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Artículo de método

Modelo de ratón de úlceras por presión después de lesión de médula espinal

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DOI:

10.3791/58188

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9 de marzo de 2019

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En este artículo

Resumen

Aquí, describimos un método simple para inducir úlceras piel clínicamente relevantes (PUs) en un modelo murino de lesión de la médula espinal (SCI). Este modelo puede utilizarse en los estudios preclínicos a la pantalla para diferentes terapias de sanación PUs en pacientes.

Resumen

Las úlceras por presión (PUs) son comunes debilitantes complicaciones de lesión traumática de la médula espinal (SCI) y tienden a ocurrir en los tejidos blandos alrededor de las prominencias óseas. Se, sin embargo, conoce poco sobre el impacto del SCI en curación de herida en la piel en el contexto de modelos animales en entornos experimentales controlados. En este estudio, se presenta un modelo de ratón simple, no invasivo, reproducible y clínicamente relevante de PUs en el contexto de lesión medular completa. Ratones machos adultos (Balb/c, 10 semanas de edad) eran afeitados y depilados. Post-depilatorio (24 h), ratones fueron sometidos a laminectomía seguida de transección completa de la médula espinal (vértebras T9-T10). Inmediatamente después, un pliegue de piel en la parte posterior de los ratones fue levantado e intercalado entre dos discos magnéticos en lugar de siguiente 12 h, creando así un área isquémico que en los próximos días se convirtió en un PU. Las áreas heridas demostraron edema de tejido y desaparición epidérmico por solicitud posterior al día 3. PUs espontáneamente desarrollado y curado. Curación fue, sin embargo, más lento en los ratones SCI comparado para controlar ratones no SCI cuando la herida fue creada por debajo del nivel por el contrario, no en la curación se observaron diferencias entre ratones de no SCI SCI y control cuando la herida fue creada por encima del nivel de la médula espinal. Este modelo es una herramienta potencialmente útil para el estudio de la dinámica de desarrollo de PU de la piel y cicatrización después de SCI, así como a prueba enfoques terapéuticos que pueden ayudar a curar esas heridas.

Introducción

Las úlceras por presión (PUs) son complicaciones secundarias principales de SCI traumático1. PUs son lesiones localizadas en la piel o tejidos subyacentes que ocurren generalmente sobre las prominencias óseas donde se concentra el peso del cuerpo mientras el paciente está sentado o acostado1. La piel, grasa y músculo están expuestos a esta presión constante que lleva al desarrollo de isquemia localizada, inflamación de los tejidos, daño mecánico y necrosis2,3.

El desarrollo de PUs es afectado por varios factores, incluyendo la magnitud....

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Protocolo

Todo manejo de animales y procedimientos quirúrgicos fueron realizados conforme a un protocolo aprobado por la Universidad de Rutgers institucional Animal cuidado y uso. Ratones fueron alimentados con dieta estándar y agua ad libitum.

1. preparación de instrumentos quirúrgicos y no quirúrgicos

  1. Esterilizar los instrumentos quirúrgicos y no quirúrgicos en el autoclave.
  2. Limpiar la mesa de operaciones quirúrgica con etanol al 70% y caliente una almohadilla térmica a 37 ° C.
  3. Coloque la almohada en la mesa de operaciones y cubrir con cortinas quirúrgicas estériles.
    Nota: En todos los procedimiento....

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Resultados

Este protocolo crea un PU en el ajuste de brevemente al completo (como se ilustra en la figura 1), todos los ratones con o sin SCI completa toleraron muy bien, los imanes que permanecía en su posición original para máximo 12 h (figuras 1C, 1D, 1f, 1 h ). Todos los ratones desarrollaron dos heridas circulares separadas por un puente de tejido normal (Figura 1e, 1 g, 1i). La respuesta inicial de la herida fue simil.......

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Discusión

El protocolo en este estudio describe un nuevo modelo experimental de PUs para evaluar el impacto del SCI en la cicatrización de heridas. La piel PUs fueron inducidos a través de una aplicación de 12 h de dos imanes de disco de diámetro de 12 mm en un pliegue de piel dorsal, bien situado por encima o por debajo del sitio SCI. Los datos muestran que SCI retrasa la cicatrización de la piel en ratones. Importante, estas observaciones fueron hechas específicamente en heridas de la piel por debajo del nivel de inervación del .......

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Divulgaciones

Los autores no tienen nada que revelar.

Agradecimientos

Este trabajo fue parcialmente financiado por la Comisión de New Jersey de investigación de la médula espinal (CSCR15IRG010), el Departamento de defensa de Estados Unidos (SC160029) y el Yale Departamento de cirugía Ohse subvención programa de investigación. Agradecemos a Sean o ' Leary del centro W.M. Keck de Neurociencia colaboración, Rutgers para asistencia técnica.

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Materiales

Lista de materiales utilizados en este artículo
NombreEmpresaNúmero de catálogoComentarios
ImanesMaster Magnetcs, Inc., Castle Rock, COCD14C3800 G Fuerza magnética
Ratones dieta estándarPMI Nutrition International, Brentwood, MOAlimento estándar
Pellet isofluranoHENRY SCHEIN Salud animal SKU 029405
ImageJNIH, Bethesda, MDSoftware de análisis de imágenes
BETADINE Surgical ScrubHENRY SCHEIN Animal Health 
Pomada oftálmica HENRY SCHEIN Salud Animal SKU 008897
NAIR-Loción DepiladoraChurch & Dwight Co., Inc. Princeton, NJ
ELOXIJECT (meloxicam) InyecciónHENRY SCHEIN Salud Animal SKU 0497555 mg/mL, 10 mL
Cefazolina SódicaHENRY SCHEIN Salud Animal SKU 054846frasco de 1 g y 10 ml
Buprenorfina-SR ZooPharm, Windsor, CO--
0.9% Inyección de cloruro de sodio USPBRAUN, Irvine, CAS8004-5384
10% Formalina tamponada neutra VWR, Radnor, PA16004-130
BALB/C Ratón machoCharles River Lab., Wilmington, MA28
Aplicador estéril con punta de algodónPuritan, Guilford, MESKU#: 25-806
Michel Sutura ClipsFine Science Tools (USA) Inc., Foster City, CA12040-01
Sutura quirúrgica, U.S.P.Henry Schein Salud Animal  101-2636

Referencias

  1. Rappl, L. M. Physiological changes in tissues denervated by spinal cord injury tissues and possible effects on wound healing. International Wound Journal. 5 (3), 435-444 (2008).
  2. Salcido, R., Popescu, A., Ahn, C. Animal models in....

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Reimpresiones y permisos

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