La prueba de infección de planta: Spray y mediada por la herida la inoculación con el patógeno de planta Magnaporthe Grisea

Resumen

Aquí, presentamos un protocolo para prueba de virulencia de la planta con el patógeno de la planta grisea de Magnaporthe. Este informe contribuirá a la proyección a gran escala de los patotipos de aislamientos de hongos y servir como un excelente punto de partida para la comprensión de los mecanismos resistentes de las plantas durante la reproducción molecular.

Resumen

Las plantas poseen un potente sistema para defenderse de posibles amenazas por hongos patógenos. Plantas agrícola importantes, sin embargo, las medidas actuales para combatir estos patógenos han demostrado ser demasiado conservadoras, y por lo tanto, no suficientemente eficaz y puede potencialmente riesgos ambientales. Por lo tanto, es extremadamente necesario identificar los factores de resistencia del hospedante para ayudar a controlar enfermedades de las plantas naturalmente a través de la identificación de germoplasma resistente, el aislamiento y caracterización de genes de resistencia y la reproducción molecular de cultivares resistentes. En este sentido, es necesario establecer un método de inoculación precisa, rápida y a gran escala para criar y desarrollar los genes de resistencia de la planta. El arroz explosión patógeno hongo Magnaporthe grisea causas enfermedad severa síntomas y pérdidas de rendimiento. Recientemente, M. grisea ha emergido como un organismo modelo para estudiar los mecanismos de las interacciones planta-hongo patógeno. Por lo tanto, se presenta el desarrollo de un método de prueba de virulencia de planta que es específico para M. grisea. Este método proporciona para spray de inoculación con una suspensión conidial e hirió a inoculación con cubos de micelio o gotas de la suspensión conidial. El paso clave del método de inoculación hiriente para hojas de arroz separado es hacer heridas en las hojas de la planta, que evita cualquier interferencia causada por resistencia a la penetración host. Este spray/hiriendo a protocolo contribuye a la proyección rápida, precisa y en gran escala de los patotipos de aislamientos de M. grisea . Este integrado y método de infección sistemática planta servirá como un excelente punto de partida para obtener una perspectiva amplia de temas en Fitopatología.

Introducción

Ráfaga del arroz, causada por M. grisea, es una de las más graves enfermedades de variedades de arroz en todo el mundo^1,2. El proceso por el cual M. grisea infecta plantas hospederas incluye una producción de conidios y accesorio de la superficie, una germinación de conidias y formación de apresorio, una formación de la peg de penetración y diferenciación de la hifa infecciosas, y una enfermedad ³. todas estas etapas son comunes en muchos otros hongos patógenos de plantas, y, de hecho, un bloqueo de cualquier sola etapa previene la infección de plantas hospederas. Debi....

Protocolo

1. aerosol de inoculación con una suspensión de conidios de M. grisea

1. Cultura fungicida para M.grisea
   1. Preparar el medio de cultivo agar (OTA) de avena tomate cepas fúngicas.
   2. Pesan 30-50 g de harina de avena, añadir a 800 mL de agua destilada/desionizada (ddH₂O) y hervir la mezcla durante 30 minutos en la olla eléctrica.
   3. Filtrar el jugo de avena hervida en el vaso a través de un trozo de Gasa.
   4. Agregar 150 mL de jugo de tomate y 20 g de agar para el filtrado en el vaso de precipitados y agregar ddH₂O hasta 1.000 mL.
2. Preparación d....

Resultados

El flujo de trabajo para la técnica se muestra en la figura 1. Los ensayos de infección de la planta fueron realizados en 14 días de edad susceptibles de arroz (o. sativa cv CO-39) o las hojas de cebada de 7 días de edad susceptible (H. vulgare cv oro promesa)^7,8,9. Para comprobar una infección en las hojas de arroz, una suspensión conidial (1.0 x 1.......

Discusión

Genes de resistencia a la enfermedad de planta juegan un papel esencial en la prevención de infecciones por patógenos, incluyendo hongos patógenos^1,12. Ráfaga del arroz se ha utilizado como modelo para comprender la naturaleza de las estructuras de población de patógeno y a la identificación de genes de resistencia de planta⁴. Por lo tanto, es necesario examinar el genotipo de resistencia a la enfermedad y avirulencia genotipos de las prin.......

Materiales

Lista de materiales utilizados en este artículo

Nombre	Empresa	Número de catálogo	Comentarios
Papel de filtro	de la marca GE Healthcare (Suecia)
tubo de 50 ml	CORNING(Amercia)	430290
Centrífuga	Eppendorf(Amercia)	5804R
Plato de cultivo	Thermofisher(Amercia)	150326
pipeta de 0,5-5 mL	Eppendorf
Pipeta de 100-1000 uL	Eppendorf	4920000083
Bomba de vacío	Leybold	D25B
Aguja de disección	FST	26000-35
Incubadora	MEMMERT	PYX313
Anillo de inoculación	Greiner Bio One	731175

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