Presentamos un modelo de cáncer de mama Murino ortotópico y mastectomía radical modelo con tecnología de bioluminiscencia para cuantificar la carga del tumor para imitar la progresión del cáncer de mama humano.
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Artículo de método
Presentamos un modelo de cáncer de mama Murino ortotópico y mastectomía radical modelo con tecnología de bioluminiscencia para cuantificar la carga del tumor para imitar la progresión del cáncer de mama humano.
Modelos de ratón in vivo para evaluar la progresión del cáncer de mama son esenciales para la investigación del cáncer, incluyendo el desarrollo preclínico de fármacos. Sin embargo, la mayoría de los detalles técnicos y prácticos comúnmente se omite en los manuscritos publicados que, por lo tanto, hace que sea difícil de reproducir los modelos, particularmente cuando se trata de técnicas quirúrgicas. Tecnología de bioluminiscencia permite la evaluación de pequeñas cantidades de células cancerosas incluso cuando un tumor no palpable. Utilizando las células de cáncer expresan luciferasa, establecemos una técnica de inoculación de mama cáncer ortotópico con una tasa alta de tumorigénesis. Metástasis del pulmón se evalúa utilizando una técnica ex vivo . Nosotros, entonces, establecer un modelo de mastectomía con una tasa baja de recurrencia local para evaluar la carga de tumor metastático. Adjunto, describimos, detalladamente, las técnicas quirúrgicas de implantación ortotópica y mastectomía para cáncer de mama con una tasa alta de tumorigenesis y tasas de baja recurrencia local, respectivamente, para mejorar la eficiencia de modelo de cáncer de mama.
Modelos animales juegan un papel clave en la investigación del cáncer. Cuando una hipótesis se prueba in vitro, debe ser probado in vivo para evaluar su relevancia clínica. Metástasis y progresión del cáncer son a menudo mejor capturados por los modelos animales en comparación con modelos in vitro, y es esencial para probar un nuevo fármaco en un modelo animal como un estudio preclínico de drogas desarrollo1,2. Sin embargo, los detalles técnicos de los experimentos con animales a menudo no son bien descritos en los artículos publicados, lo que es difícil reproducir el modelo con éxito. De hecho, los autores qu....
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Se obtuvo aprobación del Comité de uso y Roswell Park Cancer Center institucional Animal atención integral para todos los experimentos.
Nota: Se obtienen nueve a ratones BALB/c hembras de doce semanas de edad. Se utilizan células luc2 4T1, un ratón adenocarcinoma mamario línea celular derivada de ratones BALB/c que ha sido diseñado para luciferase expresa. Estas células se cultivan en medio de Roswell Park Memorial Institute (RPMI) 1640 con 10% suero bovino fetal (FBS).
1. preparación de instrumentos
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El propósito del modelo ortotópico es imitar la progresión del cáncer humano (es decir, el crecimiento del tumor primario, seguido por metástasis de ganglios linfáticos y metástasis del pulmón entonces distante)15. Después de la inoculación de células de cáncer, la bioluminiscencia se cuantifica regularmente (dos o tres veces / semana) (figura 1A). La bioluminiscencia en los pulmones es más profundo y más pequeño que la lesión.......
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En la última década, hemos venido estableciendo varios modelos murinos de cáncer, incluyendo mama cáncer modelos3,7,13,16,20,21. Previamente, hemos demostrado que mama cáncer células orthotopic la inoculación en el tejido de la glándula mamaria bajo visión directa produce un tumor más grande con menos variabilidad de tamaño e.......
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Los autores no tienen nada que revelar.
Este trabajo fue apoyado por subvenciones de NIH grant R01CA160688 y Susan G. Komen Foundation investigador inició investigación (IIR12222224) a los ratones K.T. se adquirieron imágenes de bioluminiscencia por recurso compartido de recurso compartido imágenes traslacional en el Roswell Park Centro integral del cáncer, que fue apoyado por el cáncer centro apoyo Grant (P30CA01656) y subvención compartida de la instrumentación (S10OD016450).
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| Nombre | Empresa | Número de catálogo | Comentarios |
|---|---|---|---|
| Micro tijeras de disección | Roboz | RS-5983 | Para inoculación de células cancerosas y mastectomía |
| Pinza Adson | Roboz | RS-5233 | Para inoculación de células cancerosas y mastectomía |
| Portaagujas | Roboz | RS-7830 | Para inoculación de células cancerosas y mastectomía |
| Mayo | Roboz | RS-6873 | Para |
| suturas | de seda ex vivo 5-0Look | 774B | Para la inoculación de células cancerosas y la mastectomía |
| Esterilizante seco (Germinator 500) | Braintree Scientific | GER 5287-120V | Para la inoculación de células cancerosas y la mastectomía |
| Clipper | Wahl | 9908-717 | Para la inoculación de células cancerosas y la mastectomía |
| Matrigel | Corning | 354234 | Para la inoculación de células cancerosas |
| D-Luciferina, sal | de potasioGOLD-Bio | LUCK-1K | Para la cuantificación de la bioluminiscencia |
| Roswell Park Memorial Insitute 1640 | Gibco | 11875093 | Para cultivo celular |
| Fetal Bovino Serub | Gibco | 10437028 | Para cultivo celular |
| Tripsina-EDTA (0.25%) | Gibco | 25200056 | Para cultivo celular |
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