Preparación, procedimientos y evaluación de la inyección de Plasma rico en plaquetas en el tratamiento de la osteoartritis de la rodilla

Resumen

Osteoartritis de la rodilla se ve con frecuencia en el Departamento de Ortopedia. Presentamos en detalle el proceso de tratamiento de toda la rodilla osteoartritis con la inyección de plasma rico en plaquetas, incluyendo preparación, procedimientos y evaluación.

Resumen

Osteoartritis de rodilla (KOA) es una de las enfermedades más frecuentes en el Departamento de Ortopedia. Los tratamientos no quirúrgicos tienen un efecto limitado en la reparación del cartílago y en la regeneración ósea. Plasma rico en plaquetas (PRP) es una sustancia autóloga bioactiva que puede reparar lesiones de cartílago y acelerar la regeneración ósea con eficacia. Sin embargo, informes de protocolos de preparación de PRP en los estudios clínicos es muy inconsistente, con la mayoría de estudios proporcionando información suficiente para permitir que el protocolo ser reproducido. Describimos un método repetible de preparación de PRP visualmente, el tratamiento de KOA mediante inyección intra-articular de PRP y métodos de evaluación de los resultados. PRP se preparó utilizando centrifugación doble manual. La capa PRP fue extraída de sangre periférica y utilizada para la inyección de la cavidad articular de rodilla. Las evaluaciones incluyen las evaluaciones de las concentraciones de plaquetas en la sangre y los resultados clínicos. Preparación del PRP por centrifugación manual requiere menos aparato y es menos costosa que plasma filtración o centrifugación con equipo. El tiempo de centrifugación de nuestro método de doble centrifugación fue de 6 y 5 minutos para las respectivas centrifugados en fuerzas de 800 a 1400 x g, respectivamente, para permitir la constante preparación de estandardizado PRP. Sin embargo, un método manual es susceptible a errores del operador, y preparación de lotes PRP no está disponible. La inyección intraarticular de PRP demostró para ser un tratamiento eficaz para osteoartritis de la rodilla. El procedimiento de tratamiento entero tomó menos de 30 minutos, la concentración de plaquetas del PRP podría estandarizarse y tratamiento fue demostrado para ser eficaz cuando se evaluó por el seguimiento.

Introducción

Osteoartritis de rodilla (KOA) es una de las enfermedades más frecuentemente vistas en el Departamento de Ortopedia; 30% - 50% de las personas mayores de 65 años de experiencia esta enfermedad¹. En la actualidad, la gerencia conservadora de KOA principalmente incluye la administración oral de antiinflamatorios no esteroideos y medicamentos nutrientes del cartílago, la inyección intraarticular de hialuronato de sodio y fisioterapia. Sin embargo, estos métodos no pueden detener el proceso de degeneración de la articulación de la rodilla². Defectos del cartílago articular pueden causar el desgaste de la superficie articular, inestabilidad de la articulación y cambios metabólicos, que son parte de la patogénesis de KOA³. Sin embargo, debido a la ausencia de vasos sanguíneos, nervios y tejido linfoide en el cartílago articular, la recuperación después del daño es difícil. Un método eficaz de reparación de cartílago es especialmente importante para el tratamiento de KOA. El tratamiento de la osteoclasia también es un enfoque clave en el tratamiento de KOA.

Plasma rico en plaquetas (PRP) es una sustancia bioactiva autóloga, y la aplicación de PRP en problemas de huesos y articulaciones se está estudiando cada vez más. La justificación biológica para el uso clínico de PRP incluye su efecto en la administración local de factores de crecimiento y modificación de la respuesta inflamatoria y sus efectos positivos sobre la proliferación y diferenciación de la célula⁴. Después de la activación después de la inyección intra-articular, PRP libera α-gránulos mediante degranulación y secretan diferentes factores de crecimiento, incluyendo el factor de crecimiento derivado de plaquetas, el factor de crecimiento transformante-β, el factor de crecimiento similar a la insulina, la factor de crecimiento epidérmico, el factor de crecimiento endotelial vascular y el factor de crecimiento fibroblasto. Estos promover la proliferación de osteoblastos y condrocitos, inhibir la degeneración de cartílago, reforzar la estabilidad del hueso subcondral y de cartílago, regular el inhibidor de tejido de expresión de gen de la metaloproteinasa y mantener el equilibrio de la síntesis y degradación de proteoglicanos^5,6. Por lo tanto, la PRP puede reparar lesiones de cartílago y acelerar la regeneración ósea.

El resultado de la inyección de PRP está influenciado por varios factores, incluyendo el sitio de muestreo⁷, el tipo de centrífuga preparación método⁸y el uso de anticoagulantes⁹ y activadores de¹⁰. Existen aproximadamente 3 tipos centrífugas métodos para preparar el PRP. Manual centrifugación, centrifugación basado en equipo o técnicas de filtración de plasma están disponibles, aunque más comúnmente se utilizan métodos manuales y basadas en equipo. El método manual requiere el equipo por lo menos, es conveniente, es de bajo costo y es fácil de realizar (figura 1). PRP es preparado por rendimiento de centrifugado manual dos veces. Anticoagulante y la sangre periférica mixta se centrifugaron para separar hemocitos de plasma y plaquetas. Después de descartar los glóbulos rojos en la capa inferior, el líquido se centrifuga para re-separación, dividiéndola en sobrenadante de plasma pobre en plaquetas, PRP media y subnatant residual células de sangre rojas. La capa media se utiliza para la inyección de la cavidad articular de la rodilla (si la cantidad es insuficiente, parte del sobrenadante puede ser dibujado). Evaluaciones del método incluyen la evaluación de la concentración de plaquetas en la sangre y los resultados clínicos.

La divulgación de los protocolos de preparación de PRP en los estudios clínicos es muy incoherente, y la mayoría de los estudios no proporcionan suficiente información para permitir que el Protocolo sea reproducido¹¹. Aquí, describimos un método reproducible de preparación de PRP y el tratamiento de KOA con inyección intra-articular de PRP con la evaluación de los resultados. Criterios de inclusión fueron pacientes con osteoartritis de la rodilla que tienen alivio del dolor pobre simple medicamentos analgésicos (como paracetamol) y tratamiento conservador. Criterios de exclusión fueron a pacientes con trastorno de drenaje linfático o retorno venoso; pacientes con infecciones comunes de la rodilla; paciente con una dermatosis o infección en el área de inyección; pacientes con fiebre; pacientes con anormalidad de la función coagulante; pacientes con enfermedad cardiovascular grave. El procedimiento de tratamiento entero toma menos de 30 minutos, y la concentración de plaquetas del PRP se ha demostrado que llegar a una medición estandarizada. Su eficacia se demuestra mediante la evaluación de los resultados durante el seguimiento cercano.

Protocolo

Los métodos descritos fueron aprobados por el Comité de ética de Hospital General de Guangdong.

1. obtener PRP por centrifugación Manual

1. Preparar al paciente en posición supina en un quirófano de flujo laminar estéril con una agradable temperatura y humedad: temperatura es 22 ° C y humedad del ambiente es 60%.
2. Utilizar una jeringa de 1 mL 0,2 mL de heparina sódica (2 mL = 12.500 U), y luego Humedezca una jeringa de 50 mL.
   Nota: 3 mL de citrato de sodio también es típico en este paso para sustituir el sodio de la heparina.
3. La plataforma de un torniquete, esterilizar el codo 2 - 3 veces y utilice la jeringa de 50 mL húmeda para extraer 30 mL de sangre periférica de la vena del codo.
4. Realizar la primera centrifugación.
   1. Sangre periférica se dividen igualmente en dos tubos de centrífuga estériles de 50 mL.
   2. Poner dos tubos en rotores horizontales y luego en la centrifugadora, en condiciones de asepsia.
   3. Centrífuga para 6 minutos a 800 x g.
   4. Tomar los rotores horizontales hacia fuera, usar guantes estériles y saque los tubos de centrífuga.
   5. Observar las estratificaciones para asegurarse de que la sangre periférica se estratifica en dos capas.
   6. Utilizar una jeringa limpia de 10 mL para recoger el líquido de los tubos de centrífuga de dos en un tubo de centrífuga limpio.
5. Realizar la segunda centrifugación.
   1. Utilice una jeringa limpia de 10 mL para agregar una cantidad equivalente de agua estéril o solución salina normal en otro tubo de centrífuga limpio equilibrio. Colocar los tubos en los rotores horizontales. Marque uno con el líquido de la capa sobrenadante por esparadrapo.
   2. Centrifugar durante 5 minutos a 1400 x g.
   3. Tomar los rotores horizontales hacia fuera, y observando las estratificaciones Compruebe que el líquido del tubo marcado se divide en tres capas.
   4. Utilice una jeringa de 10 mL a 4 mL de líquido de la célula granular media capa (rico en leucocitos, PRP) y la capa inferior del sobrenadante. Si la cantidad de la capa media es suficiente, dibujar 4 mL de eso.
   5. Poner 0,4 mL del líquido en un tubo estéril de anticoagulación (K₂EDTA, 3,6 mg) para la evaluación, dejando a 3,6 mL de líquido restante en la jeringa.
      Nota: El protocolo se puede detener aquí.

2. intra-Articular administración de PRP

1. Deja la mentira paciente supina en la mesa de operaciones y doblar la rodilla a 90 grados.
2. Localizar el sitio de punción en el margen inferior de la rótula y a 1 cm del ligamento patelar lateral. Utilice un rotulador para marcar el sitio.
3. Realizar la esterilización de la piel en el sitio de punción tres veces con anerdian III, guantes estériles y cubra con una toalla de agujero aséptica.
4. Colocar la jeringa paralela a la meseta tibial y luego realizar la punción en un ángulo de 45 grados. Introducir completamente la aguja en la piel.
5. Inyectar los 3,6 mL de PRP de la jeringa en la cavidad articular de la rodilla.
6. Cubrir la posición de punción con gasa estéril y fijar con esparadrapo.
7. Aplique presión sobre la herida durante 10 minutos. Observar para cualquier reacción adversa severa durante 30 minutos.
8. Administrar un total de tres inyecciones a intervalos mensuales.
   Nota: El protocolo se puede detener aquí.

3. postoperatorio evaluación de inyección de PRP

1. Evaluar la concentración de plaquetas en el PRP.
   1. Utilice los 0,4 mL de PRP del tubo anticoagulación (K₂EDTA, 3,6 mg).
   2. Analizar la concentración de plaquetas en la sangre de PRP mediante un analizador automático de células sanguíneas.
2. Evaluar el resultado postoperatorio de la inyección de PRP.
   1. Con una consulta 1 día antes de cada uno de los tres tratamientos, realizar más seguimiento del paciente 1 día después de cada tratamiento, 3 días después de cada tratamiento, 1 semana después de cada tratamiento, 1 mes después del tercer tratamiento, 3 meses después del tercer tratamiento y 6 meses después del tercer tratamiento.
   2. Utilizar una escala analógica visual (VAS), Western Ontario y McMaster universidades osteoartritis Index (WOMAC), puntuación de la sociedad de rodilla (KSS) y escala funcional de la rodilla de Lysholm para evaluar el efecto postoperatorio.

Resultados

Como resultado, la plaqueta cuenta de PRP alcanzó una concentración estándar nivel de 1121 x 10³/µL. Llevamos a cabo las encuestas de seguimiento 15 que se describe en el protocolo en un paciente masculino de 55 años de edad con principios KOA. Era obvio que temprano resultado clínico fue satisfactorio después de la administración intra-articular de PRP (figura 2). Sin embargo, eficacia a medio plazo fue ligeramente inferior. Se observó un efecto a...

Discusión

La concentración de plaquetas en la sangre humana normal es entre 150.000/μl y 350.000/μl, y se cree que la concentración de plaquetas del PRP debe alcanzar 1.000.000/μl, que es de 3 a 5 veces las concentraciones normales⁹. Según el sistema de jerarquía de la pata, se cree que PRP no tiene ningún efecto evidente cuando la concentración de plaquetas en la sangre es menos de tres veces la concentración normal, mientras que PRP tiene un efecto inhibidor cuando su concentración de plaquetas en la sang...

Materiales

Lista de materiales utilizados en este artículo

Nombre	Empresa	Número de catálogo	Comentarios
Centrífuga	Eppendorf	5702
Tubo de centrífuga	CORNING	430828
Rotor horizontal	Eppendorf	LL080
Anerdian III	Shanghai Likang Desinfectante HiTech Co., LTD 310173		Desinfectar la piel
Jeringa de 1 ml	KDL  Equipo médico Co., LTD	0.4 * 13 RWLB
10ml Jeringa	KDL  Equipo médico Co., LTD	1.2 * 38 TWSB
50ml Jeringa	KDL  Medical Equipment Co., LTD	0.7 * 32 TWLB
Torniquete médico	Changzhou Jinli Latex Products Co., LTD	0087-2011
Guantes quirúrgicos de goma estéril de un solo uso	Shanghai jinxiang Latex Products Co., LTD	17060
Aguja de sangre desechable	KDL  Equipo médico Co., LTD	0.55 * 20 L (II) RWLB
Inyección de heparina sódica	SPH No.1 Bioquímico & Pharmaceutical Co., Ltd	1706101	2ml:12500U
Jifro Antiséptico de Manos Enjuague Gel Libre Shanghai	Likang Desinfectante HiTech Co., Ltd	311793
Hisopo de Algodón	Médico Foshan Kangzheng Medical Supplies Co., LTD	KZ3-12	Desinfectar la piel
10ml Solución salina normal	Jiangxi Shuangshi Pharmecutical Co., LTD	140211458
Analizador automático de células sanguíneas	Beckman Coulter	LH-750
Tubo de	estéril
sangre, K2E 3.6 mg)	Becton, Dickinson y compañía	CNL17-COO56	Almacene en un lugar fresco y seco dentro de 4 a 25 grados centígrados
Pinzas	RWD CIENCIAS DE LA VIDA	F12006-10
Gasa estéril	Guangdong Ze Chang Trade Co., Ltd	170915
Yeso	adhesivo 3M Transpore	1527C-0
Rotulador de piel	Guangzhou Mingjia Medical Device Manufacturing Co., Ltd	10110