Aquí, presentamos un protocolo para establecer una inducción de pérdida auditiva conductiva replicable a través de la punción quirúrgica de la membrana timpánica y la verificación por visualización del otoscopio y evaluación del comportamiento por golpe de aplauso.
Se requiere una suscripción a JoVE para ver este contenido. Inicie sesión o comience su prueba gratuita.
Artículo de método
Inducción quirúrgica simple de pérdida auditiva conductiva con verificación mediante la visualización del otoscopio y la respuesta de golpe de golpe conductual en Rata
* These authors contributed equally
En este artículo
Resumen
Resumen
La hipoacusia conductiva (CHL) es una deficiencia auditiva prevalente en los seres humanos. El objetivo del protocolo es describir un procedimiento quirúrgico simple para inducir CHL en roedores. El protocolo demuestra CHL por punción de membrana timpánica. La verificación de la cirugía de CHL fue por examen de otoscopio y evaluación del comportamiento por respuesta de sobrescopio de aplausos, replicable y confiable, y son métodos simples para demostrar que se ha producido pérdida auditiva. El sencillo procedimiento de CHL es ventajoso debido a su reproducibilidad y flexibilidad para diferentes actividades en la investigación de pérdida auditiva. Las limitaciones de inducir CHL por un enfoque quirúrgico se asocian con la curva de aprendizaje para realizar el procedimiento quirúrgico y la confianza en el examen audiológico. Inducir una discapacidad auditiva por CHL permite estudiar fácilmente las manifestaciones neuronales y los resultados conductuales de la pérdida auditiva.
Introducción
La prevalencia de la pérdida auditiva en niños y adultos es de aproximadamente 19,5%1 y 15,2%2 respectivamente. Sin embargo, aproximadamente el 39,3% de todos los recién nacidos con un examen auditivo anormal no reciben tratamiento corrector según lo informado por los Centros para el Control de Enfermedades3. La pérdida auditiva es una condición ampliamente estudiada, y el roedor es un modelo robusto para estudiar trastornos normales relacionados con la audición y la audición4,5,6,
Acceso restringido. Inicie sesión o comience una prueba gratuita para ver este contenido.
Protocolo
El presente estudio y procedimientos fueron aprobados por los comités de ética de investigación animal de la Universidad de la Ciudad de Hong Kong, la Universidad de Hong Kong y el Departamento de Salud de la Región Administrativa Especial de Hong Kong.
1. Animales
- Utilice ratas Sprague-Dawley (SD) de dos meses (N .90, 200-250 g).
NOTA: Los roedores fueron proporcionados por la Unidad de Animales de Laboratorio acreditada de la Universidad de Hong Kong. - Mantener las ratas bajo una temperatura constante de 25oC y 60-70% de humedad en la Unidad de Investigación Animal de Laboratorio.
- Casa de roedores en ciclos....
Acceso restringido. Inicie sesión o comience una prueba gratuita para ver este contenido.
Resultados
El sencillo procedimiento de CHL se realizó en 90 ratas y de este grupo 2 tuvo sangrado significativo y 2 no tuvieron pérdida de audición al día siguiente, según lo evaluado por el contragolpe de aplausos conductuales. Estas cuatro ratas fueron descartadas. Las ratas deben descartarse como se describe por las razones en la discusión debido a complicaciones. Inducir la punción y/o el desplazamiento/eliminación de la TM (Figura 2B) provoca CHL, lo que resulta e.......
Acceso restringido. Inicie sesión o comience una prueba gratuita para ver este contenido.
Discusión
Describimos una simple inducción quirúrgica de CHL con verificación utilizando la visualización del otoscopio y la respuesta de sobregolpe de aplausos conductuales en rata. Aquí demostramos el método en rata y anteriormente este método se ha aplicado a jerbos y ratones. El método se puede adoptar fácilmente a otros roedores. La inducción de CHL permite el estudio de una forma sutil de pérdida auditiva que se manifiesta en alteraciones corticales auditivas y hallazgos psicofísicos del comportamiento4
Acceso restringido. Inicie sesión o comience una prueba gratuita para ver este contenido.
Divulgaciones
Los autores no declaran conflictos de intereses financieros o no financieros.
Agradecimientos
Este trabajo fue apoyado en parte por el Consejo de Becas de Investigación de Hong Kong, Early Career Scheme, Project #21201217 a C. L., para el proyecto Brain mapping guided electrophysiology with applications in hearing and noise pollution research. Agradecemos a Posgrado en Ciencias Biomédicas, el Instituto de Neurobiología de la Universidad Nacional Autónoma de México (UNAM), el Consejo Nacional de Ciencia y Tecnología (CONACyT) México por la Beca de Posgrado 578458 a FAM Manno.
....Acceso restringido. Inicie sesión o comience una prueba gratuita para ver este contenido.
Materiales
| Nombre | Empresa | Número de catálogo | Comentarios |
|---|---|---|---|
| Guantes de látex, polivinilo o nitrilo | AMMEX | Utilice guantes sin polvo Tijeras Micro Spring de 8 milésimas de pulgada | |
| (ver Fig. 1b) | RWD Life Science | S11035-08 | 8.0 cm de longitud total, con filo de corte de 3.5 mm, o micro pinzas similares. Las pinzas estándar con acción de resorte serán suficientes |
| Otoscopio mini 3000 | HEINE | D-008.70.120M El | otoscopio LED estándar será suficiente |
| Rata o ratón | JAX labs | Cualquier roedor pequeño | |
| Jaula para roedores pequeña | Tecniplast | 1284L | Necesita dos jaulas para separar el roedor CHL del roedor oyente. Si los roedores están en contacto directo entre sí, se asustarán entre sí. Dimensiones de la jaula 365 x 207 x 140 mm, superficie del suelo: 530 cm2/82,15 in2 |
Referencias
- Shargorodsky, J., Curhan, S. G., Curhan, G. C., Eavey, R. Change in prevalence of hearing loss in US adolescents. The Journal of the American Medical Association. 304 (7), 772-778 (2010).
- Lucas, J. W., Schiller, J. S., Benson, V.
Acceso restringido. Inicie sesión o comience una prueba gratuita para ver este contenido.
Reimpresiones y permisos
