4 करने के लिए। हर 15 मिनट।
- बेसलाइन प्राप्त करने के बाद, माउस इंट्रापेरिटोनली में एसीटामिनोफेन (300 मिलीग्राम/किलो) का प्रशासन करें। प्रशासन के बाद, कदम 4.3 दोहराएं। और 4.4 हर 15 मिनट।
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Representative Results
i.c.v.-इलाज चूहों उनकी उपस्थिति, सहज गतिविधियों, शरीर के वजन19 और कोर शरीर के तापमान (वाहन का इलाज समूह, ३८.४ ± ०.३ डिग्री सेल्सियस, एन = 6 में कोई स्पष्ट असामान्यताएं दिखाते हैं; आरटीएक्स-इलाज समूह, 38.7 ± 0.2 डिग्री सेल्सियस, एन = 6)।
चित्रा 2A-B-B आरटीएक्स के इंट्राप्लांटर इंजेक्शन के लिए एससी-या i.c.v.-इलाज चूहों की जवाबदेही दिखाते हैं । वाहन का इलाज चूहों की चाट/काटने का व्यवहार पहले 10 मिनट19में उल्लेखनीय था । हालांकि एससी-प्रीट्रीट चूहों ने चाट/काटने का व्यवहार बिल्कुल नहीं दिखाया, लेकिन i.c.v.-प्रीट्रीट चूहों ने आम तौर पर आरटीएक्स के प्लांटर इंजेक्शन का जवाब दिया । इसके अलावा, जैसा कि चित्रा 2Bमें दिखाया गया है, एसिटामिनोफेन (३०० मिलीग्राम/किलो) के इंट्रापेरिटोनियल प्रशासन ने वाहन-i.c.v.-इलाज चूहों के चाट/काटने के व्यवहार को कम कर दिया, लेकिन आरटीएक्स-i.c.v.-इलाज चूहों की नहीं ।
चित्रा 2C पूंछ दबाव परीक्षण में एसीटामिनोफेन (३०० मिलीग्राम/किलो) के एनाल्जेसिक प्रभावों को दर्शाता है । एसीटामिनोफेन ने दोनों परीक्षणों में वाहन-प्रीट्रीड चूहों की नोसेप्टिव प्रतिक्रिया को कम कर दिया, लेकिन एसिटामिनोफेन के एनाल्जेसिक प्रभाव चूहों में बाधित थे जो आरटीएक्स के साथ i.c.v. का पूर्वउपचार किया गया था।
चित्रा 1: i.c.v. इंजेक्शन के फोटोग्राफिक और योजनाबद्ध दृश्य। (क) 1.c.v. इंजेक्शन के लिए उपयोग की जाने वाली सुई। (ख) माउस खोपड़ी की स्कीमा और सुई टिप का मूवमेंट । स्क्वैमोसल हड्डियों को नीले रंग में दिखाया गया है। कृपया इस आंकड़े का एक बड़ा संस्करण देखने के लिए यहां क्लिक करें ।
चित्रा 2: चूहों की Nociceptive प्रतिक्रियाएं जो पूर्वउपचारित एससी या आरटीएक्स के साथ i.c.v. थे। (क) समय पाठ्यक्रम (बाएं पैनल) और एससी-प्रीट्रीट चूहों के चाट/काटने वाले व्यवहार (दाएं पैनल) का कुल समय । आरटीएक्स को समय शून्य (तीर सिर द्वारा इंगित) में प्लांटर क्षेत्र में इंजेक्ट किया गया था। (ख) समय पाठ्यक्रम (बाएं पैनल) और i.c.v.-पूर्वनियोजित चूहों के चाट/काटने के व्यवहार (दाएं पैनल) का कुल समय । या तो एसीटामिनोफेन (300 मिलीग्राम/किलो) या उसके वाहन (20% प्रोपलीनेग्लाइकोल) को आरटीएक्स के इंट्राप्लांटर इंजेक्शन (तीर सिर द्वारा इंगित) से पहले 20 मिनट इंट्रापेरिटोनली प्रशासित किया गया था। (ग) i.c.v.-प्रीट्रीड चूहों की पूंछ में यांत्रिक दर्द की सीमा और एसिटामिनोफेन का एनाल्जेसिक प्रभाव । सभी डेटा मतलब ± SEM के रूप में व्यक्त किए गए थे। प्रत्येक समूह में चूहों की संख्या कोष्ठक में दिखाई जाती है। दो पूंछ वाले मान-व्हिटनी यू-टेस्ट का इस्तेमाल दो समूहों के लिए डेटा की तुलना करने के लिए किया गया था । पीएंड एलटी;0.05 में मतभेदों को महत्वपूर्ण माना गया। एसीएपी, एसीटामिनोफेन; स्नातकोत्तर, प्रोपलीलीकोल; n.S., महत्वपूर्ण नहीं; i.pl, इंट्राप्लांटर इंजेक्शन। इन आंकड़ों को फुकुशिमा एट अल19से संशोधित किया गया है । कृपया इस आंकड़े का एक बड़ा संस्करण देखने के लिए यहां क्लिक करें ।
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Discussion
इन प्रयोगों में सबसे महत्वपूर्ण कदम i.c.v. इंजेक्शन की सफलता है। यहां इस्तेमाल की जाने वाली i.c.v. इंजेक्शन तकनीक काफी सरल है लेकिन इसके लिए कुछ अभ्यास की आवश्यकता है। प्रयोगों से पहले, रंगों के साथ अभ्यास (उदाहरण के लिए 0.5% खारा में ट्राइपैन नीला) की सिफारिश की जाती है। यदि इंजेक्शन सही ढंग से किया जाता है, तो कोरोनल सीवन पर एक सुई का निशान स्पष्ट होना चाहिए और इंजेक्शन डाई कॉन्ट्रालेटरल वेंट्रिकल और तीसरे वेंट्रिकल में मौजूद होना चाहिए। इसके अलावा इंजेक्शन के दौरान जबरन डालने से बचना चाहिए। यदि सुई टिप कोरोनल सीवन पर सही ढंग से रखा जाता है, तो सुई को खोपड़ी को आसानी से प्रवेश करना चाहिए।
इस i.c.v. तकनीक को जागने, गैर-एनेस्थेटाइज्ड चूहों पर भी लागू किया जा सकता है, और हमने इस तकनीक23,,24का उपयोग करके जांच की गई दवाओं के तीव्र केंद्रीय प्रभावों की सूचना दी है। यद्यपि वर्तमान प्रक्रिया लाभप्रद है कि कैनुलेशन के लिए कोई विशेष उपकरण आवश्यक नहीं है, लेकिन i.c.v. इंजेक्शन केवल एक बार किया जा सकता है। यदि दवाओं के बार-बार प्रशासन की आवश्यकता होती है, तो कैनुलेशन आवश्यक है।
यहां प्रस्तुत आरटीएक्स परीक्षण परिधीय टीआरपीवी13,,19के कार्य का आकलन करने के लिए एक आसान उपयोग दृष्टिकोण है। 1-10 एनजी आरटीएक्स की खुराक पर सबसे प्रमुखता से नष्ट व्यवहार देखा जा सकता है और एक टीआरपीवी1 विरोधी,19,25,कैप्साज़ीपिन के सह-इंजेक्शन द्वारा बाधित किया जा सकता है। फॉर्मेलिन परीक्षण में कुछ समूहों ने प्रयोगों को वीडियो-टेप किया है, लेकिन तदर्थ अवलोकन के बाद अक्सर मुश्किल होता है क्योंकि चूहे सिर और शरीर के साथ प्रभावित पंजा को कवर करते हैं। इसलिए, हमारी प्रयोगशाला में प्रयोगकर्ता सीधे चाट/काटने वाले व्यवहार का निरीक्षण और मापते हैं । इस परिदृश्य में, चूहों को परेशान न करने के लिए सावधानी बरती जानी चाहिए। इसके अलावा, दर्द परीक्षणों में, माउस को पर्याप्त रूप से शांत करना बहुत महत्वपूर्ण है। जरूरत से ज्यादा मजबूत मनोरंजक और एक शोर वातावरण तनाव प्रेरित एनाल्जेसिया का उत्पादन और nociceptive प्रतिक्रिया में देरी कर सकता है ।
आरएसएक्स के साथ i.c.v.-पूर्वअपचारित चूहे आरटीएक्स परीक्षण और पूंछ दबाव परीक्षण में एक सामान्य न्यसेप्टिव प्रतिक्रिया दिखाते हैं। हालांकि, ये चूहे एसिटामिनोफेन के एनाल्जेसिक प्रभावों के प्रति असंवेदनशील हैं, जिन्हें केंद्रीय टीआरपीवी19,,10मध्यस्थता करने का सुझाव दिया गया है। इन परिणामों से पता चलता है कि RTX-i.c.v. में सुपरास्पिनल-चयनात्मक TRPV1 desensitization को प्रेरित किया जा सकता है। चूहों. यद्यपि टीआरपीवी1 डिसेंसिटाइजेशन13, 14, 15,,16,,,17,,18केस्थानीय अनुप्रयोगकेसाथ किया गया है, लेकिन सुप्रास्पिनल-चयनात्मक असंवेदनशीलता अभी तक प्राप्त नहीं की गई है।18 आरटीएक्स-i.c.v. यहां प्रस्तुत इंजेक्शन प्रोटोकॉल सुपरास्पिनल फ़ंक्शन में टीआरपीवी1 की भूमिका का अध्ययन करने के लिए एक सुविधाजनक प्रायोगिक मॉडल प्रदान करेगा।
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Disclosures
लेखकों की घोषणा करने के लिए हितों का कोई टकराव नहीं है
Acknowledgments
कोई नहीं.
Materials
| Name | Company | Catalog Number | Comments |
| Resiniferatoxin | LKT Laboratories | R1774 | used for s.c./i.c.v. pretreatments and the RTX test |
| Acetaminophen | IWAKI SEIYAKU | gifted from IWAKI SEIYAKU | |
| Pentobarbital sodium salt | Tokyo Chemical Industry | P0776 | used for anesthesia |
| Ethanol (99.5) | Wako Pure Chemical Industries | 057-00456 | used for dissolving RTX |
| Polyoxyethylene(20) Sorbitan Monooleate | Wako Pure Chemical Industries | 161-21621 | used for dissolving RTX |
| 25 μL microsyringe | Hamilton | 1702LT | used for i.c.v. injection |
| 100 μL microsyringe | Hamilton | 1710LT | used for intraplantar injection |
| 26-gauge disposable needle | TERUMO | NN-2613S | used for i.c.v. injection |
| 30-gauge disposable needle | NIPRO | 01134 | used for intraplantar injection |
| Pressure meter | Ugo Basile | Analgesy-Meter Type 7200 | used for tail pressure test |
References
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