Aquí presentamos un protocolo que describe la técnica de oxigenación extracorporal veno-venosa de la membrana (ECMO) en una no intubados, espontáneamente respiración de ratón. Este modelo murino de ECMO puede implementarse con eficacia en estudios experimentales de aguda y enfermedades de la pulmón de fase final.
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Artículo de método
Oxigenación por membrana extracorpórea veno-venosa en un ratón
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En este artículo
Resumen
Resumen
El uso de oxigenación por membrana extracorpórea (ECMO) ha aumentado sustancialmente en los últimos años. ECMO se ha convertido en una terapia fiable y eficaz para aguda así como enfermedades de la pulmón de fase final. Con el aumento de demanda clínica y el uso prolongado de ECMO, optimización de procedimientos y la prevención de daños en múltiples órganos son de vital importancia. El objetivo de este protocolo es presentar una detallada técnica de ECMO veno-venoso en un no-intubados, espontáneamente la respiración del ratón. Este protocolo demuestra el diseño técnico de la ECMO y pasos quirúrgicos. Este modelo murino de ECMO facilitará el estudio de la fisiopatología relacionada con ECMO (p. ej., inflamación, eventos hemorrágicos y tromboembólicos). Debido a la abundancia de ratones genéticamente modificados, los mecanismos moleculares implicados en las complicaciones relacionadas con el ECMO pueden también ser disecados.
Introducción
Oxigenación por membrana extracorpórea (OMEC) es un sistema de soporte de vida temporal que asume las funciones de los pulmones y el corazón para permitir la perfusión y el intercambio de gases adecuado. Hill et al1 se describe el primer uso de ECMO en pacientes en 1972; sin embargo, sólo llegó a ser ampliamente utilizado después de su aplicación exitosa durante la pandemia de H1N1 en el 20092. Hoy en día, ECMO habitualmente se utiliza como un procedimiento para salvar vidas en fase final corazón y pulmón enfermedades3. ECMO veno-venoso es cada vez más empleada como alternativa a la ventilación me....
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Protocolo
Los experimentos fueron realizados en ratones C57BL/6 machos, de 12 semanas de edad. Este estudio se llevó a cabo en cumplimiento de las pautas de la ley Animal bajo protocolo TSA 16/2250.
1. preparación de materiales
Nota: Todas las medidas se realizan bajo condiciones limpias, no estériles. Condiciones estériles sería necesarias si el animal debe ser sobrevivió después de la operación.
- Introducir 3 huecos en un tubo de poliuretano de 2 Fr usando una cuchilla quirúrgica en un microscopio con aumentos de 16.
Nota: Todos los huecos deben ubicarse en el tercio distal de la cánula para el drenaje de san....
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Resultados
Este protocolo describe el método de ECMO veno-venoso en un ratón. Este modelo es confiable y reproducible y en comparación con nuestro modelo previamente descrito de CPB con paro respiratorio y circulatorio12,13, es técnicamente menos exigente establecer.
Flujo ECMO en el sistema venoso se mantuvo entre 1.5 y 5 mL/min. Se mantuvo la presión arterial media entre 70 y 85 .......
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Discusión
Hemos descrito previamente, un exitoso modelo de CPC en un ratón12,13. Para implementar este modelo para aguda o trastornos de pulmón fase final hemos desarrollado un circuito ECMO veno-venoso de fácil de usar para los ratones. Diferentes al modelo del CPB, veno-venosas ECMO no requiere complicados procedimientos quirúrgicos como la esternotomía y pinzamiento de la aorta, reduciendo así el riesgo de sangrado de herida en un animal completamente heparinizado. Para.......
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Divulgaciones
Los autores no tienen nada que revelar.
Agradecimientos
Este proyecto fue apoyado por KFO 311 beca del Deutsche Forschungsgemeinschaft.
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Materiales
| Nombre | Empresa | Número de catálogo | Comentarios |
|---|---|---|---|
| Sterofundin | B.Braun Petzold GmbH | PZN:8609189 | en 1:1 con Tetraspan |
| Tetraspan 6% Solution | B. Braun Melsungen AG | PZN: 05565416 | en 1:1 con Sterofundin |
| Heparina Natrium 25.000 | Ratiopharm GmbH | PZN: 3029843 | 2,5 UI por ml de solución de |
| NaHCO3 al 8,4% | . Braun Melsungen AG | PZN: 1579775 | 3% en solución de cebado |
| Carprofeno | Zoetis Inc., EE. UU | PZN:00289615 | 5 mg / kg / BW |
| 1 Fr Catéter de PU | Instechlabs INC., EE. UU | C10PU-MCA1301 | arteria carótida |
| 2 Fr Catéter de PU | Instechlabs INC., EE. UU | C20PU-MJV1302 | vena yugular |
| 8-0 Sutura de seda trenzada | Ashaway Line & Twine Co., EE. UU. | 75290 | |
| ligadura Isoflurano | Piramal Critical Care GmbH | PZN:9714675 | Narcosis |
| Tijeras de resorte - Hojas de 6 mm | Fine Science Tools GmbH | 15020-15 | instrumentos |
| Tijeras de resorte - Hojas de 2 mm Fine | Science Tools GmbH | 15000-03 | instrumentos |
| Halsted-Mosquito Hemostat | Fine Science Tools GmbH | 13009-12 | Instrumentos |
| Pinzas Dumont #55 | Fine Science Tools GmbH | 11295-51 | instrumentos |
| Castroviejo Micro Portaagujas - 9cm | Fine Science Tools GmbH | 12060-02 | instrumentos |
| Micro Serrefines | Fine Science Tools GmbH | 18555-01 | instrumentos |
| Bulldog Serrefine | Fine Science Tools GmbH | 18050-28 | instrumentos |
| Vaporizador de isoflurano Drager 19.1 | Drä gerwerk AG & Co. KGaA anestesia | 1,3 -2,5% | |
| Dispositivo de adquisición de datos multicanal con software ISOHEART | Hugo Sachs Elektronik GmbH, Alemania | presión invasiva, ECG, t ° Dispositivo | |
| portátil C i-STAT | Abbott Laboratories, Lake Bluff, Illinois, EE. UU. | análisis de gases en sangre | |
| cartuchos i-STAT CG4+ y CG8+ | Abbott Laboratories, Lake Bluff, Illinois, EE. UU | gases en sangre | |
| C57Bl/6 ratones, machos, 30 g, 14 semanas de edad | Charles River Laboratories | alojados 1 semana antes |
Referencias
- Hill, J. D., et al. Prolonged Extracorporeal Oxygenation for Acute Post-Traumatic Respiratory Failure (Shock-Lung Syndrome). New England Journal of Medicine. 286 (12), 629-634 (1972).
- Noah, M. A., et al.
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Reimpresiones y permisos
