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Artículo de método

Fantasmas la grasa del agua para la validación de la proyección de imagen de resonancia magnética: un protocolo Flexible y escalable

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DOI:

10.3791/57704

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7 de septiembre de 2018

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En este artículo

Resumen

El propósito de este trabajo es describir un protocolo para la creación de un fantasma de grasa agua práctico que puede personalizarse para producir fantasmas con diferentes porcentajes de grasa y volumen.

Resumen

Desarrollo de nuevas técnicas de imagen del tejido adiposo, métodos para validar tales protocolos son cada vez más importantes. Fantasmas, réplicas experimentales de un tejido u órgano de interés, proporcionar una solución de bajo costo, flexible. Sin embargo, sin acceso a los equipos caros y especializados, construcción de fantasmas estables con altas fracciones de grasa (por ej., > niveles de 50% fracción de grasa tales como ésos vistos en tejido adiposo marrón) puede ser difícil debido a la naturaleza hidrofóbica de los lípidos. Este trabajo presenta un protocolo detallado y de bajo costo para crear fantasmas 5 x 100 mL con fracciones de grasa de 0%, 25%, 50%, 75% y 100% con componentes fácilmente accesibles (agua destilada, agar, soluble en agua y suministros de laboratorio básico (placa, vasos de precipitado, etcetera.) surfactante, benzoato de sodio, agente de contraste gadolinio-diethylenetriaminepentacetate (DTPA), aceite de cacahuete y surfactante soluble en aceite). El protocolo fue diseñado para ser flexible; puede ser utilizado para crear fantasmas con diferentes fracciones de grasas y una amplia gama de volúmenes. Fantasmas creados con esta técnica se evaluaron en el estudio de viabilidad que en comparación con los valores de la fracción grasa de grasa agua magnética resonancia a los valores de destino de los fantasmas construidos. Este estudio produjo un coeficiente de correlación concordancia de 0.998 (intervalo de confianza del 95%: 1.00 0.972). En Resumen, estos estudios demuestran la utilidad de grasa fantasmas para la validación de técnicas de imagen en una variedad de órganos y tejidos clínicamente relevantes del tejido adiposo.

Introducción

Interés en la cuantificación de tejido adiposo y triglicéridos el contenido mediante modalidades de imágenes, tales como la proyección de imagen de resonancia magnética (MRI), extiende a través de muchos campos. Áreas de investigación incluyen la investigación de los depósitos de tejido adiposo blanco y marrón y ectópico almacenamiento de lípidos en órganos y tejidos como hígado1,2de páncreas y músculo esquelético3. Desarrollo de estas nuevas técnicas para la cuantificación de grasa, se necesitan métodos para confirmar que los parámetros de proyección de imagen son válidos para la investigación y ....

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Protocolo

1. prepare el sitio de trabajo y materiales

  1. Cumplir todas las normas de seguridad del laboratorio. Use guantes y protección para los ojos. Lea la hoja de datos material de seguridad para cada uno de los reactivos utilizados y tomar las precauciones apropiadas. Revisar los materiales y lista de equipo, procedimientos químicos y precauciones de cristalería.
    PRECAUCIÓN: Este protocolo requiere el uso de una placa caliente a altas temperaturas. Tenga cuidado y use guantes resistentes al calor cuando interactuando con caliente recipientes y no toque la superficie de la placa.
  2. El espacio de trabajo y limpie las superficies con desinfectante. Lávese la....

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Resultados

Si la solución del agua ha sido preparada correctamente, una pequeña cantidad de la solución debe congelar rápidamente en un frasco de prueba (figura 1, izquierda). Si la solución separa (figura 1, derecha), la solución se prepara otra vez (como se indica en el paso 3.8 del Protocolo). Si la emulsión separa (ejemplos en la figura 2, izquierda y derec.......

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Discusión

Se describe un método robusto para crear fantasmas de grasa agua conveniente para la validación de las técnicas de imagen médicas utilizadas para cuantificar el tejido adiposo y triglicéridos contenidos en vivo. Creando dos embalses (uno para la solución de aceite) y otro para la solución de agua, se construyeron fantasmas estables con una variedad de los valores de FF, incluidos los valores superiores al 50%, sin necesidad de equipo costoso. Fantasmas de FF alta (> 50%) ofrecen la utilidad de las técnicas de im.......

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Divulgaciones

Los autores declaran que la investigación se llevó a cabo en ausencia de cualquier relación comercial o financiera que pueda interpretarse como un potencial conflicto de interés.

Agradecimientos

Apoyo financiero para esta investigación fue proporcionada a los institutos nacionales de salud (NIH) e Instituto Nacional de Diabetes y digestivo y enfermedades del riñón (NIDDK) / NIH R01-DK-105371. Agradecemos a Dr. Houchun (Harry) Hu para consejos y sugerencias sobre creación fantasma agua grasa.

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Materiales

Lista de materiales utilizados en este artículo
NombreEmpresaNúmero de catálogoComentarios
Agua destiladaAmazonasB000P9BY38Base de solución de agua
AgarSigma Aldrich IncorporatedA1296-100GAgente gelificante
Tensioactivo soluble en aguaSigma Aldrich IncorporatedP1379-500MLTensioactivo/agente emulsionante
Gadolinio-DTPA Agente de contrasteBayer Healthcare50419-0188-01Resonancia magnética Agente de contraste.
Benzoato de sodioSigma Aldrich Incorporated71300-250G
Conservante Aceite de cacahueteAmazon54782-LOUBase de solución de aceite
Surfactante soluble en aceiteSigma Aldrich IncorporatedS6760-250MLTensioactivo/agente emulsionante Placa calefactora
con agitadorFisher Scientific07-770-152
Barras revueltas (en forma de huevo)Sigma Aldrich IncorporatedZ127116-1EA
400 mLVaso Sigma Aldrich IncorporatedCLS1003400-48EA
250 mL Matraz ErlenmeyerSigma Aldrich IncorporatedCLS4450250-6EA
25 mL Pipeta Volumétrica de VidrioFisher Scientific13-650-2PCantidad = 2
50 mL Pipeta Volumétrica de VidrioFisher Scientific13-650-2SCantidad = 2
75 mL Pipeta volumétrica de vidrioFisher Scientific13-650-2TCantidad = 2
Jeringa de 3.0 mLSigma Aldrich IncorporatedZ248002-1PAK
1.0 mL JeringaSigma Aldrich IncorporatedZ230723-1PAK
EspátulaSigma Aldrich IncorporatedS3897-1EA
Escala (resolución de 100g x 0.01g)AmazonAWS-100-BLK
Pesaje de BotesSigma Aldrich IncorporatedZ740499-500EA
120 mL Frascos de VidrioMcMaster Carr Supply Co3801T73
Guantes Resistentes al Calor (par)AmazonB075GX43MN
Jeringa AgujasSigma Aldrich IncorporatedZ192341-100EA
Barra agitadora de 18" retriverFisher Scientific14-513-70
1 Frasco de vidrio transparente DramFisher Scientific03-339-25B

Referencias

  1. Franz, D., et al. Association of proton density fat fraction in adipose tissue with imaging-based and anthropometric obesity markers in adults. Int J Obes. , 1-8 (2017).
  2. Chai, J., et al.

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Reimpresiones y permisos

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